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- 百奥莱博
- BTN70903-UBY
- 北京
- 2025年07月14日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
368
- 英文名：
One-step plasmid DNA extraction kit 2.0
- 保质期：
一年
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
常温运输及保存(溶液A需要4℃)
- 规格：
50次
特别提示：包括一步法质粒DNA提取试剂盒2.0在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
产品名称：一步法质粒DNA提取试剂盒2.0
英文名称：One-step plasmid DNA extraction kit 2.0
产品货号：BTN70903
产品规格：50次
基于碱变性原理的质粒小量制备(Miniprep)是分子克隆研究中最常用的方法之一，其操作包括三种溶液处理，一般需要30分钟左右的时间才能得到可以上柱的质粒DNA初提液。本产品采用百奥莱博自主开发的一步式细菌裂解技术，只需要一种溶液处理即可以完成细菌裂解，并且裂解物可以直接上柱纯化质粒DNA。
试剂盒特点：
1.一步式裂解细菌，比传统的碱变性方法更快捷。
2.产量跟经典碱变性法相当或更高，产率一般为3-5μg质粒DNA/mL 饱和菌液(对高拷贝质粒而言)。
3. DNA 纯度高，OD260/280一般在1.8左右，基因组DNA和RNA污染少。
4.可以直接用于电泳、酶切、PCR、细菌转化、分子克隆、测序等实验。
5. 重复性和稳定性好。
试剂盒组成：
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 50ml |
| 离心吸附柱 | 50只 |
| 通用预洗液 | 50ml |
| 通用洗柱液 | 100ml |
| DNA洗脱液2.0 | 10ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件：常温运输及保存(溶液A需要4℃保存)，有效期一年。
使用方法：
1. 用塑料离心管收集不超过3mL 过夜培养饱和菌液，室温12000～15000g离心半分钟，弃上清。注意:不能超过3mL菌液，否则质粒回收率将急剧降低。
2. 加入0.6-1mL溶液A(用前需摇匀)，充分吹打或振荡裂解细菌直到裂解变澄清，一般需要半分钟左右。注:此方法不同于碱裂解法，故可以充分吹打。
3. 将裂解液全部转移到离心吸附柱中，室温静置2分钟使质粒DNA与膜结合。室温12000～15000g离心半分钟，弃穿透液。如果一次不能将上清全部转移到离心吸附柱中，可以分两次进行。
4.在离心吸附柱中加入0.7mL的通用预洗液，室温12000～15000g离心半分钟，弃穿透液。注意: 如果通用预洗液放置在低温产生了沉淀，用前需要加热到60℃左右使之融化，混匀后再用。
5. 再在离心吸附柱中加入0.3mL的通用预洗液，室温12000～15000g离心半分钟，弃穿透液。此步预洗最好别省略，否则DNA 纯度不高。
6.在离心吸附柱中加入0.7mL的通用洗柱液，室温12000～15000g离心半分钟，弃穿透液。
7. 再在离心吸附柱中加入0.7mL的通用洗柱液，室温12000～15000g离心半分钟，弃穿透液。此为第二次洗涤。
8. 再在离心吸附柱中加入0.4mL的通用洗柱液，室温12000～15000g离心半分钟，弃穿透液。此为第三次洗涤，如果不洗涤三次，最后得到的质粒DNA的OD260和280的比值达不到1.8。
9.室温 12000～15000g离心半分钟，甩干残留液体。注意：此步不能省略，否则残留乙醇会影响后续的电泳上样(DNA 沉不到加样孔里去)和酶反应。
10. 将离心柱置于一个新的1.5mL自备塑料离心管中，加入30-100μl DNA 洗脱液2.0，室温放置2分钟。如果将DNA 洗脱液2.0预热到65-80℃，则效果更好。
11.室温 12000～15000g离心半分钟，离心管底溶液即质粒DNA，可以直接用于后续实验或放冰箱长期保存。
注意：如果需要去除DNA样品中的内毒素，请使用百奥莱博的液相内毒素清除剂。
除了一步法质粒DNA提取试剂盒2.0,，我公司还供应以下相关产品：
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| MT0050 | 血液微量DNA提取试剂盒 | 50T |
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原理：盐类多糖及有机溶剂、蛋白、酚类分别在波长 230nm、280nm、270nm 处有最高的吸收峰，核酸在 260nm 处有最高的吸收峰。 因此，可以根据吸收峰对应的数值来对核酸进行定量与纯度检测。以质粒 DNA 为例，A260/A280 应该在 1.8-2.1 之间，如果低于 1.8，则有可能样品中有蛋白质等杂质污染，如果高于 2.1，则有可能有 RNA 污染；而 A260/A230 比值应≈2.0，如果低于 2.0，则有可能样本中有盐类或有机溶剂杂质污染。但是有时 A260/A230 的比值不在
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