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- 国产
- YLK-F0097
- 2025年08月15日
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1年
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200
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优利科（上海）生命科学有限公司
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50次
产品名称：一步式质粒DNAout2.0
规格：50次
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核酸概述：
一、核酸的分类
生物的核酸包括脱氧核糖核酸DNA和核糖核酸RNA两大类；细胞中的RNA包括mRNA、tRNA、rRNA三大类。
二、生物的遗传物质
1.某些病毒以RNA为遗传物质。这些病毒又叫做RNA病毒，所含核酸也只有RNA。如HIV、H1N1、SARS、烟草花叶病毒等。
2.还有某些病毒以DNA为遗传物质，这些病毒又叫做DNA病毒，所含核酸也只有DNA。如T2噬菌体等。
3.以细胞为结构和功能基本单位的生物，细胞中同时含有DNA和RNA。
包括所有的原核生物、真核生物。这些生物都以DNA为遗传物质，而不以RNA为遗传物质。
三、核酸的分布
1.RNA病毒的RNA由核衣壳包裹，不与组蛋白结合成染色体。
2.原核细胞的RNA分布在细胞质基质、核糖体中，不与组蛋白结合成染色体。
3.真核细胞的RNA分布在细胞核、细胞质基质、线粒体、叶绿体、核糖体中，不与组蛋白结合成染色体。
4.DNA病毒的DNA由核衣壳包裹，不与组蛋白结合成染色体。
5.原核细胞的DNA分布在拟核、质粒中，不与组蛋白结合成染色体。
6.真核细胞的DNA主要分布在细胞核中，与组蛋白结合成染色体。
7.真核细胞的线粒体、叶绿体两种细胞器也具有自己的DNA和RNA。但都不与组蛋白结合成染色体。
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文献和实验一步法提取质粒DNA主要用于鉴定阳性克隆。 主要步骤如下： 收集1.5mL菌体，彻底除去培养基； 加入50ulSTE缓冲液重悬菌体； 加入50ul酚：氯仿;异戊醇（25：24：1），混匀； 12000rpm离心5分钟，取上清到另一离心管中； 加入NH4Ac至终浓度2M，并加入2倍体积的乙醇，混匀，室温或冰上放置几分钟； 12000rpm离心5分钟，弃上清，75%乙醇清沉淀； 沉淀干后，以水或TE缓冲液溶解，便
温度越来越低[2 ] ,从而达到最佳扩增条件的方法。我们在构建人 CD137 - hIgG1Fc - pCDNA3 融合蛋白真核表达载体以及在检测HBV DNA 多聚酶基因突变的过程中运用降落PCR 进行了扩增目的基因的尝试。1 材料和方法1.1 质粒含有人CD137 全长cDNA 序列的pCDNA3 质粒(CD137 - pCDNA3) ,由Herbert Schwarz 教授惠赠; 含hIgG1 FccDNA的PGEM - T质粒由第二军医大学曹雪涛教授惠赠; HBV DNA ,从6 位慢性HBV 感染者血清
mmol/L Tris HCl（pH8.0）10 mmol/L EDTA（pH8.0）Tips：这一步主要作用是重悬菌体，EDTA 是金属螯合剂，主要作用是防止下一步的裂解过程中内切酶对质粒进行切割。4. 加入 200ul 新配置的溶液 II，盖紧管口，快速颠倒离心管 5 次，切勿震荡，将离心管置于冰上。溶液 Ⅱ0.2 mol/L NaOH（临用前用 10 mol/L 贮存液现用现稀释）1% SDS Tips：菌体在强碱性条件下裂解，释放出包括质粒在内的核酸，蛋白等物质。注意混匀要轻柔
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