PCR/DNA纯化试剂盒

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北京百奥莱博专业生产供应PCR/DNA纯化试剂盒，我公司销售全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

PCR/DNA纯化试剂盒
编号：YT009
英文名：PCR CleanUp Kit;DNA Purification Kit
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
规格：50次

PCR纯化试剂盒，也称DNA纯化试剂盒是一种用于PCR产物纯化或从多种DNA反应体系中纯化DNA的试剂盒。
适用于PCR反应后去除引物，酶，矿物油，甘油，盐等杂质；也同样适用于酶切，连接，磷酸化，补平或切平，随机引物等反应后的DNA纯化。所得DNA可直接用于酶切，连接，转化细菌，测序，PCR，杂交等后续操作。本试剂盒适用于纯化100bp-10kbDNA，长至30个碱基的引物均可被完全去除。
本试剂盒采用了一种新型的离子交换柱。在特定条件下，使DNA能在离心过柱的瞬间，结合到DNA纯化柱上，在一定条件下又能将DNA充分洗脱，从而实现DNA的快速纯化。无需酚氯仿抽提，无需酒精沉淀，12个样品只需不足15分钟即可完成。
每个DNA纯化柱可以结合的DNA量的上限约为15微克。
DNA回收效率约为90%。接近100bp或10kb的DNA片断回收效率要略低一些，大于10kb的DNA回收效率迅速下降。另外如果样品中DNA含量特别低也会导致回收效率下降。
每个试剂盒足够纯化50个平均体积不超过400微升的DNA样品。
保存条件：
室温保存，一年有效。
注意事项：
第一次使用前在溶液II(洗涤液)中加入39ml无水乙醇，混匀，并在瓶上做好标记。溶液I对人体有刺激性，操作时请小心，并注意适当防护。
本试剂盒所有操作均在室温进行，操作时无需冰浴。所有离心也均在室温进行。废液收集管在一次抽提中需多次使用，切勿中途丢弃。

使用说明：
1.加入等体积的溶液I，混匀。例如如DNA样品体积为100微升，则加100微升溶液I。如果等体积混合后体积较大，可以把部分样品加入到纯化柱内，经离心处理后，再加入剩余的样品继续处理。矿物油对于本试剂盒没有干扰。
2.加入到DNA纯化柱内，室温放置1分钟。
3.最高速(16000g，约12000-14000rmp左右)离心1分钟，倒弃收集管内的液体。注意：这一步一定要达到16000g，较低离心速度会导致回收效率下降。
4.在DNA纯化柱内加入700微升溶液II，室温放置1分钟。
5.最高速离心1分钟，洗去杂质。倒弃收集管内的液体。
6.再加入500微升溶液II，最高速离心1分钟，进一步洗去杂质。倒弃收集管内的液体。
7.最高速再离心1分钟，除去残留液体并让残留的乙醇充分挥发。
8.将DNA纯化柱置于1.5毫升离心管上，加入30微升溶液III至管内柱面上，放置1分钟。用1.5ml离心管作为收集管。溶液III需要直接加至管内柱面中央，使液体被纯化柱吸收。如果不慎将溶液III沾在管壁上，一定要震动管子，使液体滑落到管底，以便被纯化柱吸收。也可以用重蒸水或MiliQ级纯水替代溶液III，但是水的pH应不小于6.5。如需得到较高浓度的DNA，可以只加20微升溶液III，但产量会略有下降。放置较长时间例如3-5分钟，会对提供产量略有帮助。
9.最高速离心1分钟，所得液体即为高纯度DNA。

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·EMSA突变探针-AP1(10μM)
编号：YT197
规格：30μl

EMSA突变探针－AP1是用于EMSA(也称gel shift)研究的AP1 consensus oligonucleotide的突变体。可以作为EMSA探针－AP1的阴性对照，用于EMSA结合反应中突变探针的冷竞争反应等。
EMSA突变探针－AP1的序列如下：
5’-CGC TTG ATG ACT TGG CCG GAA-3’
3’-GCG AAC TAC TGA ACC GGC CTT-5’
EMSA突变探针－AP1中AP1的公认的结合位点发生了突变，从而使AP1无法和该突变探针结合。在探针冷竞争反应中，正常的标记探针和AP1的结合的条带会被抑制；而在突变探针冷竞争反应(cold competition)中，正常的标记探针和AP1的结合的条带不会被抑制。
1,阴性对照反应(标记探针)；2,常规反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针)；3,探针冷竞争反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针＋标记探针100倍量的未标记探针)；4,突变探针的冷竞争反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针＋标记探针100倍量的未标记突变探针)；5,Super-shift反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针＋目的转录因子的特异抗体)。
一个包装的突变探针，如果用于同位素标记EMSA探针的突变探针冷竞争反应，可以进行90-180个突变探针的冷竞争反应。如果用于生物素标记探针的冷竞争时，可以进行约30个冷竞争反应
保存条件：
-20℃保存，一年有效。
注意事项：
避免加热到40℃以上，温度过高会导致双链DNA探针解聚成单链。而单链无法用于EMSA研究。



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