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- 2025年07月14日
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玻片芯片
人炎症因子抗体芯片3（40）抗体列表AbL-47
RayBio® Human Inflammation Antibody Array 3 (40) Antibody List
半定量检测40个指标
| Eotaxin / CCL11 | IL-1 beta | IL-10 | IP-10/ CXCL10 | PDGF-BB |
| Eotaxin-2/ CCL24 | IL-2 | IL-11 | MCP-1/ CCL2 | RANTES/ CCL5 |
| GCSF | IL-3 | IL-12 p40 | MCP-2/ CCL8 | sTNF RI/ TNFRS1A |
| GM-CSF | IL-4 | IL-12 p70 | M-CSF | sTNF RII/ TNFRS1B |
| I-309/ CCL1 | IL-6 | IL-13 | MIG/ CXCL9 | TGF beta 1 |
| ICAM-1 | IL-6 sR | IL-15 | MIP-1 alpha/ CCL3 | TIMP-2 |
| IFN gamma | IL-7 | IL-16 | MIP-1 beta/ CCL4 | TNF alpha |
| IL-1 alpha | IL-8 | IL-17 | MIP-1 delta/ CCL15 | TNF beta |
一、实验原理
该芯片采用夹心法，其原理是将捕获抗体预先固定在固相载体上，生物样品加入到芯片上一起孵育反应后，其特异性的抗原与捕获抗体结合，然后加入生物素标记的检测抗体一起孵育，最后通过HRP-链霉亲和素与化学发光底物、或者荧光染色剂-链霉亲和素结合作为信号检测。基于“三明治”双抗体夹心法建立的芯片，高品质的抗体对是此方法的关键，夹心法有很高的灵敏度，检测浓度可以低至1-10 pg/mL;每增加检测一个蛋白，芯片上就需要增加一个抗体对，这样可能出现交叉反应，因此需要将每个抗体对与芯片上其他抗体对进行检测，验证是否可以引入这个抗体对，且不对其他抗体对检测造成干扰，通过优化筛选将交叉反应降到最小。
由于抗体对之间可能存在的相互影响，夹心法抗体芯片一次性检测蛋白的数量有所限制，但是可以用于蛋白的定量检测。目前，RayBiotech验证配对的抗体对有大于600种抗体对，基于双抗体夹心法开发的半定量芯片有40多种，定量抗体芯片有大于45种，涵盖的因子450多个，包括炎症因子、凋亡因子、生长因子、肥胖因子、血管因子、信号转导磷酸化、白介素等等各个疾病相关的因子。夹心法芯片具有特异性好、灵敏度高、重复性和稳定性好的优点。
二、实验原理图：
三、芯片载体的区别和选择：
RayBiotech 的芯片共有2种载体，一种是膜载体，一种是玻片载体。
1. 膜载体，就类似于Western Blot 实验采用的NC膜或PVDF膜，采用ECL化学发光作为显色信号，这种膜载体相对玻片载体使用时，需要等多一些样品用量，但凡是可以用于WB实验室的都可以使用RayBiotech的膜芯片，通用性高。
2. 玻片载体，是采用载玻片一样的玻璃片作为芯片载体，用Cy3或Cy5，绿色荧光信号作为显色信号，样品用量少，但需要与基因芯片通用的荧光扫描仪。
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文献和实验光报告分子，常用的荧光扫描仪都能够完成。第一代的蛋白芯片和DNA芯片一样是作为一种定性分析的工具，可用于分析样品之间相关蛋白的相对表达丰度；还可以作为DNA芯片的补充，用于研究蛋白和基因表达之间的关系。操作流程Ab Microarray 380抗体芯片并不要求特殊的实验操作，只要一般常规的操作就可以完成以往极为复杂耗时的工作。整个操作流程包括：从50～200mg组织或细胞、体液中进行蛋白质抽提——用Cy5和Cy3两种不同颜色的荧光分子分别标记两个样品——洗去多余的标记分子——与芯片杂交孵育——扫描分析
Array上那8300个基因对应的80碱基长寡核苷酸序列是经过Clontech公司专利软件在GenBank中筛选出的同源性最低，又经Clontech实验确保能给出很强杂交信号的片断。这种精巧的设计保证很高的分辨率、灵敏度，实在令人印象深刻。现在，你可以通过基因公司定购这些寡核苷酸来制作自己的芯片了。足够点1000次芯片的8327个人类基因、5002个小鼠基因或者将近4000个大鼠基因的寡核苷酸片断（冻干）放在96孔板中，连同100个Type II玻片和杂交盒，200ml杂交液，全面满足中小型实验项目
的新方法。这种新技术使得研究人员可以在一次实验中比较生物样品中成百上千的蛋白质的相对丰度，将极大促进蛋白质组目前的研究状况——因为以现有的技术中对蛋白质进行这种复杂的分析是非常困难的。 Clontech公司第一代的抗体芯片Ab Microarray 380（Cat.No.K1847-1）包含固定在玻璃片基上的378种已知蛋白质的单克隆抗体，可以在一次简单实验中同时检测样品中的378种蛋白质的表达情况，并且可以在一张芯片上对两种样品的表达模式进行比较分析。这使得抗体芯片
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