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- RayBiotech
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- 2025年07月16日
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玻片芯片
人类生物素标记法抗体芯片——玻片芯片
半定量检测507个指标
检测指标图谱：http://www.raybiotech.com/L_series_map.asp
标记法芯片是RayBiotech的L-系列芯片，L-系列芯片只需要一个捕获蛋白，它用生物素标记样品来代替标记检测抗体。这种模式可以检测那些没有合适的抗体对来建立ELISA检测的分析物。因为溶液中没有自由的检测抗体与其他抗体相互作用产生干扰试验，基于抗体相互作用产生的交叉反应就可以避免，所以引入新的抗体到标记芯片上比较容易，一个芯片上可以有几百个甚至几千个抗体。标记法芯片适合于大批量的筛选试验，且标记法芯片节省时间和操作步骤。
二、试剂盒内容
- 玻片芯片---RayBio® Human Cytokine Antibody Array glass
- 标记试剂（1管）---Labeling Reagent
- 内参---Internal control
- 终止液----Stop Solution
- 封闭缓冲液---1X Blocking Buffer
- 500X 的HRP-链霉亲和素---1,000X HRP-Conjugated Streptavidin
- 20X的洗液I ---20X Wash Buffer I
- 20X 的洗液II---20X Wash Buffer II
- 2X 的细胞裂解液---2X Cell Lysis Buffer
- 检测缓冲液C---Detection Buffer C
- 检测缓冲液D---Detection Buffer D
- 透析柱---Spin Column
- 孵育板---Plate
三、结果扫描
RayBiotech 的芯片共有2种载体，一种是膜载体，一种是玻片载体。
1. 膜载体，就类似于Western Blot 实验采用的NC膜或PVDF膜，采用ECL化学发光作为显色信号，这种膜载体相对玻片载体使用时，需要等多一些样品用量，但凡是可以用于WB实验室的都可以使用RayBiotech的膜芯片，通用性高。
2. 玻片载体，是采用载玻片一样的玻璃片作为芯片载体，用Cy3或Cy5，绿色荧光信号作为显色信号，样品用量少，但需要与基因芯片通用的荧光扫描仪。
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文献和实验商之—，其产名为GEMTM芯片，每张片子上最多可以含有10000点，对样品中mRNA的检出限达到2pg，对两种来源样品中的基因差异表达的检出限为2倍。 cDNA芯片的使用方法——样品制备和杂交 样品制备包括分离和标记两个方面，有些样品还婴经过核酸扩增放大这一步骤。样品制备的一般过程是：提取待检样品中的mRNA，反转录成cDNA，同时标记上荧光(荧光标记为最常用的方法．优点是无放射性且有多种颜色可供使用；研究者可以根据需要选用其它标记方法，例如同位素标记法、化学发光法或酶标法；如果目的是研究两种
是分辨率及灵敏度较低。根据生物芯片所使用的标记物不同，相应的信号检测方法有放射性同位素标记法、生物素标记法、荧光染料标记法等。其中放射性同位素由于会损害研究者身体，所以这种方法基本已被淘汰。而生物素标记样品分子则多用在尼龙膜作载体的生物芯片上，因为在尼龙膜上荧光标记信号的信噪比较低，用生物素标记可提高杂交信号的信噪比。目前使用最多的是荧光标记物，相应的检测方法也最多、最成熟，主要有激光共聚焦显微镜、CCD相机、激光扫描荧光显微镜及光纤传感器等。本文主要介绍激光共聚焦及CCD生物芯片扫描仪的弱信号
Array上那8300个基因对应的80碱基长寡核苷酸序列是经过Clontech公司专利软件在GenBank中筛选出的同源性最低，又经Clontech实验确保能给出很强杂交信号的片断。这种精巧的设计保证很高的分辨率、灵敏度，实在令人印象深刻。现在，你可以通过基因公司定购这些寡核苷酸来制作自己的芯片了。足够点1000次芯片的8327个人类基因、5002个小鼠基因或者将近4000个大鼠基因的寡核苷酸片断（冻干）放在96孔板中，连同100个Type II玻片和杂交盒，200ml杂交液，全面满足中小型实验项目
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