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- 文献和实验
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- 保存条件:
负80度
- 保质期:
3年
- 英文名:
pCS2-nCas9n鱼类编辑质粒
- 库存:
100
- 供应商:
上海柯雷生物
- 规格:
20ul
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文献和实验诺奖得主 Science 发文:基因编辑诞生 10 年,未来将如何改变世界?
。 特定碱基位点的编辑修改 点突变是人类致病性遗传变异的最大类别,特定于位点的编辑修改拓宽了研究基因点突变的能力,并且可以通过纠正点突变来治疗遗传性疾病。此外,碱基编辑可以在有丝分裂和无丝分裂细胞中引入修饰。 CRISPR 碱基编辑器通常由 Cas9 切口酶(nCas9)和催化核碱基脱氨反应的酶融合组成。sgRNA 将 nCas9-脱氨酶融合引导至基因组靶标,形成三元复合物,将 ssDNA 区域暴露于脱氨酶以进行化学修饰,由此产生的碱基错配随后通过细胞修复机制解决。在过去的几年中,DNA
到 Cas9(D10A) 的 N 末端,并将核定位信号 (NLS) 肽添加到 Cas9(D10A) 的 C 末端,构建了 APOBEC1-XTEN-Cas9(D10A) 植物基因组单碱基编辑系统。利用该系统对水稻 NRT1.1B 和 SLR1 进行编辑,结果表明该系统能在靶位点产生预期的 C→T(G→A) 碱基替换,NRT1.1B 和 SLR1 在靶位点产生预期突变的效率分别为 2.7% 和 13.3%。夏兰琴和赵云德合作团队也利用 APOBEC1、Cas9 变体 (nCas9-D10A) 和 UGI
和有实际意义的。考虑到速度和相对简单化因素,GEM-ESC 和 CRISPR/Cas9 技术可作为快速验证潜在肿瘤基因的首选方法。特别是应用基于体细胞的 CRIPPR/Cas9 介导基因编辑技术,建立非遗传修饰的小鼠模型,实现高通量体内验证潜在肿瘤基因的目的。比如,应用 DNA 注射与活体电穿孔法相结合的转染方法,将针对引起胰腺管腺癌(PDAC)的 13 个不同主要肿瘤抑制相关基因的 15 个 gRNAs/Cas9 表达质粒混合物一起导入成熟小鼠的胰腺,构建同时修饰此 13 个基因的小鼠模型。结果显示
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