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- 2025年10月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
负20度
- 保质期：
2年
- 英文名：
pGEM-3Zf(+)
- 库存：
100
- 供应商：
kelei-bio
- 规格：
20μl
启动子: Lac/lac
复制子: ColE1 ori，F1 ori
质粒分类: 大肠杆菌载体；克隆质粒
质粒大小: 3197bp
质粒标签: LacZ
原核抗性: 氨苄青霉素Amp
克隆菌株: DH5α
培养条件: 37℃，有氧，LB
5'测序引物: M13R:CAGGAAACAGCTATGACC
3'测序引物: M13F:TGTAAAACGACGGCCAGT
备注: 蓝白斑筛选
质粒简介
pGEM-3Zf(+)可作为一般克隆载体和高效率RNA体外合成的模板，此载体含SP6和T7RNA聚合酶启动子，还含有lacZct-肽基因及单克隆位点，可在含IPTG和X Gal的平板上对重组子进行蓝/白筛选。此载体含有丝状噬菌体fl的复制起点，可诱导产生单链DNA。pGEM 3Zf(+)表示其fl是正方向的，pGEM-3Zf(+)特征图谱见图。
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文献和实验片段。 3.目的片段的克隆 纯化的片段连接到克隆载体pGEM-Tvector，转化导入宿主菌E.coliDH5α，通过蓝白斑筛选，PCR扩增鉴定后测序，获得的含所需要的目的片段的质粒。 （1）pGEM®-TEasy载体系统 I.描述 pGEM®-TEasy载体系统可用于PCR产物的克隆。这种载体是通过EcoRⅤ酶切pGEM®-5Zf(+)和pGEM®-TEasy载体，并在3’末端加入胸腺嘧啶构建的。插入位点3’-T突出端可提高PCR产物的连接效率，因为3’-T突出端可以防止载体的自身环化，并且为
冲液后，PCR扩增TFPI基因。 (二)TFPI基因的体外重组与测序 以EcoRI和BamHI双酶切扩增出的TFPI基因和pGEM-3Zf(-)质粒，在T4DNA连接酶的作用下，将TFPI基因与pGEM-3Zf(-)质粒重组获得pGEM-3Zf(-)-TFPI克隆质粒，转化大肠杆菌DH5α，涂LBA平板，挑阳性克隆。 为了保证所获基因的准确性，必须对其进行DNA序列测定。现有许多生物技术公司能够提供测序服务，其快捷、方便，且价格合理，为大多数实验室所采用。 (三)表达
zhangyuxianggx 各位大侠好！现有pcDNA3-mCherry和pGEM-hgene两个东西在滤纸上，老师就说让构建载体，具体是什么意思啊？我理解的是一个真核表达载体和构建好的pGEM质粒，但是不知下一步该怎么做？恳请各位好心的大侠指点一二。 shylook 直接插入cDNA吧 zhangyuxianggx 那个pGEM就是已经插入了DNA的载体。请问这两个东西溶下来以后
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