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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
复祥生物
- 细胞类型:
普通细胞株-科研实验
- 物种来源:
小鼠
- 器官来源:
小鼠肝
- 运输方式:
常温或干冰
- 生长状态:
正常
- 库存:
大量
Hepa 1-6小鼠肝癌细胞
细胞株名称:Hepa 1-6小鼠肝癌细胞
种 属 :小鼠
组 织 来源:肝;肝癌
生 长特 性:贴壁生长
形 态特 征:上皮细胞
描述:此细胞株源自C57/L小鼠中引发的BW7756肝癌。此细胞可以在无血清的培养基中繁殖,培养基成分是:DMEM,75%; Waymouth’s MAB 87/3培养基,25%。添加3x10-8M硒。测试发现肢骨发育畸形畸形病毒(鼠痘)阴性。
培养条件:完全培养基:DMEM培养基(GIBCO,货号12800017,添加NaHCO3 1.5g/L),90%;优质胎牛 血清,10%。
培养条件:37℃ carbon dioxide(CO2),5%
传代方法:收到细胞后,取出培养瓶在倒置显微镜下观察细胞生长情况。
(一)如果细胞未长满,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内,严格无菌操作,打开细胞培养瓶,吸出培养液,仅留下10ml培养液在瓶内继续培养。
(二)如果细胞已长满,即可进行传代培养。具体步骤如下:
1. 弃去培养液,用PBS(不含钙,镁离子)洗1-2次。
2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,倒转放于37度培养箱1-3分钟预热,然后又将培养瓶倒转大约30秒后,在倒置显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆分散,轻敲几下培养培养瓶,细胞随即脱落下来。
3. 加入6-8ml完全培养基,吸出,分到新的培养瓶中。一传二。
注意:传代后细胞应该用新鲜的培养液,原瓶中的培养液不能再使用。在运输过程中可能会导致一些贴壁不牢的细胞发生部分脱落,可离心吹打后重新种入瓶中培养。
冻存方法:冻存液:90%完全培养液,10%DMSO
储存:液氮储存
ATCC® Number: CRL-1830™
Designations: Hepa 1-6
Depositors: GJ Darlington
Biosafety Level: 1
Shipped: frozen
Medium & Serum: See Propagation
Growth Properties: adherent
Organism: Mus musculus (mouse)
Morphology: epithelial
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文献和实验HEPA过滤器。 高浓度的抗生素和抗霉菌素可能对一些细胞系有毒性,因而,做剂量反应实验确定抗生素和抗霉菌素产生毒性的剂量水平。这点在使用抗生素如两性霉素B和抗霉菌素如泰乐菌素时尤其重要。下面是推荐的确定毒性水平和消除培养污染的实验步骤。 1) 在无抗生素的培养基中消化、计数和稀释细胞,稀释到常规细胞传代的浓度。 2 )分散细胞悬液到多孔培养板中,或几个小培养瓶中。在一个浓度梯度范围内,把选择抗生素加入到每一个孔中。例如,两性霉素B推荐下列浓度,0.25,0.50,1.0,2.0
8000系列CO2培养箱具有专业的灭菌和抑菌功能。如140℃,12Hour干热灭菌,能有效杀死各种微生物;Hepa过滤器,腔体内达到100级空气质量;不锈钢抛光内胆,有效抑制微生物附着;银离子消毒盒防止水盘中水染菌等,为您的细胞培养保驾护航。 图 1 Thermo Scientific 8000 CO2培养箱 二、纯水系统 细胞培养用水一般要求双蒸水(0.8MΩ以上),实际上普通蒸馏水经玻璃器皿中按标准方法蒸馏二次得到的双蒸水是不能满足要求的,而且水中的内毒素直接参与细胞凋亡,血清
最近隔壁老王的青年基金终于申请下来,可是老王是搞化学工程出身的,对生物这块压根就不懂(ta shi nao can),这不,今儿就来找我了。 老王:大师兄细胞咋养? 大师兄:你猜,或者你去丁香通找找 老王:我找了,内容太多,要不你给我讲讲 大师兄:那好吧,那我就先从无菌操作开始 首先,实验进行前,无菌室及无菌操作台,要用紫外灯照射 30-60 分钟灭菌,然后开启无菌操作台风扇运转10 分钟后,用75% 酒精擦拭无菌操作台面,并才能开始实验
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