- ￥500 - 1000
- CloneSmarter
- C5855/5865-10
- 美国
- 2025年07月15日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
100
- 英文名：
CloneSmarter
- 保质期：
2年
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 保存条件：
-20℃
- 规格：
50T
载作用载体抗体：Amp
作用：既适用于平末端克隆，又适用于末端加A片段克隆
TOPO克隆技术：1997年诞生的TOPO克隆技术，颠覆了之前的一切，5分钟即可完成连接实验！
Clone Smarter第二代克隆载体：Vaccinia TopoisomeraseI 牛痘病毒拓扑异构酶I特异性识别topo载体 5 ’ -CCCTT-3’序列并形成中间体，与之共价结合的TopoisomeraseI 能将切开的载体片段和具有5’-OH 的DNA片段迅速连接起来
1. 真正做到零背景！载体不会自连！
由于 拓扑异构酶I可以把任何DNA连接起来，所以TOPO载体自连的背景高
但Clone Smarter克服了这一点，该独特技术全球独有！
长的就是对的，无需再次筛选！
2. 高效率（ 转化子数更多，阳性率更高， ≥5kb基因仍有95%以上的阳性率）
酶已偶联到载体上，连接效率更高
3. 省时： 连接+转化最快仅5min ( 真正做到长片段连接5min也能保证足够转化子 )
4. 无需蓝白班筛选：载体不含LacZ基因，平板无需涂IPTG和X-Gal（ 省时省钱），不会产生“白边蓝芯”克隆菌
5. 操作简单： PCR片段 + TOPO载体 + 增强剂 ，PCR产物无需酶切，室温下连接混匀 时间 ≤5min 即可转化
6. 耐受部分毒性基因：由于载体含有3个终止子，能最大程度降低表达背景，可耐受一些低毒性基因的克隆
7. 原装进口， 超高性价比：按照5ul体系实验，成本不足11元/次！
25次！（10ul体系） 载体浓度高达20ng/ul
（ Clone Smarter试剂盒提供的载体量按照110%提供，多提供了10%的优惠量！）
C5855 载体不含酶切位点
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文献和实验表达载体的构建方法及步骤 一、载体的选择及如何阅读质粒图谱 目前，载体主要有病毒和非病毒两大类,其中质粒 DNA 是一种新的非病毒转基因载体。 一个合格质粒的组成要素： （1）复制起始位点 Ori 即控制复制起始的位点。原核生物 DNA 分子中只有一个复制起始点。而 真核生物 DNA 分子有多个复制起始位点。 （2）抗生素抗性基因可以便于加以检测，如 Amp+ ,Kan+ （3）多克隆位点 MCS 克隆携带外源基因片段 （4） P/E 启动子/增强
方法【实验原理】DNA 连接酶可以在两个双链 DNA 分子相邻的 5'-磷酸与 3'-羟基之间形成磷酸二酯键，从而可以实现重组 DNA 分子的构建。一般在连接反应之前，DNA 分子都要进行限制性内切酶消化，使待重组的 DNA 分子具有相匹配的末端，黏性末端连接和平齐末端连接是最常用的，但不匹配的末端也可以经过修饰实现连接。下面以质粒 DNA 为载体，介绍目的 DNA 片段与载体的连接。黏性末端的连接涉及三种情况：①载体和 DNA 片段经双酶切后，两端具有不同的粘端，可以直接进行连接反应。②载体和 DNA
体会有什么不一样？有两种情况：一是两个复制起点适用的宿主细胞不一样，比如说，一个复制起点适合于大肠杆菌，因为大肠杆菌是基因工程中使用频率最高的宿主菌，另一个复制起点适合于另一种细菌或真核生物细胞，那么这种克隆载体常称之为穿梭载体（shuttle vector），换言之，穿梭载体可在两种生物内进行来回的穿梭；另一种情况是同一个载体中的两个复制起点都是适合于一种细胞的，只不过这两个复制起点分别是在一定遗传背景条件下起作用，这种类型的载体多数是属于大肠杆菌的载体。 克隆载体的克隆位点 分子克隆载体
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