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    首页 / 试剂 / 克隆与表达 / 克隆试剂盒 / Hieff Clone® Universal Zero TOPO TA/Blunt Cloning Kit

    Hieff Clone® Un

    iversal Zero TOPO TA/Blunt Cloning Kit
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    Hieff Clone® Universal Zero TOPO TA/Blunt Cloning Kit
    价格： ￥175 - 1383
    品牌： Yeasen 已认证
    试用品规格： 5 T
    助力试用 召集好友助力，榜单前 5 名必得
    试用份额：
    5份

    试用倒计时：
    xx天 xx时 xx分 xx秒后结束
    免费试用 在线咨询
    试用说明：
    1、运费： 包邮 ； 部分偏远地区会产生运费； 2、联系时间： 试用活动结束后的7天内； 3、申请要求： 每人每次限申请一个产品试用； 4、其他说明： 客户经理电话联系领取试用装事宜；
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      • 数量： 现货
      • 英文名： Hieff Clone® Universal Zero TOPO TA/Blunt Cloning Kit
      • CAS号： 点击查看
      • 保质期： 一年
      • 供应商： 翌圣生物科技（上海）股份有限公司
      • 保存条件： -20度
      • 规格： 5T/20T/50T
      • 规格：5T
      • 产品价格：￥175.0
      • 规格：20T
      • 产品价格：￥655.0
      • 规格：50T
      • 产品价格：￥1383.0
      产品简介
       
      Hieff Clone® Universal Zero TOPO TA/Blunt Cloning Kit是利用新一代拓扑异构酶(Topoisomerase)高效快速连接DNA片段的原理进一步研发而成，搭配高效的平末端化因子，兼容平末端产物及粘性末端产物的快速克隆。与传统的连接酶相比，具有以下优势：1) 快速，仅需5分钟即可完成连接反应。2) 高效，无自连现象，阳性克隆率接近100%，无需设置蓝白斑筛选；3) 可连接长达5 kb目的产物。
       
      产品信息
       
      货号10906ES08 / 10906ES20 / 10906ES50
      规格5 T / 20 T / 50 T
       
      组分信息
       
      组分编号组分名称10906ES0810906ES2010906ES50
      10906-A2× Hieff Clone® Universal TOPO Cloning Premix25 μL100 μL250 μL
      10906-B1 kb control insert (40 ng/μL)10 μL10 μL10 μL
      10906-CM13 Forward Primer(10 μM)50 μL200 μL500 μL
      10906-DM13 Reverse Primer(10 μM)50 μL200 μL500 μL
       
      储存条件
       
      -25~-15℃保存，有效期1年。
       
      使用说明
       
      1. 反应体系
      组分用量
      2× Hieff Clone® Universal TOPO Cloning Premix5 μL
      插入片段*0.5-5 μL
      ddH2OTo 10 μL
      *PCR 产物不能磷酸化。如扩增模板为质粒，模板质粒会在后续实验中引起假阳性，因此推荐PCR产物进行胶回收后连接。0.1-1 kb片段投入量推荐20-50 ng，1-2 kb片段投入量推荐50-100 ng，2-4 kb片段投入量推荐100-200 ng，4-5 kb片段投入量推荐200-300 ng。
      1. 反应条件
      混匀上述体系，于室温(20-37℃)反应5 min。连接反应不可于冰上进行。室温(20-37℃)下孵育时，建议孵育时间不超过5 min，如果PCR产物浓度较低或者片段较长，则可以适当延长孵育时间，不宜超过15 min（推荐使用25℃，PCR仪控温）。
      1. 转化
      1）在冰上解冻克隆感受态细胞（如：DH5α Chemically Competent Cell，Cat#11802ES）。
      2）取10 μL冷却重组产物，加入到100 μL感受态细胞中，轻弹管壁数下混匀，在冰上放置25 min。
      3）42℃热激60 sec，冰上孵育2 min。
      4）加入500 μL SOC或LB培养基，37℃，200 rpm，摇菌60 min。
      5）5000 rpm离心4 min，弃上清至100 μL，用剩余培养基重悬菌体。用无菌涂布棒将菌液均匀涂抹在含有正确抗性的平板上。待菌液被培养基吸收后，倒置平板，于37℃过夜培养。
      1. 克隆鉴定
      可选择测序法或酶切法进行鉴定。用无菌的枪头或牙签将单个菌落挑至菌落PCR Mix中混匀（如：2×Hieff® Ultra-Rapid HotStart PCR Master Mix (with Dye)，Cat#10157ES），加入引物直接进行PCR反应。测序引物：
      M13F ：GTAAAACGACGGCCAGT
      M13R ：CAGGAAACAGCTATGAC
       
      载体信息
       

       
      注意事项
       
      1. 需自备的材料：
      ​​​​​​​1）自备试剂（仅罗列部分）：
      1. 超级感受态：转化效率＞108 cfu/μg，如翌圣DH5α超级感受态细胞（Cat#11802ES）。
      2. 高保真酶：2× Hieff Canace® Plus PCR Master Mix (With Dye)（Cat#10154ES）或其他等效产品。
      3. 菌落PCR mix：2× Hieff® Ultra-Rapid HotStart PCR Master Mix (with Dye)（Cat#10157ES）或其他等效产品。
      4. 核酸染料：YeaRed Nucleic Acid Gel Stain (10,000× in Water)（Cat#10202ES）或其他等效产品。
      ​​​​​​​​​​​​​​2）自备仪器耗材（仅罗列部分）：PCR仪，水平电泳槽，切胶仪，EP管等。
      1. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
      2. 本产品仅作科研用途！
      温馨提示：不可用于临床治疗。

      风险提示：丁香通仅作为第三方平台，为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全，合理判断，谨慎选购商品，商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品，请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。

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    16 年 钻石会员
    翌圣生物科技（上海）股份有限公司
    • 联系人：

      翌圣生物

    • 所在地区：

      上海市浦东新区国际医学园区天雄路166弄1号楼3层南单元

    • 业务范围：

      体外诊断,耗材,技术服务,抗体,ELISA 试剂盒,细胞库 / 细胞培养,试剂

    • 经营模式：

      生产厂商

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