天狼猩红染色

一、技术简介
天狼猩红染色可用于区分Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ型胶原，由于胶原呈碱性，与酸性染料起强烈反应，天狼星红就是一种很强的酸性染料，胶原的双折光现象将会强烈地显现。而且可以在同一张切片上同时显示它们相互之间的关系，直接观察分析纤维化程度，主要应用于各种组织病变时对胶原纤维异常或纤维增生的研究中。
天狼星红是一种强酸性阴离子染料，每个分子含有6 个磺酸基，易与胶原蛋白的碱性氨基酸集团紧密结合，染色后不褪色且具特异，染料分子长形展开，在胶原长轴方向以平行排列的方式附着胶原分子。当有偏振光照射时，天狼星红可以和胶原纤维反应使胶原纤维产生明显的双折光现象。不同的胶原纤维具有不同的旋光性，在偏振光显微镜下呈现相异的颜色，借以区分Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ型胶原，Ⅰ型纤维：紧密排列， 显示很强的双折光性，呈黄色或红色的纤维；Ⅱ型纤维：显示弱的双折光，呈多种色彩的疏松网状分布；Ⅲ型纤维：显示弱的双折光，呈绿色的细纤维；Ⅳ型纤维：显示弱的双折光的基膜，呈淡黄色。
二、实验流程
1. 组织固定于4%多聚甲醛液，制备石蜡切片。
2. 切片脱蜡至水化后，天狼星红染色液滴染1 h。
3. 自来水稍洗，洗去多余染料。
4. 苏木精染胞核8-10 min，流水中冲洗10 min。
5. 无水乙醇I中脱水30 s，无水乙醇II中脱水3-5 min。
6. 二甲苯透明、中性树胶封片。
7. 偏振光显微镜下观察染色结果。
三、服务说明及结果
1. 客户提供：待检测组织或切片。
2. 公司提供：基本实验步骤，图片，数据分析结果。
3. 实验周期：5-10个工作日。



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