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- 2026年01月09日
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文献和实验天狼猩红染色原理：
胶原纤维(Collagen Fiber)是结缔组织中分布含量最多的一种纤维，广泛分布于各种脏器，其中Ⅰ型胶原纤维主要是骨、皮肤、肌腱；Ⅱ型胶原纤维主要是软骨胶原；Ⅲ型胶原纤维主要在胚胎组织、成人血管、胃肠道；Ⅳ型胶原纤维主要在基膜中。 天狼星红与其衬染液都是强酸性染料，易与胶原分子中的碱性基团结合，吸附牢固。偏振光镜检查，胶原纤维有正的单轴双折射光的属性，与天狼星红复合染色液结合后，可增强双折射，提高分辨率，从而区分两型胶原纤维。
天狼猩红染色染色步骤：
（1）脱蜡至水：二甲苯Ⅰ5分钟，二甲苯Ⅱ5分钟，二甲苯Ⅲ5分钟，无水乙醇1分钟，95%乙醇1分钟，75%乙醇1分钟，蒸馏水洗5分钟。
（2）滴加铁苏木素染se液5-10分钟，蒸馏水洗10-20秒洗去多余染色液。
（3）自来水洗5分钟。
（4）天狼星红染色液滴染15-30分钟。
（5）流水冲洗，去除切片表面染液。
（6）脱水透明：75%乙醇1分钟，95%乙醇1分钟，无水乙醇1分钟，二甲苯3次，每次1-2分钟，中性树胶封固。
HE&尼式染色.pdf
组织形态染色 苏丹黑B染色 染色含切片 4%多聚甲醛固定，冰冻切片。对组织内脂质（如脂滴）染色 Masson染色 染色 观察组织纤维化和肌纤维的鉴别及组织纤维化程度 天狼猩红染色 染色 观察组织纤维化程度，及偏振光进行胶原亚型的分区 PAS糖原染色 染色 观察肝脏、肌肉等组织内糖原的变化； 肠胃肺支气管等杯状细胞酸性粘液物质变化 阿利新蓝染色 染色
一、样本准备 详见流式细胞术样本制备技术、流式实验样本制备方法及注意事项 收集细胞，200 目筛网过滤，收集滤液，300 g 离心 5 min，弃上清 向细胞中加入适量细胞染色 buffer（或含 1%BSA 的 PBS），用移液枪轻轻吹打细胞重悬 二、细胞计数 用血球计数板或其他仪器对悬液进行计数后，调整细胞浓度约为 1 × 107/mL 三、设置实验分组 四、封闭 Fc 受体 封闭 Fc 受体能减少染色过程中的非特异性染色。 小鼠中，纯化的 CD16/CD32 单抗能和 Fc
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