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天狼猩红染色:偏振光镜检查,胶原纤维有正的单轴双折射光的属性,与天狼星红复合染色液结合后,可增强双折射,提高分辨率,从而区分两型胶原纤维。
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天狼猩红染色原理:
胶原纤维(Collagen Fiber)是结缔组织中分布含量最多的一种纤维,广泛分布于各种脏器,其中Ⅰ型胶原纤维主要是骨、皮肤、肌腱;Ⅱ型胶原纤维主要是软骨胶原;Ⅲ型胶原纤维主要在胚胎组织、成人血管、胃肠道;Ⅳ型胶原纤维主要在基膜中。 天狼星红与其衬染液都是强酸性染料,易与胶原分子中的碱性基团结合,吸附牢固。偏振光镜检查,胶原纤维有正的单轴双折射光的属性,与天狼星红复合染色液结合后,可增强双折射,提高分辨率,从而区分两型胶原纤维。
天狼猩红染色染色步骤:
(1)脱蜡至水:二甲苯Ⅰ5分钟,二甲苯Ⅱ5分钟,二甲苯Ⅲ5分钟,无水乙醇1分钟,95%乙醇1分钟,75%乙醇1分钟,蒸馏水洗5分钟。
(2)滴加铁苏木素染se液5-10分钟,蒸馏水洗10-20秒洗去多余染色液。
(3)自来水洗5分钟。
(4)天狼星红染色液滴染15-30分钟。
(5)流水冲洗,去除切片表面染液。
(6)脱水透明:75%乙醇1分钟,95%乙醇1分钟,无水乙醇1分钟,二甲苯3次,每次1-2分钟,中性树胶封固。
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