天狼猩红染色（实验代测）

天狼猩红和KWS都是强酸性染料，易与胶原分子中的碱性基团结合，吸附牢固。偏振光镜检查，胶原纤维有正的单轴双折射光的属性，与天狼猩红结合，可增强双折射，提高分辨率，从而区分两型胶原纤维。

天狼星红染色的操作步骤

1、脱蜡至水：将切片依次放入二甲苯Ⅰ中脱蜡5分钟，然后放入二甲苯Ⅱ中脱蜡5分钟，接着放入二甲苯Ⅲ中脱蜡5分钟，再放入无水乙醇中脱蜡1分钟，接着放入95%乙醇中脱蜡1分钟，然后放入75%乙醇中脱蜡1分钟，最后用蒸馏水洗净5分钟。

2、铁苏木素染色：滴加铁苏木素染色液在切片上染色5-10分钟，然后用蒸馏水洗净10-20秒，去除多余的染色液。

3、自来水洗：用自来水洗净切片，持续洗5分钟。

4、天狼星红染色：滴加天狼星红染色液在切片上染色15-30分钟。

5、冲洗：轻轻流水冲洗切片表面，去除多余的染液。

6、脱水透明：将切片依次放入75%乙醇中脱水1分钟，然后放入95%乙醇中脱水1分钟，接着放入无水乙醇中脱水1分钟，然后放入二甲苯中脱水3次，每次1-2分钟，最后使用中性树胶封固。

实验流程：

　　脱蜡至水-天狼猩红染色-酒精脱水-封片。

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　　结果判读：

　　在普通光学显微镜下胶原纤维呈红色，其他组织成分被染成黄色。

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　　送样运输要求：

　　1.样本放置于20倍样本体积的固定液中固定24h以上，常温运输送样。

　　切勿固定时间过长，切勿冷冻结冰。

　　2.石蜡切片常温运输，冰冻切片-20℃运输。