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- 外泌体浓度粒径检测
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- 2026年01月07日
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- 提供商：
研载生物
- 服务名称：
外泌体浓度粒径检测
- 规格：
样
一、技术简介
外泌体(Exosome)是由细胞分泌而来的微小囊泡，直径约为30-200 nm，密度在1.13-1.21g/ml，具有杯状形态、双层膜结构，天然存在于血液、尿液、唾液、母乳和细胞培养基等生物体液中。包括肿瘤细胞在内几乎所有类型的细胞（免疫细胞、神经细胞、干细胞)，都可以产生并释放exosome。目前外泌提取主要有超速离心、过滤离心、试剂盒提取等方法。
公司拥有Nanosight NS300和zetaview，均能对外泌体进行粒径分析。
外泌体粒径分析方法为纳米颗村跟踪分析(Nanoparticle tracing Analysis,NTA)，其原理是对每个颗粒的布朗运动进行追踪和分析，结合 Stockes-Einstein 方程式计算纳米颗粒的流体力学直径和浓度。NTA技术已被外泌体研究领域认可为外泌体表征手段之一。相较于其他表征方式，NTA技术的样本处理更简单、更能保证外泌体原始状态、检测速度更快。
二、实验流程
1. 外泌体粒径检测。
2. 提供实验报告。
三、服务说明及结果
1. 客户提供：外泌体（30-50 μl）或由我司分离得到外泌体。送样要求：送样时，样品须一直处于低温环境中。生物样本应避免反复冻融，新鲜外泌体样本当天或次日可到可用冰袋。冻存过的外泌体或运输时间较长，使用干冰运输。
2. 公司提供：基本实验步骤、图片、数据分析结果。
3. 实验周期：7个工作日。
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文献和实验： 准备外泌体样本，并将外泌体样本置于仪器中检测。检测结果如下： 图二 NTA 鉴定脑组织外泌体大小 从 NTA 结果中可以看出，检测到的外泌体颗粒大小在 30-150nm 范围，符合外泌体的大小，且颗粒浓度在 2*10 的 11 次方以上（由图中 particles 数乘以稀释倍数）。 四、WB 鉴定外泌体的蛋白 marker： 按照实验室常规操作进行外泌体样本的 WB 实验。本次测试选择了三个蛋白指标进行外泌体蛋白鉴定，分别为二阳一阴，即 CD9、TSG
、NTA 鉴定外泌体的大小和颗粒浓度： 准备外泌体样本，并将外泌体样本置于仪器中检测。检测结果如下： 图二 NTA 鉴定肿瘤组织外泌体大小 从 NTA 结果中可以看出，检测到的外泌体颗粒大小在 30-150 nm范围，符合外泌体的大小，且颗粒浓度在 3*10 的 10 次方以上（由图中 particles 数乘以稀释倍数）。 四、WB 鉴定外泌体的蛋白 marker： 按照实验室常规操作进行外泌体样本的 WB 实验。本次测试选择了两个蛋白指标进行外泌体
虽然NTA取得了比DLS 更高的性，但是随着外泌体研究的深入，其局限性也十分明显。先NTA仅能够测量溶液中颗粒的平均粒径尺寸，但是NTA无法分辨其中的外泌体、囊泡、脂蛋白，也不能区别不同源性的外泌体。这直接限制了外泌体粒径表征的意义，使得研究者很难探究外泌体尺寸与外泌体来源之间的关系。另外NTA本身对于测试时的温度、浓度和校准都有着较高要求，因此使得NTA在测试较小的粒子时其精度仍不能达到令人满意的效果，其测试结果却仍与电镜、AFM等成像技术所观测到的粒径存在着明显差异。 外泌体在TEM
