
外泌体大分子载药
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外泌体大分子(如壳寡糖)载药
一、实验流程
1. 将EVs与COS等体积混合,并在37℃下振荡孵育混合物1hr,然后120000×g离心60min后。
2.外泌体鉴定
(1)粒径和电位检测:粒径检测外泌体的大小和电位。
(2)电镜检测:透射电镜检测外泌体的形态。
(3)WB检测:检测外泌体指标CD9/CD81/CD63/TSG101/HSP70等表达情况。
二、示例图:

图一:外泌体载药前后鉴定结果 透射电镜结果;粒径结果;western blot结果

图二:外泌体示踪结果
三、参考文献:
[1] Li S, Liu J, Liu S, Jiao W, Wang X. Chitosan oligosaccharides packaged into rat adipose mesenchymal stem cells-derived extracellular vesicles facilitating cartilage injury repair and alleviating osteoarthritis. J Nanobiotechnology. 2021 Oct 26;19(1):343. doi: 10.1186/s12951-021-01086-x. PMID: 34702302; PMCID: PMC8549296.
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文献和实验[1] Li S, Liu J, Liu S, Jiao W, Wang X. Chitosan oligosaccharides packaged into rat adipose mesenchymal stem cells-derived extracellular vesicles facilitating cartilage injury repair and alleviating osteoarthritis. J Nanobiotechnology. 2021 Oct 26;19(1):343. doi: 10.1186/s12951-021-01086-x. PMID: 34702302; PMCID: PMC8549296.
病毒载体相比,外泌体作为基因载体其优势包括以下几点: 1.安全:从患者体内获取的外泌体,经载入基因后,再注入患者体内几乎不会引起免疫反应,更加安全; 2.保护性强:外泌体粒径较小,可以逃过网状内皮系统的捕捉,有效保护承载的基因; 3.运载效率高:外泌体可以通过与受体细胞膜融合的方式,将基因类药物释放到细胞质中。 近期,和元生物研发团队展示了他们在外泌体载药上的研发进展,分别用电转法和共孵育法做了 miRNA 和 siRNA 两部分装载的探索。根据数据结果显示,相比共孵育法,电转法能更有效地将 miRNA
1)。当外泌体被用作药物递送系统时,疏水性药物可分散在其脂质双分子层内,而亲水性药物则扩散到外泌体的腔内。从载药机制的角度来看,由于外泌体药物递送系统的结构与脂质体相似,因此可将其视为与脂质体性质相当的药物载体。同时,基于其穿透能力强、血液循环时间长、生物相容性好、生物分布广等独特优点,外泌体有望成为一种比脂质体更具优势的天然药物载体。2 外泌体作为药物载体的研究现状外泌体作为天然的药物递送载体,可通过基因工程和化学修饰来提高药物靶向细胞或器官的能力,从而限制药物对正常组织和细胞的伤害,减轻药物
物标志物: 外泌体携带的内容物能够反映亲本细胞的生理病理特征,因此具有作为癌症早期诊断标志物的潜力。 3)免疫调节: 外泌体在自身免疫性疾病中的应用:间充质干细胞外泌体(MSC-Exos)显示出强大的免疫调节和抗炎作用。 4)组织修复与再生: 外泌体在组织修复中的作用:外泌体通过传递生长因子、细胞因子等活性物质,促进细胞增殖、分化和血管生成,从而在组织修复和再生中发挥重要作用。 5)工程化外泌体: 为了提高外泌体的精准靶向递送和载药物能力,科学家们正在开发工程化外泌体。这些工程化外泌体通过基因编辑、表面
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