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- 详细信息
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- 提供商:
孚博生物
- 服务名称:
外泌体浓度粒径(NTA)检测服务
- 规格:
每样本
NTA服务简介
实验室采用Zetaview(品牌:Particle Metrix)进行外泌体浓度粒径测试服务。其方法是纳米颗粒跟踪分析(Nanoparticle Tracking Analysis,NTA);原理是对每个颗粒的布朗运动进行追踪和分析,结合Stockes-Einstein方程式计算出纳米颗粒的流体力学直径和浓度。NTA技术已被外泌体研究领域认可为外泌体表征手段之一;相较于其他表征方式,NTA技术的样本处理更简单、更能保证外泌体原始状态、检测速度更快。Zetaview包含的微电泳技术,也可进行zeta电位的检测。
目前配备为488nm波长的激光器,且搭配对应的滤光片,可以测量荧光抗体标记的外泌体。
仪器信息:
ZetaVIEW S/N 252 (Particle Metrix)
Software: ZetaView 8.04.02 SP2


样本送样要求:生物样本应避免反复冻融,尽量用干冰发样本,可混冰袋发货。如果收集样本需要一段时间,建议-80°保存样本,干冰发货.
外泌体服务项目:NTA检测、电镜检测、WB检测、BCA检测、纳米流式检测、外泌体提取纯化等。
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文献和实验从脑组织中分离外泌体的方法。本文主要和大家分享我们从小鼠脑组织中分离外泌体的效果,供大家参考: 一、采用消化+超离法从脑组织中分离外泌体: 将脑组织剪成薄片,放入离心管中加上消化液进行消化,经水浴、反复轻轻上下颠倒,再用移液枪间断缓慢吹吸至消化结束。随后加入培养基于消化液中,混匀,置于冰上。再进行一系列的差速超速离心过程,包括除杂、滤膜过滤、超离等。最后用 PBS 重悬外泌体,用重悬后的外泌体进行下面的透射电镜(TEM)、纳米粒径跟踪分子(NTA)和 marker WB
、NTA 鉴定外泌体的大小和颗粒浓度: 准备外泌体样本,并将外泌体样本置于仪器中检测。检测结果如下: 图二 NTA 鉴定肿瘤组织外泌体大小 从 NTA 结果中可以看出,检测到的外泌体颗粒大小在 30-150 nm范围,符合外泌体的大小,且颗粒浓度在 3*10 的 10 次方以上(由图中 particles 数乘以稀释倍数)。 四、WB 鉴定外泌体的蛋白 marker: 按照实验室常规操作进行外泌体样本的 WB 实验。本次测试选择了两个蛋白指标进行外泌体
虽然NTA取得了比DLS 更高的性,但是随着外泌体研究的深入,其局限性也十分明显。先NTA仅能够测量溶液中颗粒的平均粒径尺寸,但是NTA无法分辨其中的外泌体、囊泡、脂蛋白,也不能区别不同源性的外泌体。这直接限制了外泌体粒径表征的意义,使得研究者很难探究外泌体尺寸与外泌体来源之间的关系。另外NTA本身对于测试时的温度、浓度和校准都有着较高要求,因此使得NTA在测试较小的粒子时其精度仍不能达到令人满意的效果,其测试结果却仍与电镜、AFM等成像技术所观测到的粒径存在着明显差异。 外泌体在TEM










