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外泌体核酸（如siRNA、miRNA、质粒）载药
一、实验流程
1.超声法载药
2.QPCR检测载药效率
3.装载后转染目的细胞，QPCR、WB、流式检测功能。
4.外泌体鉴定
（1）粒径和电位检测：粒径检测外泌体的大小和电位。
（2）电镜检测：透射电镜检测外泌体的形态。
（3）WB检测：检测外泌体指标CD9/CD81/CD63/TSG101/HSP70等表达情况。
二、示例图：
图一：（A）粒径结果；（B）Western blot结果
图二：外泌体核酸负载效率
图三：（A）qPCR检测外泌体的敲低效率（靶细胞内）；（B，C）Western blot检测外泌体的敲低效率（靶细胞内）
图四：（A）流式法验证外泌体装载效率（靶细胞内）
三、参考文献：
[1] Lamichhane TN, Jeyaram A, Patel DB, Parajuli B, Livingston NK, Arumugasaamy N, Schardt JS, Jay SM. Oncogene Knockdown via Active Loading of Small RNAs into Extracellular Vesicles by Sonication. Cell Mol Bioeng. 2016 Sep;9(3):315-324. doi: 10.1007/s12195-016-0457-4. Epub 2016 Jul 7. PMID: 27800035; PMCID: PMC5084850.
[2] Geng Y, Long X, Zhang Y, Wang Y, You G, Guo W, Zhuang G, Zhang Y, Cheng X, Yuan Z, Zan J. FTO-targeted siRNA delivery by MSC-derived exosomes synergistically alleviates dopaminergic neuronal death in Parkinson's disease via m6A-dependent regulation of ATM mRNA. J Transl Med. 2023 Sep 22;21(1):652. doi: 10.1186/s12967-023-04461-4. PMID: 37737187; PMCID: PMC10515429.
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文献和实验外泌体（Exosomes）是细胞分泌到胞外的一种囊泡，大小为 30-150 nm，携带了各种核酸、蛋白质和脂类等物质，可以在不同细胞间进行传递和交流，从而影响受体细胞的生物学功能。 外泌体在大小和功能上与合成的纳米颗粒类似，但作为天然内源性载体，具有免疫原性低、毒性低、稳定性高、渗透性好等优势，故可能成为更有应用前景的药物递送载体。目前，外泌体已经成功运载基因类药物、抗癌药物和抗炎症药物等其他类型药物。 近年来，外泌体作为基因载体引起了基因治疗研究者的广泛关注。与传统的病毒或非
载体时，首要考虑的是高效装载药物的策略。脂质双分子层的膜结构作为外泌体的天然屏障，能够防止装载物的变质。然而，这种膜的存在使外泌体难以高效装载药物等外源性成分。通过物理或化学手段、生物工程技术的改造，可以提高天然外泌体对药物的装载效率。此外，针对外泌体外膜的工程化修饰，可以改善外泌体在体内的生物分布，提高其靶向性与治疗效果。以下总结了外泌体装载药物的策略，并针对蛋白质/ 多肽类药物和小核酸类药物的外泌体装载方式进行了讨论。4.2.1 载药策略外泌体装载药物的策略可分为两种。一种为外源性载药途径，即先
of Polymeric Nanoparticles for Drug Delivery[J]. Pharmaceutical Research, 2013,30(10):2512-2522. 天津外泌体 天津外泌体科技有限公司是以外泌体药物装载及靶向输送为主的生物医药高科技企业。公司战略布局外泌体载药及靶向输送平台建设、外泌体原料开发、医疗器械创新研发三大业务板块,着力构建以高效稳定的药物偶联专利技术为核心的EXC载药平台、以外泌体自组装靶向引导技术为核心的TAD载药平台,建立外泌体
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