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- 英文名：
Phosbind Biotin BTL-104
- 库存：
5mg
- 供应商：
上海研卉生物科技有限公司
- 规格：
5mg
Phosbind Biotin BTL-104
Phosbind是一种新型的磷酸盐结合标签和功能分子，在中性pH（生理pH）条件下可以特异性结合磷酸离子。Phosbind是一种双环金属络合物（1,3-bis[bis(pyridin-2-ylmethyl) amino]propan-2-olato dizinc(II) complex），是一种选择性的磷酸结合标签，在中性pH的水溶液中，其对苯基磷酸酯二价阴离子（PH-OPO32-）的Kd值为25 nM* (*：在Zn2+的情况下)。因此，用Phosbind衍生物进行磷酸化蛋白质组研究的各种方法被开发出来。这里，我们引入了Phosbind的一种新应用，即用生物素化Phosbind锌(II) 复合物对电印迹PVDF膜上的全部磷酸化蛋白进行化学发光检测。
Phosbind Biotin提供了一种检测PVDF膜上磷酸化蛋白的敏感方法，该方法需要链霉素偶联辣根过氧化物酶（HRP）和化学发光检测试剂。
- 1. Haijing Guo, Jen-Hsuan Wei, et al. "TPX2 activation by GM130 controls astral microtubule formation and spindle orientation." Immunity. 2020;52(1):109–122.e6. bioRxiv. March 17, 2020.
1. 高敏感性检测磷酸化蛋白磷酸化蛋白的高灵敏度检测。
2. Phosbind Biotin的特异性结合与氨基酸种类、序列无关。
3. 可适用于抗体再杂交和质谱分析等后续工作。
4. 实验流程与使用HRP标记抗体相类似。
1. M. Ihara, N. Yamasaki, A. Hagiwara, A. Tanigaki, A. Kitano, R. Hikawa, H. Tomimoto, M. Noda, M. Takanashi, H. Mori, N. Hattori, T. Miyakawa, and M. Kinoshita. Sept. 4, a Component of Presynaptic Scaffol and Lewy Bodies, Is Required for the Suppression of α-Synuclein Neurotoxicity, Neuron, 53, 519-533 (2007).
2. M. Kubo-Murai, K. Hazeki, N. Sukenobu, K. Yoshikawa, K. Nigorikawa, K. Inoue, T. Yamamoto, M. Matsumoto, T. Seya, N. Inoue, O. Hazeki. Protein kinase Cδ binds TIRAP/Mal to participate in TLR signaling, Mol. Immunol., 44, 2257-2264 (2007).
3. S. Shigaki, T. Yamaji, X. Han, G. Yamanouchi, T. Sonoda, O. Okitsu, T. Mori, T. Niidome, and Y. Katayama. A Peptide Microarray for the Detection of Protein Kinase Activity in Cell Lysate, Anal. Sci ., 23, 271-275 (2007).
4. T. Mori, K. Inamori, Y. Inoue, X. Han, G. Yamanouchi, T. Niidome, Y. Katayama. Evaluation of protein kinase activities of cell lysates using peptide microarrays based on surface plasmon resonance imaging, Anal. Biochem, 375, 223-231 (2008).
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| Storage | 2-10℃ |
| M.Wt | 766.95 |
| Formula | C40H50N10O4S |
| Solubility | insoluble in H2O; insoluble in EtOH; ≥32.3 mg/mL in DMSO |
| 运输条件 | 蓝冰运输或根据您的需求运输。 |
| 一般建议 | 为了使其更好的溶解，请用37℃加热试管并在超声波水浴中震动片刻。不同厂家不同批次产品溶解度各有差异，仅做参考。若实验所需浓度过大至产品溶解极限，请添加助溶剂助溶或自行调整浓度。 |
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文献和实验运用Cell Based Elisa检测信号通路蛋白和磷酸化蛋白
研究信号通路时，特别是对于高通量样本检测，通过传统的WB方法来检测蛋白是一项非常费时费力的工作。为了解决这个问题，科学家开始尝试一种新的方法，希望更加高效，简单，没有任何辐射的来检测这些蛋白，尤其是信号传导研究中的磷酸化蛋白。Cell Based Elisa 提供了这样一种理想的，高效的，直接的检测大量样本的细胞信号通路蛋白的方法。我们通过了解Cell Based Elisa 的实验步骤来解析怎样检测高通量的样本中的蛋白，尤其是信号通路相关的蛋白。原理图1.在Cell Based Elisa中
，例如 SPR 分析。以往为了增进目标蛋白的纯度，或进行下游分析，常常研究一个蛋白需要使用好几个不同的标签。现在有了 Strep-tag® 这个多功能的亲和标签系统，让您的蛋白研究从克隆到分析一次到位。 由于 Strep-tag® 标签蛋白的纯化在温和的条件下进行，这些靶蛋白通常被广泛的使用于： 蛋白质结构与功能研究 结晶学，鉴定蛋白质的 3D 结构 检测蛋白质-蛋白质交互作用 了解配体-受体在生理条件下的相互作用 分离活细胞、外泌体 两种 Strep 标签及配体的亲和力比较 图 3 Strep
后将其移除。 纯化原理 Strep标签纯化蛋白质的技术原理，是利用自然界中最强的非共价作用之一：生物素(biotin)和链霉亲和素(streptavidin)之间的相互作用。将链霉亲和素改进后，就得到了非常稳定的Strep-Tactin®。Strep-Tactin®同样也是一种蛋白质，能高效且可逆的结合短肽标签Strep-tag®，而且它保留了结合生物素的能力。当生物素加入时，会作为特异性的竞争剂，用于洗脱Strep-tag®标签蛋白。 标签-配体 搭配Strep标签进行蛋白纯化的配体有2种
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