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- 技术资料
- 保存条件:
常温
- 保质期:
长期,除蛋白标准品之外
- 英文名:
Bicinchoninic Acid Kit for Protein Determination
- 库存:
10000
- 供应商:
上海炎熙生物科技有限公司
- 规格:
PD-BCA-500/PD-BCA-125
| 规格: | PD-BCA-500 | 产品价格: | ¥798.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | PD-BCA-125 | 产品价格: | ¥348.0 |
BCA蛋白定量试剂盒
货号:PD-BCA-125,成分:125毫升组分A,3毫升组分B,1毫升BSA标准品(5毫克/毫升),可供62个试管或6块96孔板测试用。
货号:PD-BCA-500,成分:500毫升组分A,12毫升组分B,2毫升BSA标准品(5毫克/毫升),可供250个试管或25块96孔板测试用。
室温运输和储存。如因温度低或长时间放置出现沉淀,将其摇匀即可使用。BSA标准品保存在-20度,如出现微生物污染则应丢弃。
一、BCA蛋白定量试剂盒的定义与用途
BCA(Bicinchoninic Acid)蛋白定量试剂盒 是一种基于 铜离子-蛋白质络合反应 的化学分析工具,广泛应用于实验室中测定 溶液中蛋白质总含量。其通过检测蛋白质与铜离子在碱性条件下生成的紫色络合物的吸光度(通常在 562nm 波长),定量分析蛋白质浓度,适用于 细胞培养上清、组织匀浆、血清、尿液 等多种样本。
二、BCA法的核心原理
铜离子的氧化还原反应
在碱性缓冲液(pH 8.5)环境中,铜离子(Cu²⁺)与蛋白质中的肽键和氨基发生反应,生成Cu⁺和NH3。
BCA试剂中的碳酸钠和NaOH提供碱性环境,加速反应。
紫色络合物的形成
BCA试剂中的双辛酰亚胺酸(DCTA)与铜离子结合,形成Cu-DCTA²⁺复合物。
当蛋白质存在时,铜离子被还原为Cu⁺,并与双辛酰亚胺酸和BCA试剂中的其他成分(如硫醇基团)结合,生成紫色络合物(最大吸收峰 562nm)。
定量关系
蛋白质浓度与紫色络合物的吸光度呈线性正相关,可通过标准曲线计算待测样本的蛋白质含量。
三、BCA蛋白定量试剂盒的优势
高灵敏度与准确性
检测范围广(通常 0.1–10mg/mL),最低可检测 10μg/mL 的蛋白质。
重复性好,CV值(批间变异系数)通常低于 5%。
兼容性强
抗干扰能力强:对大多数缓冲液(如PBS、RIPA)中的常见离子(如Na⁺、K⁺)耐受性高。
操作简便快捷:样本与试剂混合后直接测定,无需离心或过滤。
快速显色:反应时间约 30–60分钟,适合高通量分析。
稳定性好:试剂盒可长期保存,开封后短期内使用无显著活性损失。
四、实验注意事项
含强还原剂(如β-巯基乙醇)的样本需先中和。
校准标准曲线:首次使用或跨批次实验时,建议重新校准标准曲线。
五、总结
BCA蛋白定量试剂盒凭借其高灵敏度、操作简便和广泛兼容性,已成为实验室蛋白质定量的重要工具。其基于铜-蛋白质络合反应 的原理,解决了传统方法中试剂不稳定、干扰多等问题,特别适合需要快速、准确分析蛋白质含量的场景。通过合理使用BCA试剂盒,研究人员可高效完成蛋白质定量实验,为后续研究奠定可靠基础。
- 本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品。
- 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验Knockdown of IFNAR2 reduces the inflammatory response in mouse model of type 1 diabetes
法是十分常用的蛋白质比色定量方法,很多试剂供应商都提供基于比色皿和微孔板的BCA蛋白定量试剂盒。BCA蛋白定量法相对于其它比色定量法具有操作简单、稳定、灵敏度高等优点。相对于蛋白质的固有的280nm吸收峰检测,BCA检测法提高了蛋白检测灵敏度和特异性,消除了核酸的干扰,核酸干扰在对细胞裂解物或其他生物样品进行蛋白定量时总是一个难以避免的干扰。在碱性条件下,蛋白将Cu2+ 还原为Cu+ ,Cu+ 与BCA 试剂形成紫色络合物,如图1,其吸光值与蛋白浓度成正比。测定在562nm 处的吸收值,并与标准
蛋白定量是生物学实验不可缺少的一部分。为验证细胞裂解是否成功,或为了将多个样品进行平行实验比较或标准化保存,需对细胞裂解液进行蛋白定量;为了判定蛋白的产量,需对纯化好的蛋白进行定量;为了将纯化好的蛋白用生物素或者报告酶进行标记,同样需首先对蛋白样品进行定量,以保证标记反应在适当的化学浓度下进行。现今有很多商品化的蛋白定量试剂盒,如BCA定量试剂盒等,操作起来,简便快捷。当然也有不少实验室,还是采用传统的方法进行蛋白定量。现将蛋白定量过程中所遇的一些问题小结一下。Q1: 采用考马斯亮蓝G5-20
对象为组织样品,取适量(250~500mg)新鲜组织样品或正确保存的组织样品,加1ml含蛋白酶抑制剂的总蛋白抽提试剂(或核蛋白抽提试剂),匀浆后抽提总蛋白(或核蛋白)。实验对象为细胞样品,每份样品取1×106~1×107细胞,PBS清洗细胞,去PBS加0.1ml~1ml含蛋白酶抑制剂的总蛋白抽提试剂(或核蛋白抽提试剂)抽提总蛋白(或核蛋白)。2. 蛋白质定量:按BCA蛋白质定量试剂盒操作说明操作,测定样品浓度。3. 变性聚丙烯酰胺不连续凝胶电泳(SDS-PAGE):将准备好的样品液和预染









