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Trelief® Prestained Protein La
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- 保存条件:
-25~-15℃条件下储存1年,2~8°C可放置2个月。
- 英文名:
Trelief® Prestained Protein Ladder
- 库存:
充足
- 供应商:
北京擎科生物科技股份有限公司
- 规格:
2x250 μL
Trelief ® Prestained Protein Ladder
彩色预染蛋白Marker
彩色预染蛋白Marker
【产品简介】
该产品彩包含从10 kDa到180 kDa共10种高度纯化并预染的重组蛋白质(10 kDa,17 kDa,25 kDa,33 kDa,43 kDa,55 kDa,70 kDa,95 kDa,130 kDa,180 kDa,均带His标签),其中70 kDa条带为橙色,10 kDa为绿色。表观分子量经过Thermo26610和26614非预染蛋白质分子量标准标定。
蛋白条带经彩色预染,便于实时观察电泳进程。
【产品应用】
作为SDS-PAGE和Western Blot实验中蛋白分子量大小的参照。
【产品组成及标准】
2×250 µL,-25~-15 ℃条件下储存 1 年,2~8℃可放置 2 个月,干冰运输。
【操作流程】
将本产品于室温下彻底解冻后轻轻摇匀,取5 µL(5×1.5 mm胶孔)上样,与样品同时进行PAGE电泳。预染蛋白在不同的缓冲体系下有不同的表观分子量,如果在该缓冲体系中事先用非预染蛋白质标定,可以大致确定蛋白质分子量。如下图,即为两种缓冲体系下的电泳示意图:
【注意事项】
本产品已包含1×SDS-PAGE上样缓冲液,可直接使用,请勿煮沸、稀释或加入还原剂等。
在低浓度凝胶中,多个低分子量蛋白可能同时泳动至凝胶前缘,请根据实际需要选择合适的胶浓度。
初次使用本产品时,建议进行上样量梯度预实验,确定合适的上样量,该操作可节约成本,同时获得更佳的实验结果。
在考染及His标签Western Blot实验中,建议上样量减少至需要量的1/5~1/3。
【问题讨论】
Q1:蛋白电泳时,该选择非预染Marker还是预染Marker?
A1:蛋白Marker是用来标示目标蛋白大小的,蛋白Marker可分为非预染蛋白Marker和预染蛋白Marker两种。
非预染蛋白Marker,没有附带染料分子或标记的蛋白Marker,只能在电泳完成后经过染色才能观察到,用于精确测定目标蛋白分子量。
预染蛋白Marker,与染料共价偶联的蛋白Marker,在电泳过程中就能实时看到Marker的电泳情况。用于监测电泳进行进度和情况、分子量的近似测定、估计蛋白质印迹(Western blot)过程中蛋白质转膜效率。预染Marker又分为单色预染和多彩色预染,Marker条带越多参考价值越大,同时也越难区分,若用不同颜色则容易辨认;单色的Marker通常利用其中某些条带加倍浓度来提示其大小。
˙Q2:使用预染蛋白Marker有哪些注意事项?
A2:
1)预染的蛋白Marker与染料的偶联作用导致在不同缓冲液中Marker迁移率不同,使用前需注意选择适当缓冲体系。若使用说明书中未涉及的电泳缓冲液,建议用非预染蛋白Marker对该预染蛋白Marker先进行分子量标定;2)在低浓度胶中,低分子量蛋白会泳动于染料前缘;
3)大分子量蛋白Western blot时需延长转膜时间或加高转膜电压。
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