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合研生物
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Caco-2细胞渗透性实验
武汉合研生物医药科技有限公司坐落于光谷生物城,是一家专注于提供新药发现阶段的技术服务,以中小微新药研发企业为服务主体的创新型公司。合研生物拥有一支训练有素的药物研发技术团队,提供的服务覆盖虚拟筛选、酶学靶点筛选、抗肿瘤药物活性评价、细胞功能学检测、药理病理学服务等各项技术,同时也代理SignalChem的各种活性酶产品。我们的技术团队在分子生物学、细胞生物学、结构生物学等领域具有丰富的经验,通过酶水平、细胞水平测定等技术平台帮助客户进行化合物筛选及化合物特性、作用机制等研究。合研生物以高效、高性价比的专业服务帮助客户更快地达到目标,帮助客户推进药物发现的进程。
我们的服务
Caco-2 通透性与转运体试验,须注明单向/双向。周期一般4-6周。
Caco-2细胞模型建立大致步骤:
1、细胞的培养及接种铺板
2、检测电阻
Caco-2细胞培养21天,检测电阻。
3、通透性实验
首先弃去Transwell小室内外培养液,用37℃ Hanks液(PH=7.4)轻柔地清洗细胞表面3次以除去表面的杂质,然后加入37℃ Hanks液,置于37℃孵箱中孵育30分钟。吸去缓冲溶液,在AP侧(内孔)加入Xml含有受试药物的Hanks液,作为供给液,在BL侧(外孔)加入Ym1空白的Hanks液作为接收液。此为吸收方向,A-B。
4、外排实验
弃去Transwell小室内外培养液,在BL(外孔)侧加入Yml含有受试药物的Hanks液,作为供给液,在AP侧(内孔)加入Xm1空白的Hanks液作为接收液。此为外排方向,B-A。
5、采样和检测
将载有Transwell小室的24孔板于37℃中温孵,设定不同时间点时间从接受池取出Zul的接受液进行液相检测,然后补加相应体积的空白37℃ Hanks液。
6、双向转运实验
相同药物同时进行通透性实验和外排实验,考察药物的渗透方向率(PDR)。
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率平均为 35%);第三篇,Okuyama 将 3% 脱脂牛奶和 18% 棉子糖的非渗透性组合用作 CPA。冷冻类似于 Yokoyama 的冷冻,将装有样品的试管浸入-80ºC 的酒精浴中,然后再转移到液氮中,获得了较好的结果。脱脂奶粉含有高分子蛋白,主要提高溶液粘度,提高玻璃化转变温度,维持溶液 pH 等作用。但是文章发表后,其他实验室很难重复结果。 1991 年,Takeshima, Nakagata and Ogawa 用 3% 脱脂奶和 18% 棉子糖冷冻保护剂又发表了一篇题为「小鼠









