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- 文献和实验
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684
- 英文名:
N-DsRed plasmid(with CMV promoter)
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销*(代"售"),产品线涵盖N端DsRed标签融合蛋白质粒(红色荧光蛋白)厂商在内的分子生物学试剂产品,还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。
名称:N端DsRed标签融合蛋白质粒(红色荧光蛋白)厂商
编号:YT475
规格:1μg
英文名:N-DsRed plasmid(with CMV promoter)
品牌:百奥莱博
产地:北京
本质粒是是哺乳动物细胞表达质粒,用于表达N端含DsRed (Discosoma sp. red fluorescent protein,香菇珊瑚红色荧光蛋白)标签的融合蛋白。该质粒含有CMV启动子,可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达。在多克隆位点的前面有一个DsRed的完整编码序列,并且在DsRed前面加入Kozak序列,因此在多克隆位点根据阅读框插入目的基因就可以表达N端含有DsRed标签的融合蛋白。利用DsRed的荧光特性可以比较容易地观察融合蛋白的表达水平和细胞内定位,也可以利用DsRed抗体来检测或免疫沉淀融合蛋白。DsRed与GFP没有序列同源性,不能使用GFP抗体检测DsRed。该质粒为卡那霉素抗性。转染细胞后,可使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。
本质粒质粒的主要信息如下:
| Feature Nucleotide | Position |
| CMV promoter | 1-602 |
| T3 promoter and T3 primer binding site | 620-639 |
| Kozak sepuence | 656-662 |
| DsRed | 663-1337 |
| Multiple cloning site | 1338-1403 |
| T7 promoter and T7 primer binding site | 1446-1468 |
| SV40 polyA signal | 1481-1863 |
| f1 origin of ss-DNA replication | 2001-2307 |
| bla promoter | 2332-2451 |
| SV40 promoter | 2476-2814 |
| Neomycin/kanamycin resistance ORF | 2849-3641 |
| HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal | 3642-4099 |
| pUC origin | 4226-4892 |
本质粒(4947bp)的图谱如下:
使用说明:
1. 首次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定,或通过测序进行鉴定。
2. 本质粒在其多克隆位点适当酶切后可以插入待表达的目的基因,构建的质粒可以用常规方法转染细胞。
储存条件:-20℃。
N端DsRed标签融合蛋白质粒(红色荧光蛋白)厂商极具性价比,此外,我公司正火爆促销以下产品:
·AMCA标记山羊抗兔IgG(H+L)
编号:YT855
英文名称:AMCA-labeled Goat Anti-Rabbit IgG (H+L)
规格:0.2ml
本AMCA标记山羊抗兔IgG用于免疫荧光染色。
AMCA(7-Amino-4-methylcoumarin-3-acetic acid-NHS ester)是一种常用的非常明亮的蓝色荧光探针。AMCA的荧光光谱与DAPI和Hoechst比较接近。AMCA的吸收(激发)和发射峰如下。
Absorption Peak:350nm
Emission Peak:450nm
本抗体为用纯化的兔IgG免疫山羊,然后用亲和纯化柱对获得的抗血清进行纯化,并经过人IgG、小鼠IgG和大鼠IgG吸附纯化的优质二抗。对人IgG、小鼠IgG和大鼠IgG几乎没有结合能力。特别适合于对于二抗种属特异性要求比较高的荧光染色实验。
本AMCA标记山羊抗兔IgG(H+L)用于免疫荧光染色时的推荐稀释比例为1:250。实际实验操作过程中需根据抗原和抗体的具体情况适当调节荧光标记二抗的稀释比例,推荐的调节范围为1:50-500。
本抗体如果用于常规的免疫染色,以每次检测需1毫升1:250稀释的荧光标记二抗计,至少可以检测50次。如果适当重复使用已经使用过的荧光标记二抗,至少可以多检测150-250次。
储存条件:-20℃,有效期一年。
·DNA Ladder(200bp-12kb)(12条带)(DNA分子量标准)
编号:YT425
英文名称:DNA Ladder (0.2-12 kb, 12 bands)
规格:100次
本DNA Ladder是一种即用型DNA分子量标准,包含了12条双链DNA条带,可以满足各种常规DNA电泳分析的分子量参照需要。本DNA Ladder共含12条带,分别为200bp、500bp、800bp、1000bp、1500bp、2000bp、3000bp、4000bp、5000bp、6000bp、8000bp和12000bp 。
本DNA ladder中2000bp条带亮度较高,是其它条带亮度的3倍,使辨别条带更加容易。本DNA ladder中已添加了含有*酚蓝的DNA上样缓冲液,可以直接使用。每孔上样5微升,即可观察到非常清楚的DNA条带。
储存条件:-20℃,有效期1年。
注意事项:
1. 如果使用强致癌的*化乙锭(EB),须注意避免DNA ladder在使用时被*化乙锭污染,操作时一定要采取适当的防护措施。推荐使用本公司无毒的核酸红色染料(YT015)或核酸绿色染料(YT016)。
2. 电泳时请尽量使用未用过的电泳缓冲液和新配制的琼脂糖凝胶,以免影响电泳效果。
N端DsRed标签融合蛋白质粒(红色荧光蛋白)厂商关键词:N-DsRed plasmid(with CMV promoter),N端DsRed标签融合蛋白质粒,红色荧光蛋白,N端DsRed标签融合蛋白质粒(红色荧光蛋白),YT475
·活性氧检测试剂盒(荧光探针法)
编号:YT290
英文名称:Reactive Oxygen Species Assay Kit
规格:>100次
本试剂盒是一种利用荧光探针DCFH-DA进行活性氧检测的试剂盒。DCFH-DA本身没有荧光,可以自由穿过细胞膜,进入细胞内后,可以被细胞内的酯酶水解生成DCFH。而DCFH不能通透细胞膜,从而使探针很容易被装载到细胞内。细胞内的活性氧可以氧化无荧光的DCFH生成有荧光的DCF。检测DCF的荧光就可以知道细胞内活性氧的水平。本试剂盒本底低,灵敏度高,线性范围宽,使用方便。本试剂盒可以测定100-500个样品。
本试剂盒提供了活性氧阳性对照试剂Rosup,以便于活性氧的检测。Rosup是一种混合物(compound mixture),浓度为50mg/ml。
试剂盒组分:
DCFH-DA(10mM)——————————————0.1ml
活性氧阳性对照(Rosup, 50mg/ml) —————1ml
注意事项:
1. 探针装载后,一定要洗净残余的未进入细胞内的探针,否则会导致背景较高。
2. 探针装载完毕并洗净残余探针后,可以进行激发波长的扫描和发射波长的扫描,以确认探针的装载情况是否良好。DCF的激发光谱和发射光谱请参考下页图谱。
3. 尽量缩短探针装载后到测定所用的时间(刺激时间除外),以减少各种可能的误差。
储存条件:-20℃,有效期一年。
·Sirt1/Sir2抗体
编号:YT845
英文名称:anti-Sirt1/Sir2 antibody
规格:>20次
本抗体是以小鼠Sirt1*基端722-737位*基酸残基构成的肽段为抗原免疫rabbit,然后用protein A和抗原亲和柱经过两步纯化得到的高纯度抗体。本抗体如果用于常规的Western检测,至少可以检测20次。
本Sirt1/Sir2抗体可以识别人和小鼠的Sirt1,其他种属未经测试。未发现和其它Sirt家族蛋白有交叉反应。
Sirt1也写作SIRT1,小鼠Sirt1曾被称作Sir2或Sir2α,低等生物中Sirt1的类似物称作Sir2。Sirt1是NAD依赖的去乙酰化酶,可以去乙酰化组蛋白、p53、Foxo3a、PGC1-α等蛋白。提高Sirt1表达量或激活Sirt1可以延长酵母、线虫和果蝇的寿命。在高等生物中Sirt1可以调节糖脂代谢,例如抑制脂肪细胞分化或促进脂肪细胞去分化,改善胰岛素敏感性等;在能量摄入限制(Caloric restriction)导致的长寿过程中Sirt1被上调。白藜芦醇(resveratrol)是Sirt1的一种常用激活剂。
产品组份:
Sirt1/Sir2抗体————20μl
Western一抗稀释液————20ml
抗体参数:
免疫原物种:小鼠
免疫原:小鼠Sirt1*基端722-737位*基酸残基构成的肽段
宿主:兔
用途:WB,IP,IC, IF
可检测样品:人,小鼠
Sirt1/Sir2分子量:110kD
推荐稀释比例:WB(1:1000),IP(1:100),IC(1:200),IF(1:200)
注意事项:
1. 在Western实验后,请注意回收稀释的抗体。回收的抗体在进行Western实验时至少可以重复使用10次。稀释后的抗体,包括已经使用过的稀释抗体,4℃保存。
2. 回收后重复使用的抗体,使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象,可以10000g离心1-3分钟,取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况,则可以考虑废弃该抗体。
3. 对于本抗体,Western检测时一抗要4℃缓慢摇动过夜,如果仅短时间与一抗孵育检测效果较差。
N端DsRed标签融合蛋白质粒(红色荧光蛋白)厂商关键词:N-DsRed plasmid(with CMV promoter),N端DsRed标签融合蛋白质粒,红色荧光蛋白,N端DsRed标签融合蛋白质粒(红色荧光蛋白),YT475
·小鼠抗S-tag抗体
编号:YT759
英文名称:S-tag Mouse Monoclonal Antibody
规格:50μl
本品为来源于小鼠的抗S-tag的单克隆抗体。
宿主:小鼠
克隆性:单克隆抗体
用途:WB,ELISA,IP,ICC, IF
推荐稀释比例:WB(1:1000)
| About this Antibody | |
| Name | S-tag Mouse Monoclonal Antibody |
| Category | Monoclonal antibody(mAb); Primary antibody |
| Isotype | IgG1 |
| Purification | ProG affinity purified |
| About the Immunogen | |
| Immunogen | This antibody is produced by immunizing mice with a synthetic peptide KETAAAKFERQHMDS (KLH-coupled). |
| Category | Related Products |
| Background | S-tag is the name of an oligopeptide derived from pancreatic ribonuclease A. The amino acid sequence of the S-tag is:Lys-Glu-Thr-Ala-Ala-Ala-Lys-Phe-Glu-Arg-Gln-His-Met-Asp-Ser. It is believed that the peptide with its abundance of charged and polar residues could improve solubility of proteins it is attached to. This antibody recognizes the s-tag fused to either the amino- or carboxy-terminus of targeted proteins. |
注意事项:
1. 如果本抗体用于Western blot (WB)、免疫荧光(IF)、免疫细胞化学(ICC)等实验,请注意回收使用过的稀释抗体。回收的抗体通常至少可以重复使用5-10次。稀释后的抗体,包括已经使用过的稀释抗体,请4℃保存。
2. 回收后重复使用的抗体,使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象,可以10,000g离心1-3分钟,取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况,则可以考虑废弃该抗体。
3. 提供的Western一抗稀释液也可以用于免疫荧光(IF)、免疫组化(IHC)、免疫细胞化学(ICC)等适当用途。如果希望获得最佳的检测效果,请考虑使用上述检测专用的一抗稀释液。
储存条件:-20℃,有效期一年。
我公司正在打折促销克隆与表达全系列产品,恭候您的咨询选购N端DsRed标签融合蛋白质粒(红色荧光蛋白)厂商。
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文献和实验前言: NusA融合蛋白表达系统于9年前(1999年)由Davis发明,并在2000年由Novagen首先进行商业化设计和开发,特别推荐用于以NusA作为N端标签时提高在大肠杆菌中难溶的重组表达蛋白的可溶性。NusA融合蛋白表达系统面市至今,已经通过一些高通量表达筛选的评估确认其在可溶性改善方面的有效性。关于NusA融合表达蛋白去除或不去除NusA标签,目的蛋白仍然具有活性的报道也有很多。正是由于NusA标签系统的这种特性,使其成为目前在大肠杆菌表达体系中使用最为广泛的三个融合标签
的温度。在18°C,选择优化的蛋白质表达条件,这可能会增加表达蛋白质的溶解度。故障排除尝试较低的生长温度和较低的诱导剂浓度可以避免包涵体的形成,并有助于一些不正确的二硫键形成和疏水蛋白的情况。为了保护蛋白质,我们可以在培养后向培养基中加入蛋白酶抑制剂,并在冰上破碎细胞以避免降解。在大肠杆菌裂解物中在天然条件下的蛋白质纯化Trx•Tag™是移植到重组蛋白上的肽序列,可以通过肠激酶去除。这种蛋白质标签是一种增稠标签,可以帮助蛋白质正确折叠并防止它们沉淀。由重组pET-32α(+)载体表达的融合蛋白也含有
:分别是增强型绿色荧光蛋白/增强型黄绿色荧光蛋白/增强型黄绿色荧光蛋白/单体红色荧光蛋白,具有不同的激发波长发射波长为,均由野生型荧光蛋白通过氨基酸突变和密码子优化而来。就eGFP而言,相对于GFP,其荧光强度更强、荧光性质更稳定。同时载体中构建的Kozak序列使得含有eGFP的融合蛋白在真核表达系统中表达效率更高。mCherry是从DsRed演化来的性能最好的一个单体红色荧光蛋白,可以和GFP系列荧光蛋白共用,实现多色标记体内、外实验表明,mCherry在N端和C端融合外源蛋白时,荧光蛋白活性和被融合
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