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N端DsRed标签融合蛋白质粒(红色荧光蛋白)

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    • 英文名

      N-DsRed plasmid(with CMV promoter)

    • 保质期

      长期

    • 供应商

      北京百奥莱博科技有限公司

    • 保存条件

      -20℃

    • 规格

      1μg

    特别提示:包括N端DsRed标签融合蛋白质粒(红色荧光蛋白)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!


    产品名称:N端DsRed标签融合蛋白质粒(红色荧光蛋白)
    英文名称:N-DsRed plasmid(with CMV promoter)

    产品货号:N端DsRed标签融合蛋白质粒(红色荧光蛋白)
    产品规格:1μg

    本质粒是是哺乳动物细胞表达质粒,用于表达N端含DsRed (Discosoma sp. red fluorescent protein,香菇珊瑚红色荧光蛋白)标签的融合蛋白。该质粒含有CMV启动子,可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达。在多克隆位点的前面有一个DsRed的完整编码序列,并且在DsRed前面加入Kozak序列,因此在多克隆位点根据阅读框插入目的基因就可以表达N端含有DsRed标签的融合蛋白。利用DsRed的荧光特性可以比较容易地观察融合蛋白的表达水平和细胞内定位,也可以利用DsRed抗体来检测或免疫沉淀融合蛋白。DsRed与GFP没有序列同源性,不能使用GFP抗体检测DsRed。该质粒为卡那霉素抗性。转染细胞后,可使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。

    本质粒质粒的主要信息如下:
    Feature Nucleotide Position
    CMV promoter 1-602
    T3 promoter and T3 primer binding site 620-639
    Kozak sepuence 656-662
    DsRed 663-1337
    Multiple cloning site 1338-1403
    T7 promoter and T7 primer binding site 1446-1468
    SV40 polyA signal 1481-1863
    f1 origin of ss-DNA replication 2001-2307
    bla promoter 2332-2451
    SV40 promoter 2476-2814
    Neomycin/kanamycin resistance ORF 2849-3641
    HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal 3642-4099
    pUC origin 4226-4892


    本质粒(4947bp)的图谱如下:
    产品细节图片1

    使用说明:
    1. 首次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定,或通过测序进行鉴定。
    2. 本质粒在其多克隆位点适当酶切后可以插入待表达的目的基因,构建的质粒可以用常规方法转染细胞。

    储存条件:-20℃。

    除了N端DsRed标签融合蛋白质粒(红色荧光蛋白),,我公司还供应以下相关产品:


    BTN130560 大肠杆菌Rosetta-gami (DE3)pLys化学感受态细胞 0.1mL*10
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    相关实验
    • NusA技术:显著增强大肠杆菌表达可溶、活性蛋白

      前言: NusA融合蛋白表达系统于9年前(1999年)由Davis发明,并在2000年由Novagen首先进行商业化设计和开发,特别推荐用于以NusA作为N端标签时提高在大肠杆菌中难溶的重组表达蛋白的可溶性。NusA融合蛋白表达系统面市至今,已经通过一些高通量表达筛选的评估确认其在可溶性改善方面的有效性。关于NusA融合表达蛋白去除或不去除NusA标签,目的蛋白仍然具有活性的报道也有很多。正是由于NusA标签系统的这种特性,使其成为目前在大肠杆菌表达体系中使用最为广泛的三个融合标签

    • 用于蛋白质表达和纯化的pET-32α(+)载体的构建

      的温度。在18°C,选择优化的蛋白质表达条件,这可能会增加表达蛋白质的溶解度。故障排除尝试较低的生长温度和较低的诱导剂浓度可以避免包涵体的形成,并有助于一些不正确的二硫键形成和疏水蛋白的情况。为了保护蛋白质,我们可以在培养后向培养基中加入蛋白酶抑制剂,并在冰上破碎细胞以避免降解。在大肠杆菌裂解物中在天然条件下的蛋白质纯化Trx•Tag™是移植到重组蛋白上的肽序列,可以通过肠激酶去除。这种蛋白标签是一种增稠标签,可以帮助蛋白质正确折叠并防止它们沉淀。由重组pET-32α(+)载体表达的融合蛋白也含有

    • 【共享】几种常用的蛋白标签的功能和优点

      :分别是增强型绿色荧光蛋白/增强型黄绿色荧光蛋白/增强型黄绿色荧光蛋白/单体红色荧光蛋白,具有不同的激发波长发射波长为,均由野生型荧光蛋白通过氨基酸突变和密码子优化而来。就eGFP而言,相对于GFP,其荧光强度更强、荧光性质更稳定。同时载体中构建的Kozak序列使得含有eGFP的融合蛋白在真核表达系统中表达效率更高。mCherry是从DsRed演化来的性能最好的一个单体红色荧光蛋白,可以和GFP系列荧光蛋白共用,实现多色标记体内、外实验表明,mCherry在N端和C端融合外源蛋白时,荧光蛋白活性和被融合

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