2×Babuddy MasterMix(含染料) 核酸扩增(

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域，致力于为客户提供包括2×Babuddy MasterMix(含染料) 核酸扩增(PCR)在内的一系列分子生物学试剂产品，并提供一系列相关的技术服务。

名称：2×Babuddy MasterMix(含染料) 核酸扩增(PCR)
编号：WE0110
规格：1ml|5ml
英文名：2×Babuddy MasterMix(With Dye)
品牌：百奥莱博
产地：北京
  本品是由Babuddy Super Fidelity DNA Polymerase、PCRBuffer、Mg2+、dNTPs以及PCR稳定剂和增强剂组成的预混体系，浓度为2×。Babuddy Super Fidelity DNA Polymerase是一种快速、高扩增效率的高保真DNA聚合酶，具有5"-3"DNA聚合酶活性和3"-5"外切核酸酶活性。经过改造的聚合酶其活性区域融合有一段聚合增强结构域，独特的结构极大提升了保真性和延伸速度。Babuddy Super Fidelity DNA Polymerase的保真性是普通Taq DNA Polymerase的50倍，是普通Pfu的6倍。其延伸速率为15-30s/kb，成功克服了普通Pfu酶扩增效率低、扩增速度慢的缺陷，大大缩短了反应时间。
  本品特别适合于在基因克隆实验中扩增长片段DNA，尤其在扩增>10 kb的DNA片段时，优势更加明显，所扩增的片段最长可达20 kb。预配好的PCR混合液使操作更加简单快捷，可最大限度地减少人为误差和污染。
  使用本产品扩增得到的PCR产物的3"端不带有“A”碱基，可直接克隆于平末端载体中。如需进行T/A克隆，需在PCR产物末端添加“A”后进行克隆。本产品具有延伸速度快、扩增效率高、保真性强的特点。适用于基因克隆、基因定点突变、SNP等实验。本产品已加入染料(蓝色)，反应结束后可直接进行电泳检测，无需再使用上样缓冲液。

产品特点：
1、高保真性：保真性是普通Taq DNA Polymerase的50倍，普通Pfu的6倍。
2、扩增速度快：其延伸速率为15-30sec/kb，成功克服了普通Pfu酶扩增效率低、扩增速度慢的缺陷。
3、特别适合于扩增长片段：扩增的片段长度可长达20kb。

产品组成：

 

组份	1ml	5ml
2×Babuddy MasterMix(With Dye)	1ml	5×1ml
ddH2O	1ml	5×1ml

注意：2×Babuddy MasterMix含有Babuddy DNA Polymerase,2×PCR Buffer, 3 mM MgCl2和400μM dNTP mix。

使用方法：
以下举例为常规PCR反应体系和反应条件，实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。

1、PCR反应体系

试剂	20μl反应体系	50μl反应体系	终浓度
2×Babuddy MasterMix	10μl	25μl	1×
Forward Primer，10μM	1μl	2.5μl	0.5μM
Reverse Primer，10μM	1μl	2.5μl	0.5μM
Template DNA	适量	适量	<250ng
ddH2O	up to 20μl	up to 50μl

a．模板：在50μl PCR反应体系中，DNA模板的建议用量为低复杂度模板(如质粒DNA，λDNA等)1 pg- 10ng，高复杂模板(如基因组DNA)50-250ng。
b．引物：引物浓度请以终浓度0.2-1.0μM作为设定范围的参考，推荐终浓度为0.5μM。扩增效率不高的情况下，可提高引物的浓度；发生非特异性反应时，可降低引物浓度，由此优化反应体系。

2、PCR反应条件
常规三步法PCR反应：

步骤	温度	时间	循环数
预变性	98℃	30 s-3 min
变性	98℃	5-10 s	25-35 个循环
退火	45-72℃	10-30 s
延伸	72℃	2-4 kb/min
终延伸	72℃	5-10 min

a．变性：简单模板的预变性温度为98℃，预变性时间为30 s。对于比较复杂的模板，预变性时间可延长至3分钟。
b．退火：使用本产品时，退火温度设定的基本原则是，当引物长度小于或等于20 nt时，退火温度为引物最低的Tm；当引物长度大于20 nt时，退火温度应在最低Tm的基础上以Tm+3℃退火10-30 s。当无法得到理想的扩增效率时，应以最低的Tm值逐步提升至模板延伸温度。对于Tm高的引物可以使用两步法PCR。
c．延伸：本产品中所包含的Babuddy DNA Polymerase的扩增效率为2-4 kb/min，复杂性低的模板可用4 kb/min，复杂性高的基因组DNA模板，延伸时间则应为2 kb/min，对于一些cDNA模板，延伸时间可增加到1.5 kb/min。
d．循环次数：可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少，扩增量不足；如果循环次数太多，错配机率会增加，非特异性背景严重。所以，在保证产物得率的前提下，应尽量减少循环次数。

当引物的退火温度较高时，建议使用两步法进行PCR扩增：

步骤	温度	时间	循环数
预变性	98℃	30 s-3 min
变性	98℃	5-10 s	25-35 个循环
延伸	72℃	2-4 kb/min
终延伸	72℃	5-10 min

储存条件：-20℃，避免反复冻融。

欲了解更多2×Babuddy MasterMix(含染料) 核酸扩增(PCR)的品牌、产地、价格及说明书等产品信息，请致电北京百奥莱博科技有限公司，我们将竭诚为您服务，另外，以下产品正在火爆促销:
BTN130430 大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ E.coli DNA Polymerase I
HR0444 活细胞/死细胞双染试剂盒 Living cell/dead cell double staining kit
SV1423 抗 MBP 单克隆抗体，HRP 标记
YT224 HIF-1α凝胶迁移探针(10μM) HIF-1α Probe For EMSA(10μM)
BTN120515 即用型蓝白T载体E型(无RNA启动子，无MCS) Instant Blue-White Vector T，Type E
ALH044 DNA消化试剂盒(DNase I) DNA digestion kit
SV0627 PvuI-HF限制性内切酶 PvuI-HF Restriction Endonuclease
WE0213 DNase I(不含RNase) DNase I(RNase Free)
BTN3660 非冻型组织DNA保存液 DNAhold Tissue RNA non-freezing preservation
SV1084 Lambda 核酸外切酶 Lambda exonuclease
RFT150 彩色预染宽分子量蛋白Marker(10～260kD) Rainbow pre dyeing broad molecular weight protein Marker
KFS158 线粒体红色荧光探针 MitoRed
SY0395 谷胱甘肽琼脂糖树脂(用于GST标签蛋白纯化) Glutathione Agarose Resin
YT526 YTM 总RNA抽提试剂(Trizol法) Total RNA Extraction Reagent(Trizol Method)
BTN100831 5-*-4-*-3-吲哚磷酸(BCIP) 5-Bromo-4-Chloro-3-Indolyl Phosphate
HR0255 叶绿体提取试剂盒 Chloroplast Extraction Kit
2×Babuddy MasterMix(含染料) 核酸扩增(PCR)关键词：WE0110,2×Babuddy MasterMix(With Dye),2×Babuddy MasterMix(含染料)


·FITC标记驴抗大鼠IgG(H+L)
编号：WE0368
英文名称：Donkey Anti-Rat IgG, FITC Conjugated
规格：100μl
本产品为FITC(硫*酸荧光素)标记的经亲和纯化的山羊抗体，特异识别小鼠IgG重链和轻链。本产品检测灵敏度高，本底低，对其他种属IgG无明显交叉反应。荧光素标记抗体广泛应用于免疫学、细胞化学、流式细胞分析等研究，在临床检验上也用于细菌、病毒和寄生虫的检验及自身免疫病的诊断等。

免疫原：大鼠IgG
缓冲液：0.01M PBS，50%甘油，pH7.6
稳定剂：15 mg/ml BSA(不含IgG和蛋白酶)
防腐剂：0.05%叠氮*
荧光团：FITC，Amax=492; Emax=520
应用范围：对于大多数实验(1：50-200)

·多彩预染蛋白Marker
编号：WE0282
英文名称：Multicolor Protein Marker
规格：20次(100μl)|100次(5×100μl)
  本品由10.5-175 kD范围的11条蛋白组成(10.5 kD、14 kD、22 kD、29 kD、42 kD、51 kD、62 kD、70 kD、95 kD、130 kD、175 kD)。由低到高的分子量范围可监测电泳过程中的蛋白分离情况、判断目标蛋白的分子量，并且可以监测Western Blot实验中的转膜效率。10.5 kD、42 kD、95 kD的三条带结合有蓝色染料更便于实时观察电泳进程、判断蛋白分子量。本产品推荐上样量为5μl。

注意事项：
1、本品已包含上样缓冲液，直接使用，不可在100℃加热或煮沸。
2、为避免反复冻融及污染，可将本产品分装后，-20℃保存。

操作步骤：
1、加样前在室温或37-40℃数分钟解冻后轻轻摇匀，以确保溶液混合均匀。
2、根据加样孔的大小，每泳道加5μl进行聚丙*(代"烯")酰胺凝胶电泳。

实验图例

15%的聚丙*(代"烯")酰胺凝胶电泳后结果

储存条件：-20℃保存，避免反复冻融。


2×Babuddy MasterMix(含染料) 核酸扩增(PCR)关键词：WE0110,2×Babuddy MasterMix(With Dye),2×Babuddy MasterMix(含染料)

SV0868 Taq PCR 试剂盒
BTN131225 Carnoy固定液 Carnoy Fixative Solution
KFS055 DyLight405标记抗小鼠免疫荧光染色试剂盒
SY0283 零背景TOPO-Blunt平末端克隆试剂盒 Zero TOPO-Blunt Cloning Kit
RFT177 G418溶液(50mg/ml)
BTN110809 6mL亲和层析柱 Affinity Chromatography Colum(6mL)
HR0047 组织蛋白提取试剂盒 Tissue protein extraction kit
YT631 彩色预染蛋白分子量标准(6.5-270kD) Prestained Color Protein Molecular Weight Marker
YT015 红色核酸染料(DNA染料)(RNA染料) Nucleic Acid Red(2000X)
BTN111107 DNA marker(50-400bp) DNA ladder(50-400bp)
SV1413 几丁质珠
YT219 CREB凝胶迁移探针(10μM) CREB Probe For EMSA(10μM)
KFS301 SB203580(p38 MAPK抑制剂)
SY0541 细胞膜破膜剂 Permeabilization Wash Buffer
SV0610 PspOMI限制性内切酶 PspOMI Restriction Endonuclease
WE0208 磁珠法血液DNA提取试剂盒 MagBeads Blood DNA Extraction Kit
HR0497 XTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒 XTT cell proliferation and cytotoxicity assay kit
SY0179 FOXO-GFP报告基因质粒 FOXO GFP Reporter Plasmid

我公司生产供应销*(代"售")的核酸扩增(PCR)正全品类优惠促销，十分期待您的咨询选购2×Babuddy MasterMix(含染料) 核酸扩增(PCR)。