北京即用型荧光定量PCR试剂盒厂家

北京即用型荧光定量PCR试剂盒厂家

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  • ¥200 - 2300
  • 百奥莱博
  • BTN90408-IUB
  • 北京
  • 2025年07月06日
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      946

    • 英文名

      Instant Fluorescent qPCR Kit

    • 保质期

      6个月

    • 供应商

      北京百奥莱博科技有限公司

    • 保存条件

      2~8℃

    特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

    百奥莱博专业生产销*(代"售")北京即用型荧光定量PCR试剂盒厂家,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。


    名称:北京即用型荧光定量PCR试剂盒厂家
    产地:国产|进口
    规格:1mL
    品牌:百奥莱博
    英文名:Instant Fluorescent qPCR Kit
    本产品是基于荧光染料检测的即用型PCR试剂盒,可以对靶片段进行实时定量PCR分析。产品含有经过优化的缓冲液组分、Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2及新型荧光染料DNAgreen等所有实时定量PCR所需要的成分,用户只需加入模板和引物即可进行实时定量PCR反应和HRM分析,具有广泛的用途。

    产品特点:
    1. 方便,用户只需准备模板和引物既可以进行实时定量PCR实验和HRM(High Resolution DNA Melt Curve Analysis)分析。而基于SYBR Green I和LC Green染料的qPCR mix则不能同时用于上述两种实验。
    2. 使用第三代饱和型荧光染料,信号强,不会抑制PCR反应。
    3.快捷,即用型的预配液使加样操作步骤大大简化,避免了交叉污染,降低实验误差。
    4. 各成分的浓度和比例都经过精心优化,反应的灵敏度高,特异性强。能检测到浓度为50拷贝/mL的靶分子。

    试剂盒组成:

     
    成分 规格
    Taq DNA聚合酶(5U/μL) 100μl
    易错PCR Mix,10× 300μl
    易错PCR专用dNTP,10× 300μl
    MnCl2,5mM 300μl
    说明书 1份


    储存条件:低温运输,-20℃保存,保存期限为6个月。

    使用方法:

    1.以20μl的qPCR反应体系为例:在一干净的PCR管中,加入下列成分:
    反应体系成分 20μl体系 终浓度
    qPCR MagicMix,2× 10μl
    自备引物一 xμl 0.1-0.5μM
    自备引物二 xμl 0.1-0.5μM
    自备模板 xμl  
    自备ROX 2μl (可以不加)
    补超纯水到 20μl  

    放入荧光PCR仪中进行扩增,并在退火或延长步骤中记录荧光信号。
    注意:
    a)通常引物浓度以0.2μm可得到较好结果,可以终浓度0.1-1.0μm作为设定范围的参考;通常DNA模板的量以10-100 ng基因组DNA或1-10 ng cDNA为参照,因不同物种的模板中含有的目的基因拷贝数不同,可对模板进行梯度稀释,以确定最佳的模板使用量。
    b)ROX 校正染料:如果使用ABI公司的7500,7700和7900三种型号的荧光PCR仪器,则需用自备的ROX进行Ct值校正。对ABI 7700和7900,ROX的最佳浓度为1×(即在每20μl反应体系中加2μl 10×ROX)。对ABI 7500,ROX的最佳浓度为0.05-0.1×(每20μl反应体系加0.1-0.2μl 10×ROX;也可将10×ROX稀释到1×,然后每个反应体系加入1-2μl 1×ROX)。ROX会在溶解曲线中产生噪音,因此,如果出现了杂峰,将软件中“Passive Reference Dye”中的“ROX”选项取消打勾,然后重新分析数据。
    对于iCycler IQ,MJ Opticon,MJ Chromo4,MX3000,MX4000,RotorGene3000,RotorGene 6000和LightCycler 480等型号的荧光PCR仪器,ROX不是必须的,但加入的话也不会影响整个PCR分析。

    2. 循环步骤:根据扩增子的性质和仪器性能,从以下三个过程中任选一个进行扩增。
    两步快速循环法:适用于引物Tm值设计为60℃的反应
    循环步骤 温度 时间 循环数
    酶活化 95℃ 10min 1
    变性 95℃ 15s 35-40
    退火&延伸 60℃ 1min

    注意:本产品所采用的热启动酶须在预变性95℃、10 min条件下实现酶的活化。退火温度请以60-64℃作为设定范围的参考,发生非特异性反应时,可提高退火温度。
    三步快速循环法:适用于延伸步骤温度高于退火步骤的PCR(长引物PCR)
    循环步骤 温度 时间 循环数
    酶活化 95℃ 10min 1
    变性 95℃ 10s 35-40
    退火 56-64℃ 30s
    延伸 72℃ 32s

    注意:
    ·退火温度:建议采用两步法PCR,退火温度60℃进行反应。若提高反应特异性,可提高退火温度,以60-64℃作为设定范围的参考。若因使用Tm值较低的引物等原 因,得不到良好的实验结果时,可尝试进行三步法PCR扩增,三步法的退火温度请以56℃-64℃的范围作为设定参考。
    ·延伸温度:延伸温度设为72℃通常可以提高扩增效率。但是,对于AT含量大于70%的扩增子来说,延伸温度设为60℃为宜。
    通用循环法:这种循环方法适用于几乎所有的荧光PCR仪,也适用于用快速循环法不能扩增的模版。
    循环步骤 温度 时间 循环数
    酶活化 96℃ 10min 1
    变性 96℃ 15s 35-40
    退火&延伸 60℃ 1min


    3. 数据采集
    具体操作按所用仪器推荐的流程进行。本产品中所含的荧光染料在没结合DNA时,最大吸收光谱在471nm,结合DNA时的最大吸收光谱在500nm,最大发射光谱在530nm。

    注意事项:
    1. 如果使用iCycler,可以不加入FAM。
    2. 如果使用Roche LightCycler的玻璃毛细管进行PCR,需加入终浓度为0.5mg/mL的自备BSA。

    北京即用型荧光定量PCR试剂盒厂家极具性价比,此外,我公司正火爆促销以下产品:

    ·生物素化蛋白L
    编号:BTN131101
    英文名称:Biotin-Protein L
    规格:0.5mg
    本产品为生物素标记的蛋白L,可以结合含有特别kappa轻链的所有种类的IgG(IgG,IgM,IgA,IgE和IgD),与kappa轻链结合而不干扰抗原的结合。其还可以结合单链抗体可变区基因片段(ScFv)。

    储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。

    ·T4 RNA连接酶2(截短型K227Q)
    编号:BTN130857
    英文名称:T4 RNA Ligase 2(truncated K227Q)
    规格:2000U
    T4 RNA连接酶2(截短型K227Q),又称T4 Rnl2tr K227Q,可特异地将5´末端预腺苷化的DNA或RNA连接到RNA 3´OH末端。该酶连接时不需要ATP,但需要预腺苷化的接头。T4 Rnl2tr K227Q是T4 RNA连接酶2截短型的点突变体,K227的突变减少了酶、赖*酰及腺苷复合物的形成,也降低了非特异性的连接产物(多连体和环状体),后者可能是通过降低该酶从接头向RNA5´磷酸基转运腺苷基团的微量活性而实现的。该酶在连接反应中,无需ATP,利用预腺苷化的接头和降低的酶-赖*酰腺苷化活性能将连接背景降为最低。此酶已被用于microRNA克隆中接头的优化连接。

    产品用途:
    1.将预腺苷化的DNA或RNA序列标签连接到任何RNA 3´末端;
    2.将单链腺苷化引物连接至小RNA上,用于cDNA克隆文库构建;
    3.将单链腺苷化引物连接至RNA上,用于链特异 cDNA文库构建;
    4.无单链和双链DNA核酸外切酶、核酸内切酶、RNase以及磷酸酶的污染。

    储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。


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    ·DAPI干粉
    编号:BTN130862
    英文名称:DAPI,Powder
    规格:10mg
    DAPI是一种常用的用于DNA染色的细胞核染色试剂,它在嵌入双链DNA后释放蓝色荧光。DAPI常用于细胞凋亡检测,染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。DAPI-DNA复合物的激发和发射波长分别为360nm和460nm。本染色液可以直接用于固定细胞或组织的细胞核染色。CAS号:28718-90-3,分子式:C16H17Cl2N5,分子量:350.25。
    DAPI分子结构式

    储存条件:低温运输,-20℃干燥避光保存,有效期一年。

    ·RecJf核酸外切酶
    编号:BTN130629
    英文名称:RecJf Exonulease
    规格:1000U
    RecJf作用于单链DNA,沿5´→3´方向催化去除单磷酸脱氧核苷酸。RecJf与麦芽糖结合蛋白(MBP)融合表达。其催化特性与野生型RecJ相同。与MBP的融合,增强了RecJf的溶解度。当底物为5´端突出了22个核苷酸的DNA时,经RecJf酶切后可得到含有以下三种末端的混合产物:平齐末端、5´突出末端(1-5个核苷酸)和5´凹陷末端(1-8个核苷酸)。RecJf发挥活性时无需5´末端磷酸化。

    产品特点:
    1.特异性5´→3´单链DNA核酸外切酶;
    2.从DNA上切下单磷酸脱氧核苷酸。

    储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期半年。

    活性定义:1单位指在50μl反应体系中,37℃条件下,30分钟内产生0.05nmol可溶于TCA的脱氧核糖核苷酸所需要的酶量。


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    SJ0733 鸡细胞分离液
    SJ0679 Marker Ⅴ
    ARB14070 甘薯羽状斑驳病毒(SPFMV)ELISA检测服务 
    核酸去除液   1ml|5ml
    N-乙酰-L-丙*酸 Trans-Ferulic acid 97-69-8
    羟高铁血红素 Boc-L-glutamine 15489-90-4
    58-96-8 Uridine 尿苷
    PY01-103  麦芽糖  250克  
    ARB13071 小鼠肿瘤坏死因子β(TNF-β)ELISA检测服务 Mouse tumor necrosis factor β,tnf-β ELISA KIT
    KT203 Long Taq PCR MasterMix
    F030236 HRP标记山羊抗猪IgG抗体 HRP*Polyclonal Goat Anti-Pig IgG
    ARB13843 猪干扰素-γ(IFN-γ)定量分析 Porcine interferon γ,ifn-γ ELISA KIT
    SJ0736 大鼠粒细胞分离液
    增强型miRNA cDNA 第一链合成试剂盒 
    SP6 RNA聚合酶 TSS
    25322-68-3 聚乙二醇6000 PEG6000
    F030807 BIOTIN标记山羊抗小鼠IgG2b抗体 Goat Anti-Mouse IgG2b*BIOTIN
    ARB13831 猪C反应蛋白(CRP)ELISA检测服务 Porcine c-reactive protein,crp ELISA KIT
    PY04-053  印度墨汁  50ml/瓶  见使用说明书  炭疽杆菌检测用配套试剂

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