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- 2025年12月08日
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操作步骤
- 取材，未能固定的组织取材，不能太大太厚，厚者冰冻费时，大者难以切完整，最好为24×24×2mm。
- 取出组织支承器，放平摆好组织，周边滴上包埋剂，速放于冷冻台上，冰冻。小组织的应先取一支承器，滴上包埋剂让其冷冻，形成一个小台后，再放上细小组织，滴上包埋剂。
- 将冷冻好的组织块，夹紧于切片机持承器上，启动粗进退键，转动旋钮，将组织修平。
- 调好欲切的厚度，根据不同的组织而定，原则上是细胞密集的薄切，纤维多细胞稀的可稍为厚切，一般在5～10um间。
- 调好防卷板。制作冰冻切片，关键在于防卷板的调节上，这就要求操作者要细心，准确地将其调较好，调校至适当的位置。切片时，切出的切片能在第一时间顺利地通过刀防卷板间的通道，平整地躺在持刀器的铁板上。这时便可掀起防卷板，取一载玻片，将其附贴上即可。
- 应视不同的组织选择不同的冷冻度。冷冻箱中冷冻度的高低，主要根据不同的组织而定，不能一概而论。如：切未经固定的脑组织，肝组织和淋巴结时，冷冻箱中的温度不能调太低，在-10- -15℃左右，切甲状腺、脾、肾、肌肉等组织时，可调在-15～20℃左右，切带脂肪的组织时，应调至-25℃左右，切含大量的脂肪时，应调至-30℃。
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文献和实验正所谓“九层之台,起于垒土”，同样，要想拿到优秀的空间转录组实验结果，样本制备也是至关重要的！目前10x Genomics推出的Visium空间基因表达解决方案，支持新鲜/冷冻切片，优化升级后还可以支持FFPE样本，甚至结合免疫荧光染色。今天小编着重为大家介绍一下Visium 空间基因表达解决方案样本冰冻包埋的那些事儿！ Visium 空间基因表达解决方案支持的样本类型 目前，10x Genomics官网已经测试过的组织类型包括： 人类：心脏，肾脏（正常和肾炎），卵巢，乳腺
上一期，我们为大家介绍了—Visium 空间基因表达解决方案-样本冰冻包埋指南，本期我们将为大家介绍冰冻切片制备指南！满满的干货，记得收藏哦！ 首先，为大家推荐一款用于Visium空间基因表达解决方案的冰冻切片机——Leica CM1950! 其电动切片、步进马达确保冷冻切片的厚度、质量及切片间一致性；精细的定位控制可以满足对细微组织的精密切割；强大的制冷系统为切片温度提供了有力保障！ 在基于配备了CM1950冰冻切片机的条件下，在切片之前，我们需要考虑的主要问题有以下三个： 1，冰冻
程. 冰冻包埋 是作冰冻切片的包埋方法. 新鲜的及以固定的材料均 适合于冰冻包埋. 常用的包埋剂是OCT 塑料包埋 常用的是环氧树脂包埋剂. 优点是同时可以作光镜和 电镜观察 碳腊包埋 较少用.包埋剂为聚乙二醇 4. 切片 因为免疫组化的步骤较多, 要求切片薄而且平整, 否则在染色过程中容易脱片.一般要求片厚在4um以下。贴片前普通的载玻片要作适当的处理。 (1)洗片 酸液浸泡过夜，流水冲洗，蒸馏水洗，95%酒精浸 泡 2h
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