- ￥150 - 420
- Cmbio
- 上海
- CM-6024K
- 2025年08月31日
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- 详细信息
- 技术资料
- 保存条件：
零下80度
- 保质期：
1年
- 英文名：
F-TOP10Chemically Competent Cell
- 库存：
1000只
- 供应商：
上海淳麦
- 规格：
20*100ul
F-TOP10
F-TOP10 快速转化感受态细胞
F-TOP10 快速转化感受态细胞基因型：
F- mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) φ80 lacZΔM15 ΔlacX74 recA1 araΔ139Δ(ara-leu)7697 galU galK rpsL
(Strr)endA1 nupG
F-TOP10 快速转化感受态细胞简要说明：
TOP10 菌株来源于 MC1061，是目前实验室最常用的感受态细胞之一，基因型与 DH10B 高度类似 (DH10B 为 galE15 型，而 TOP10 为 galU 型)。-CMbio-
TOP10 生长速度快，37℃，10 小时可见克隆。recA1 和 endA1 的突变有利于插入 DNA 的稳定和高纯度质粒 DNA 的提取。可用于构建克隆，蓝白斑筛选等实验。-CMbio-
-CMbio-F-TOP10 感受态细胞经特殊工艺制作，无需 42℃热激，37℃孵育步骤，只需冰浴，10min 内完成转化、 涂板操作，pUC19 质粒检测转化效率可达 1~5×108 cfu/μg DNA。
F-TOP10 快速转化感受态细胞快速转化操作方法 (10min)
1. 提前 15 分钟将用到的筛选培养基平板拿到 37℃预热 -CMbio-
2. F-TOP10 感受态细胞从-80℃拿出，迅速插入冰中，5 分钟后待菌块融化，加入目的 DNA（质粒或连接产物）并用
手拨打 EP 管底轻轻混匀,，冰中静置 5 分钟。-CMbio-
3. 用 200μl 枪将感受态细胞-DNA 混合物转移到已经 37℃预热的 2YT 或 LB 培养基上。-CMbio-
4. 将平板倒置放于 37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作，将平板放 37℃培养至少 13 h。-CMbio-
F-TOP10 快速转化感受态细胞快速热激转化操作方法 (25min,可提高转化效率)
1. F- TOP10 感受态细胞从-80℃拿出，迅速插入冰中，5 分钟后待菌块融化，加入目的 DNA (质粒或连接产物)并用 手拨打 EP 管底轻轻混匀,，冰中静置 5 分钟。-CMbio-
2. 42℃水浴热激 45 秒，迅速放回冰上并静置 2 分钟 (晃动会降低转化效率)。加入 700 μl 不含抗生素的 LB，37℃，
200 rpm 复苏 10 分钟，涂板 (均匀，表面无水渍)。-CMbio-
3. 将平板倒置放于 37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作，将平板放 37℃培养至少 15h。-CMbio-
F-TOP10 快速转化感受态细胞注意事项：
1. F-TOP10 快速转化感受态细胞也可进行热激操作，对于>7 kb 质粒的构建，为了提高转化效率可按以下步骤操作： F-TOP10 感受态细胞从-80℃拿出，插入冰中，5 分钟后，加入目的 DNA 并用手拨打 EP 管底轻轻混匀，冰中静置 20 分钟。42℃水浴热激 45 秒，迅速放回冰中静置 2 分钟。加入 700 μl LB，37℃，200 rpm 复苏 30 分钟，涂板。
2. 感受态细胞最好在冰中缓慢融化。插入冰中 8 分钟内加入目标 DNA，不可在冰中放置时间过长，长时间存放会降 低转化效率，混入目的 DNA 时应轻柔操作。-CMbio-
3. F- TOP10 快速转化感受态细胞涂氨苄/羧苄青霉素抗性平板时效率较高，若涂卡那霉素或其他抗生素平板，转化效 率下降(因无孵育步骤，卡那霉素等对菌体毒性较大)。若要提高卡那霉素或其他抗性质粒的转化效率，可按热激转化操 作，增加孵育步骤。-CMbio-
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上海淳麦生物科技有限公司专注于感受态细胞、质粒、载体、农杆菌、酵母等生命科学领域的产品研发和技术服务支持。
上海淳麦生物科技有限公司在感受态细胞的研发方面，实力雄厚，拥有了克隆、表达、酵母和农杆菌4大类，共计百余种感受态细胞。在电击感受态方面，拥有了大肠杆菌和农杆菌电击感受态种类，极大提高了客户在转基因以及文库构建方面的成功率。
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