细胞内钙离子荧光探针(Fluo-3 AM) 探针标记及检测

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名称：细胞内*离子荧光探针(Fluo-3 AM) 探针标记及检测
产地：国产|进口
编号：YT359
规格：20微升
英文名：Intracellular calcium fluorescence probe
本品是最常用的检测细胞内*离子浓度的荧光探针之一。用于细胞内*离子检测时，Fluo-3 AM的常用浓度为0.5-5μM。通常用含有0.5-5μM的Fluo-3 AM适当溶液和细胞一起在20-37℃孵育15-60分钟进行荧光探针装载，随后适当洗涤，洗涤后可以考虑适当再孵育20-30分钟以确保Fluo-3 AM在细胞内完全转变成Fluo-3。本Fluo-3 AM (*离子荧光探针) 是配制于无水DMSO中的储存液，浓度为5mM。

分子式：C51H50Cl2N2O23
分子量：1129.85

Fluo-3和Fura-2相比，其优点是：一方面可以被氩离子激光(argon-ion laser)的488nm激发光激发，便于检测；另一方面，Fluo-3和*离子结合后荧光变化更强，即对*离子浓度变化的检测更加灵敏；同时，Fluo-3和*离子的结合能力较弱，这样可以比Fura-2检测到细胞内更高浓度的*离子水平；此外，对于细胞内的*离子的即时变化反应得更加准确，减小了因为和*离子解离速度慢而导致的荧光变化滞后。

Fluo-3 AM是一种可以穿透细胞膜的荧光染料。Fluo-3 AM的荧光非常弱，其荧光不会随*离子浓度升高而增强。Fluo-3 AM进入细胞后可以被细胞内的酯酶剪切形成Fluo-3，从而被滞留在细胞内。Fluo-3可以和*离子结合，结合*离子后可以产生较强的荧光，最大激发波长为506nm，最大发射波长为526nm。实际检测时推荐使用的激发波长为488nm左右，发射波长为525-530nm。Fluo-3的激发光谱和发射光谱参考下图。



注意事项：
1. 本Fluo-3 AM在4℃、冰浴等较低温度情况下会凝固而粘在离心管管底、管壁或管盖内，可以20-25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。
2. 荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。

储存条件：-20℃，有效期6个月。

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·N端His标签融合蛋白质粒
编号：YT481
英文名称：N-His plasmid（with CMV promoter）
规格：1μg
本质粒是用于在哺乳动物细胞中表达N端和His tag(His标签)融合的目的蛋白的表达质粒。含有CMV启动子可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达；在多克隆位点的5"端含有一个可以编码His标签的序列，因此可以表达出含有His标签的融合蛋白，可以方便地使用抗His的抗体来识别目的蛋白，有利于目的蛋白检测和分离纯化。质粒为卡那霉素抗性。转染细胞后，可使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。

本质粒质粒的主要信息如下：

 

Feature Nucleotide	Position
CMV promoter	1-602
T3 promoter and T3 primer binding site	620-639
His tag	679-696
multiple cloning site	699-772
T7 promoter and T7 primer binding site	815-836
SV40 polyA signal	847-1230
f1 origin of ss-DNA replication	1368-1674
bla promoter	1699-1823
SV40 promoter	1843-2181
neomycin/kanamycin resistance ORF	2216-3007
HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal	3008-3466
pUC origin	3595-4262

本质粒的图谱如下：


使用说明：
1. 首次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌，进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定，或通过测序进行鉴定。
2. 本质粒在其多克隆位点适当酶切后可以插入待表达的目的基因，需注意插入基因片段和tag之间的读码框要一致，即需要避免发生移码突变。构建的质粒可以用常规方法转染细胞。

储存条件：-20℃。


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·DNA末端平滑试剂盒
编号：YT404
英文名称：DNA Blunting Kit
规格：20次
本试剂盒可以进行20个常规的末端平滑化反应。本品是利用T4 DNA聚合酶(T4 DNA Polymerase)的5"→3"DNA聚合酶活性和3"→5"的DNA外切酶活性，用于将酶切或PCR等反应后产生的粘末端转变为平末端的试剂盒。经过本试剂盒处理产生的平末端DNA片段可以用于常规的平端连接反应。

粘末端有两种，一种为5"端突出末端，另外一种为3"端突出末端。本试剂盒可以将5"端突出末端补平，也可以将3"端突出末端削平(也称打平)。

当末端为5"端突出末端时，T4 DNA Polymerase可以利用其5"→3"DNA聚合酶活性将末端补平；当末端为3"端突出末端时，T4 DNA Polymerase可以利用其3"→5"DNA外切酶活性将末端削平。

产品组份：
T4 DNA Polymerase(1U/μl)————20μl
Reaction Buffer(5X)———————100μl
dNTP Mixture(2.5mM each)—————50μl

Reaction Buffer(5X)：335mM Tris-HCl(pH8.8 at 25℃)，33mM MgCl2，5mM DTT， 84mM(NH4)2SO4。

储存条件：-20℃

·L-谷*酸脱羧酶
编号：YT592
英文名称：L-Glutamate Decarboxylase (Crude Enzyme)
规格：100ml|1L
本酶为大肠杆菌表达的L-谷*酸脱羧酶，并经简单纯化获得的可以确保达到一定酶活力的粗酶液，用于催化谷*酸脱羧生成重要的抑制性神经递质γ-*基丁酸。

CAS：9024-58-2
外观：半透明黄色溶液
酶促反应：L-glutamate = 4-aminobutanoate + CO2
储存条件：-20℃，有效期1个月。

注意事项：
1. 由于本产品需新鲜制备，在您确认订购后约8个工作日才能发货。
2. 粗酶液的每次冻融均可能会引起部分失活，所以收到酶液后请根据需要进行分装，并置于-20℃或更低温度保存。
3. 随着保存时间的延长，酶活力会有一定程度的下降，收到产品后应尽快使用。
4. 本产品在生产和保存的过程中可能会有混浊或沉淀产生，融化后混匀即可，不影响正常使用。


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·iNOS抑制剂(SMT)(诱导型一氧化*(代"氮")合成酶抑制剂)
编号：YT277
英文名称：iNOS Inhibitor(SMT)
规格：100mg
本品是iNOS高度选择性抑制剂。对于体外培养巨噬细胞诱导产生的iNOS，EC50＝6μM；对于血管平滑肌细胞被诱导产生的iNOS，EC50＝2μM。SMT，即S-Methylisothiourea Sulfate，也称2-Methyl-2-thiopseudourea,Sulfate，或S-Methyl-ITU

分子式：(C2H6N2S)2·H2SO4
分子量：278.4
性状：白色结晶
纯度：＞99%

注意事项：如果配制成水溶液，分装后-20℃保存，半年有效。

储存条件：室温，有效期2年。

·N端Flag标签融合蛋白质粒
编号：YT479
英文名称：N-Flag plasmid（with CMV promoter）
规格：1μg
本质粒是用于在哺乳动物细胞中表达N端和Flag tag(Flag标签)融合的目的蛋白的表达质粒。含有CMV启动子可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达；在多克隆位点的5"端含有一个可以编码Flag标签的序列，因此可以表达出含有Flag标签的融合蛋白，可以方便地使用抗Flag的抗体来识别目的蛋白，有利于目的蛋白检测和分离纯化。质粒为卡那霉素抗性。转染细胞后，可使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。

本质粒质粒的主要信息如下：

Feature Nucleotide	Position
CMV promoter	1-602
T3 promoter and T3 primer binding site	620-639
Flag tag	679-702
multiple cloning site	705-778
T7 promoter and T7 primer binding site	821-842
SV40 polyA signal	854-1237
f1 origin of ss-DNA replication	1375-1681
bla promoter	1706-1830
SV40 promoter	1850-2188
neomycin/kanamycin resistance ORF	2223-3014
HSV-thymidine kinase(TK)polyA signal	3015-3473
pUC origin	3602-4269

本质粒的图谱如下：


使用说明：
1. 首次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌，进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定，或通过测序进行鉴定。
2. 本质粒在其多克隆位点适当酶切后可以插入待表达的目的基因，需注意插入基因片段和tag之间的读码框要一致，即需要避免发生移码突变。构建的质粒可以用常规方法转染细胞。

储存条件：-20℃。

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