DNA探针变性液价格

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产供应DNA探针变性液价格，我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

名称：DNA探针变性液价格
英文名：DNA Probe Denaturation Solution
规格：10mL
产地：国产|进口
编号：BTN131208
品牌：百奥莱博
杂交反应进行时，探针和靶核酸都必须是单链的。如果用双链DNA探针进行杂交(包括检测RNA时)，双链DNA探针在杂交前必须进行变性。本产品就是即用型的DNA探针变性液，专门针对DNA探针在杂交前进行变性处理。

产品特点：
1. 即开即用。
2. 使用方便快捷，可用于核酸杂交。

储存条件：低温运输、-20℃保存、有效期一年。

使用方法：

一、根据探针和靶分子的不同，分别按下面不同情况计算杂交分子的Tm 值
1. 对 DNA-DNA杂交，其Tm = 81.5 + 16.6×log10[Na+] + 0.41×GC%–500/L
说明：L是探针或靶分子的长度(用两者中最短的一个)
 GC%是探针或靶分子中的GC 百分比(用两者中最短的一个)
 Na+浓度是超级杂交液中Na+的浓度，为0.75 M，16.6×log10[Na+]=(-2.07)
2. 对 DNA-RNA杂交，其Tm 值比DNA-DNA的Tm 值要高10-15℃。
3. 对 RNA-RNA杂交，其Tm 值比DNA-DNA的Tm 值要高20-25℃。
4. 对 Oligo探针杂交，Tm=GC 数量×4℃+AT 数量×2℃。

二、确定最佳杂交温度(预杂交温度跟杂交温度应该一样)
1. 对于大于200bp的DNA-DNA杂交，最佳杂交温度一般比Tm低15-25℃，一般选择68℃。
2. 对 RNA-RNA或DNA-RNA杂交，最佳杂交温度一般比Tm低15-25℃。
 如果这样计算出的杂交温度很高(如高于70℃)，则RNA 容易降解，所以最好选用含甲酰胺的超级杂交液(超级杂交液B型)，以便能在42℃完成杂交。
3. 对 Oligo探针的杂交，最佳杂交温度一般比Tm低5℃。由于Oligo 较短，更容易受各种因素影响(如错配率、修饰碱基比例等)，所以最佳温度需要适度摸索和优化。

三、确定洗膜温度
一般使用0.1×SSC做洗膜液，在此条件下的最佳洗膜温度比Tm低5-12℃，一般情况下可以在55℃进行洗膜。Oligo探针可以室温洗膜。

四、预杂交步骤
 预杂交就是用不含探针的超级杂交液跟印迹膜进行孵育，其目的是用所含的非特异性DNA分子(鲑精DNA或小牛胸腺DNA)及其它高分子化合物将印迹膜上会非特异地吸附探针分子的位点封闭，否则这些位点会吸附标记的探针，造成高背景。
1. 将结合了靶分子的硝酸纤维素印迹膜或尼龙印迹膜浸泡于自备的6×SSC溶液中，使其充分湿润。
2. 将湿润的印迹膜置于一塑料杂交袋中(塑料袋最好预先封口，再剪掉一角，留一个小口)，按每平方厘米印迹膜加0.2mL超级杂交液的比例沿小口加入超级杂交液，然后用塑料封口机将口封牢。
3. 将此塑料袋浸没入温度设定在最佳杂交温度的恒温水浴中或杂交炉中，保温1-2小时，延长到12-16小时亦可。注意保温过程中塑料袋应在不停的摇动状态中，使超级杂交液与印迹膜充分接触。

五、杂交步骤
1. 如果标记的探针是双链核酸，则需经变性处理。具体操作是：根据探针浓度和杂交所需探针的量计算出所需的探针体积，取出所需体积的探针到一干净的硅化的塑料离心管中，加入等体积的本产品，吹打混匀后室温放置5分钟变性后，将探针样品放入冰浴中冷却，加入0.05倍体积的自备的1 M的Tris-Cl溶液(pH7.2)以及等体积的自备的0.4 M的HCl溶液。
将探针样品保存在冰浴中直至需要。如果是单链DNA或RNA探针，则不需变性，直接使用。
2. 将单链探针或变性后的双链探针加入到完成了预杂交的杂交袋中(先用剪刀剪一小口，加入探针后用热封机封口)。探针的加入量视探针标记效率而定，一般要求终浓度不能低于1-2 ng/mL。如果检测基因组中的单拷贝基因，探针的加入量应加大，而对于检测克隆的基因片段，则探针的量可减少。如果是放射性探针，应将此塑料袋套在另一塑料袋之中，以避免杂交袋发生遗漏、污染工作环境。
3.在选定的杂交温度下继续保温，时间一般为6-12小时。

六、洗膜步骤。
 注意在下面的所有操作过程中，一定不要使印迹膜干燥。此步是将与印迹膜非特异结合的探针分子洗去而只留下特异结合的探针分子。由于非特异性杂交的杂交分子解链温度较低，热稳定性较差，在一定的温度和较低的离子强度下，即可洗掉。
1.杂交完毕，取出塑料袋，剪去一角，倒出所有的含探针的杂交液。此含探针的杂交液可以多次使用再倒弃。
2. 剪开杂交袋，用镊子取出印迹膜，浸没于大量的2×SSC(含0.5 % SDS)溶液中，室温下振荡漂洗15分钟。
3. 重复上步操作一次。
4. 将印迹膜转移至0.1×SSC(含0.1% SDS)溶液中，在计算好的洗膜温度下振荡漂洗30分钟至1小时。
5. 重复上步操作一次。如果是同位素标记探针，则需要重复至用盖革计数器在无核酸区域检测不出放射信号为止。
6. 将印迹膜转移到滤纸上，吸去表面液体后印迹膜即可用于后续检测。

我公司的DNA探针变性液价格，性价比高，货期短，送货上门，欢迎您来电咨询购买，另外，我公司还生产供应销*(代"售")下列产品：

·IPTG干粉
编号：BTN100884
英文名称：IPTG Powder
规格：2.5g
IPTG学名为异丙基-β-D-硫代半乳糖苷；分子式为C9H8O5S，分子量为238.31，CAS号为367-93-1。本产品为白色或类白色结晶。溶于水和乙醇。

储存条件：低温运输、-20℃保存、有效期两年。

·一管式拭子DNA提取试剂盒
编号：BTN60501
英文名称：One-tube swab DNA extraction kit
规格：100次
本试剂盒专门用于从口腔拭子中快速提取能够用于PCR的基因组DNA。也可以用于提取微量血液，精液，血斑/精斑等法医物证的DNA。

产品特点：
1.快速，整个操作过程只需要十分钟，在一个离心管中完成。
2. DNA样品可直接用于PCR反应。
3.样品可以在4℃长期保存。
4. 不需要使用任何有毒的试剂。
5. 性价比高。

试剂盒组成：

 

成分	规格
无菌拭子	100只
1.5mL离心管	100只
溶液A	50ml
溶液B	10ml
说明书	1份

储存条件：常温运输及保存。有效期一年。

使用方法：
1. 将医用棉球拭子涂抹面颊的口腔内表面约十次，放入加有0.5mL溶液A的1.5mL塑料离心管中。
2. 剪去口腔拭子柄部，留药棉头于离心管中，盖上离心盖后振荡一分钟。
3. 95℃保温5分钟，用镊子取出离心管中药棉头，并在离心管壁尽量挤出其中的液体。
4. 加入50μl的溶液B，振荡半分钟。
5.室温12000 g离心2分钟。
6. 直接取上清作为模板加入到PCR反应体系中进行扩增，所加量以PCR的总体积的1/５为宜(即50μl的PCR 体系加10μl处理液)。
7. 剩余样品放4℃保存。

使用效果：

图注:用本产品提取涂抹面颊后的拭子的口腔上皮细胞DNA，最后分别取5μl(5号样)和10μl(10 号样)作为模板进行PCR,反应完后取10μl上样电泳。扩增片段为人-actin基因，长度为610bp，M表示100bp DNA Ladder，最大片段为600bp。电泳在SuperBuffer-2中进行，300 V，5分钟。

疑难解答：
Q：能否浓缩第六步上清中的DNA？
A：可以用盐/乙醇法浓缩DNA，用浓缩后的DNA做模板扩增效果更好。


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·dNTP和引物清除剂
编号：BTN131141
英文名称：dNTP-Primer Scavenger
规格：100次
本产品是基于酶学方法的一步法清除dNTP和引物的试剂，用于在PCR结束后去除残留的dNTP和引物，使PCR产物可以不经过任何形式的回收而直接用于后续的测序等反应。



储存条件：低温运输和-20℃保存、有效期一年。

·miRNA尿素-PAGE上样液
编号：BTN70608
英文名称：miRNAload
规格：1.5mL
本品是6×的miRNA尿素-PAGE变性电泳上样液，含有RNase-free的去离子甲酰胺、RNase-free的EDTA和RNase-free的染料等。

产品特点：
1. 即开即用，不需要制备RNase-free的各种溶液。
2. 使用简单，电泳时，先将miRNA样品与本上样液1：5混合，70℃加热处理2-3分钟后，0℃冷却即可直接上样。
3.染料分子小，不会干扰mi R N A的染色。
4.跟本公司的一站式miRNA 尿素-PAGE电泳套装兼容。
5.还可以用于miRNA的琼脂糖电泳。

储存条件：低温运输和-20℃保存，有效期一年。


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·20%CTAB溶液(RNase-Free)
编号：BTN51202
规格：250mL

·单细胞悬浮液
编号：BTN130805
英文名称：Single Cell Suspension Solution
规格：1mL
本产品是单细胞悬浮溶液，本产品与后续各种单细胞分析实验、单细胞扩增实验兼容。

储存条件：低温运输，4℃保存，有效期一年。

·嘌呤霉素干粉
编号：BTN100840
英文名称：Puromycin Powder
规格：25mg
嘌呤霉素为白色结晶。有吸湿性。对光敏感。微溶于水和有机溶剂，易成为水溶性的双盐*(代"酸")盐及单硫*(代"酸")盐。熔点175.5~177℃。是蛋白质合成抑制剂，阻止细菌、藻类、原生动物和哺乳动物细胞的生长。

作用原理：通过特异性地抑制原核及真核核糖体上的*酰转运，使未成熟链合成终止，从而阻碍蛋白质合成。

抗性机制：抗性基因pac编码嘌呤霉素N-乙酰-转移酶。

储存条件：常温运输，4℃保存，有效期6个月。

·壮观霉素溶液
编号：BTN131232
英文名称：Spectinomycin Solution
规格：10mL
本产品为浓度50mg/mL的壮观霉素溶液。壮观霉素(奇霉素； 放线菌壮观素；actinospectacin)。分子式：C14H24N2O7，分子量：495.35，CAS号：22189-32-8。壮观霉素属于*基糖苷的抗菌素。与链霉素不同，它不会发生mRNA的误读，但能与细菌的30S核蛋白体结合而阻碍蛋白质的生物合成。在壮观霉素的抗药性菌株，其30S核蛋白体中被称为“S5”的蛋白质可看到有变异。

储存条件：常温运输、4℃避光干燥保存，有效期一年。

我公司正在优惠促销探针标记及检测等系列产品，期待您的咨询选购DNA探针变性液价格。