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北京大肠杆菌DH10B电击感受
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E.coli DH10B Electroporation-Competent Cell
半年
北京百奥莱博科技有限公司
-80℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京大肠杆菌DH10B电击感受态细胞厂商的品牌:百奥莱博,是优质的克隆与表达产品,用于科研实验,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多大肠杆菌DH10B电击感受态细胞等克隆与表达产品请联*(代"系")我司咨询订购。
名称:北京大肠杆菌DH10B电击感受态细胞厂商产地:国产|进口英文名:E.coli DH10B Electroporation-Competent Cell品牌:百奥莱博编号:BTN160901规格:50μL×5 本电击感受态细胞只能用于电击转化,不能用于热激转化。DH10B菌株来源于MC1061菌株,mcrA、mcrBC 及mrr突变使DH10B菌株适合于克隆富含甲基胞嘧啶或甲基腺嘌呤的DNA(无论真核生物还是原核生物的基因组DNA 都能被高效的转入DH10B中)。recA1和endA1的突变有利于插入DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取。φ80dlacZΔM15 标记的存在使DH10B可用于蓝白斑筛选,rpsL 赋予其链霉素抗性。DH10B电击感受态细胞适用于大质粒的构建或者各种文库构建。本感受态细胞经特殊工艺制作,经 pUC19质粒检测,转化效率>1010cfu/μg。 菌株基因型为:[F-mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC)φ80lacZΔM15 ΔlacX74 recA1endA1 araD139 Δ(ara,leu)7697 galE15 galK λ- rpsL nupG。储存条件:干冰运输、-80℃保存,有效期半年。自备试剂:目的DNA、SOC培养基等。使用方法:1. 将0.1 cm的电击杯和杯盖从储存液中拿出倒置于干净的吸水纸上5分钟,待其沥干水分,正置5分钟,使乙醇充分挥发,待乙醇挥发干净立即插入冰中,压实冰面,电极杯顶离冰面0.5 cm以方便盖上杯盖,冰中静置5分钟充分降温。2. 取-80℃保存的DH10B电击感受态细胞插入冰中5分钟,待其融化,加入目的DNA(质粒或连接产物)并用手拨打EP 管底轻轻混匀,避免产生气泡,立即插入冰中。(注:对于质粒,测定转化效率使用1μl 10 pg/μL的对照质粒pUC19;对于连接产物,请用乙醇沉淀DNA后加入适量TE缓冲液(10mM Tris HCl,pH7.5; 1mM EDTA)重悬,DNA浓度不超过100 ng/μL,体积不超过5μL/50μL感受态。)3. 用 200μl 枪头(用刀切除0.5 cm 枪尖)将感受态-DNA 混合物快速移到电击杯中,避免产生气泡,盖上杯盖。4.启动电转仪,设置参数:C=25 μF,PC=200 Ω,V=2.4 kV(此为BioRad电转仪推荐参数,也可按所用电转仪推荐的参数操作),将电击杯快速放入电转槽中,电击完成快速插入冰中。5. 向电击杯中加入700μL 不含抗生素的无菌培养基 SOC.,混匀后转移到空EP 管中,37℃,200rpm 复苏60分钟。6. 5000rpm离心一分钟收菌,重悬后取100-200μL 涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。平板上(因菌量较大,若全部涂板请选用直径15cm培养皿2-5个)。将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作,将平板放 37℃培养至少13小时。注意事项:1. 加入DNA时体积不应大于感受态体积的1/10。2.电击感受态细胞加入电击杯应避免产生气泡,气泡会增加弧光放电风险。3. 当 DNA 不纯或存在盐,乙醇,蛋白及缓冲液等污染时,转化效率急剧下降。4.电击杯里的离子可增加溶液的电导,增大在含有细胞和DNA的溶液中产生电流和弧光放电的风险。5. 若转化大质粒或想获得较高转化效率,推荐使用高纯质粒提取试剂盒提取质粒。质粒增大一倍,转化效率下降一个数量级。6. 对于连接产物转化,最好转化前乙醇沉淀DNA后用适量TE缓冲液(10mM Tris HCl,pH7.5; 1mM EDTA)重悬产物,保证DNA浓度不超过100 ng/μL。过高浓度连接产物或过大体积连接产物会降低转化效率,增加弧光放电的风险。7. 混入质粒时应轻柔操作,吸取感受态细胞时避免用力过猛,以免剪切力过大损伤细胞膜,降低转化效率。8.转化高浓度的质粒或连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。9.电击感受态细胞最好保存在-80℃以下,高于-80℃超期储存会导致转化效率会下降。北京大肠杆菌DH10B电击感受态细胞厂商正在火爆热销,除此之外,为您推荐下别热销产品:·T4 RNA连接酶1编号:BTN130622英文名称:T4 RNA Ligase 1规格:1000U本酶催化 3´→5´磷酸二酯键的形成,使核苷酸的5´-磷酸末端和3´-羟基末端连接。伴随着ATP水解为AMP和PPi作用底物包括单链RNA、DNA及二核苷焦磷酸。产品特点:1.连接单链RNA和DNA2.用 5´-[³²P] pCp进行 RNA 3´末端标记3.RNA和DNA分子内及分子间的连接4.合成单链寡脱氧核苷酸5.蛋白质中掺入非天然*基酸6.无单链DNA核酸外切酶、核酸内切酶、RNase以及磷酸酶污染。储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。活性定义:1单位指 37℃条件下,30分钟内将1nmol的5´-[³²P] rA16转化成磷酸盐不溶物所需要的酶量。·ROX内参染料(25μM)编号:BTN100931英文名称:ROX Reference Dye,25μM规格:200μl本酶催化 3´→5´磷酸二酯键的形成,使核苷酸的5´-磷酸末端和3´-羟基末端连接。伴随着ATP水解为AMP和PPi作用底物包括单链RNA、DNA及二核苷焦磷酸。产品特点:1.连接单链RNA和DNA2.用 5´-[³²P] pCp进行 RNA 3´末端标记3.RNA和DNA分子内及分子间的连接4.合成单链寡脱氧核苷酸5.蛋白质中掺入非天然*基酸6.无单链DNA核酸外切酶、核酸内切酶、RNase以及磷酸酶污染。储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。活性定义:1单位指 37℃条件下,30分钟内将1nmol的5´-[³²P] rA16转化成磷酸盐不溶物所需要的酶量。·DNA marker(λ-EcoT14 I)编号:BTN90602J英文名称:DNA ladder(λ-EcoT14 I)规格:100μg本酶催化 3´→5´磷酸二酯键的形成,使核苷酸的5´-磷酸末端和3´-羟基末端连接。伴随着ATP水解为AMP和PPi作用底物包括单链RNA、DNA及二核苷焦磷酸。产品特点:1.连接单链RNA和DNA2.用 5´-[³²P] pCp进行 RNA 3´末端标记3.RNA和DNA分子内及分子间的连接4.合成单链寡脱氧核苷酸5.蛋白质中掺入非天然*基酸6.无单链DNA核酸外切酶、核酸内切酶、RNase以及磷酸酶污染。储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。活性定义:1单位指 37℃条件下,30分钟内将1nmol的5´-[³²P] rA16转化成磷酸盐不溶物所需要的酶量。·Southern专用DNA Marker(DIG标记)编号:BTN120654B英文名称:Southern DNA Marker(Labeled by DIG)规格:20次本产品是用DIG标记的lambda/Hind Ⅲ DNA Marker,可以用做Southern杂交的Marker,便于准确确定杂交片段的大小。产品特点:1. 即开即用,非常方便。2. 每个DNA片段显色强度均匀。储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。使用方法:1. 按常规方法制备琼脂糖胶和酶切基因组DNA。2.上样。在胶的两侧的加样孔中各加入10μL本产品。3. 按常规方法电泳。4. EB或其他染料染色后UV 观察结果。5.转膜。6. 按常规的方法杂交和检测DIG的方法检测。北京大肠杆菌DH10B电击感受态细胞厂商关键词:E.coli DH10B Electroporation-Competent Cell,BTN160901,大肠杆菌DH10B电击感受态细胞SB培养基(Super Broth) 500ml594-43-4 甲基磺酸乙酯(EMS) Ethyl methyl sulfonate色苷酸* BOC-ON 15826-37-66915-15-7 DL-Malic acid DL-苹果酸乙酸*溶液(3mol/L,pH5.4,无菌) 500mlF030709 BIOTIN标记羊抗乙肝e抗原抗体 Polyclonal Goat Anti-HBeAg*BIOTINARB14262 猪核因子kb(NFkb)Elisa方法检测 PY02-394 AC肉汤培养基 250克 硫代乳酸 3-Nitrobenzene sulfonic acid sodiu*(代"m") salt 107-96-0泰乐霉素 Azure B 1405-54-5F020236 兔抗人IgGxIgMxIgA抗体 Rabbit Anti-Human IgGxIgMxIgA57-09-0 CTAB *代十六烷基三甲胺ARB11410 人诱导型一氧化*(代"氮")合成酶(INOS)检测服务 Human inducible nitric oxide synthase,inos ELISA KITF020226 兔抗猫IgG抗体 Rabbit Anti-Cat IgG北京大肠杆菌DH10B电击感受态细胞厂商关键词:E.coli DH10B Electroporation-Competent Cell,BTN160901,大肠杆菌DH10B电击感受态细胞微量样本总RNA提取试剂盒 三碘季铵酚 Mucin 65-29-2E0402 抗凝马血(无菌 袋装) 500ml/1000ml/2000mlARB10070 人cAMP反应元件结合蛋白(CREB)酶联免疫定量检测 Human cyclic amp response element binding protein,creb ELISA KITZCSXQ02 鼠血清 500mlBTN120625 ATP溶液,100mM ATP SolutionRNase&DNase清除剂 Triton x-405聚胞苷酸 D-(-)p-hydroxyphenylgcine Dane salt 24939-03-5F040108 鸡卵清蛋白偶联莱克多巴胺 OVA-RACELISA稀释液 100mlBTN130423 Q交换介质 Q MediumARB10860 人抗神经元核抗体1型/抗Hu抗体(ANNA-1/Hu)检测服务 Human neuronal nuclear autoantibody,anna-1/hu ELISA KITPY01-091 肌苷 10克 BTN120631 Aminoally-dUTP溶液 Aminoally-dUTP Solution72-19-5 L-Threonine L-苏*酸
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