北京促销Rosetta(DE3)感受态细胞价格

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北京百奥莱博科技有限公司专业生产供应北京促销Rosetta(DE3)感受态细胞价格，产品信息：

类别：克隆与表达

英文名：Rosetta(DE3)Competent Cell

产品名	产品编号	包装规格
Rosetta(DE3)感受态细胞	WE0250	100μl×10支

规格：100μl×10支

编号：WE0250

品牌：百奥莱博

  本产品是采用进口Rosetta菌株，经特殊工艺处理得到的感受态细胞，可用于DNA的热击转化。Rosetta菌株是携带*霉素抗性质粒BL21的衍生菌，补充大肠杆菌缺乏的6种稀有密码子(AUA，AGG，AGA，CUA，CCC，GGA)对应的tRNA，提高外源基因，尤其是真核基因在原核系统中的表达水平。使用pUC19质粒检测，转化效率可达107。

 

产品组成：

 

组份	0.1ml×10支
Rosetta(DE3)Competent Cell	10×100μl
Control DNA pUC19，0.1ng/μl	10μl

 

实验前准备及重要注意事项

1、感受态细胞一定要用干冰运输。感受态细胞应在-80℃下保存，不可反复冻融和放置时间过长，以免降低感受态细胞的转化效率。

2、转化所有步骤均在无菌条件下操作。

3、包装中有0.1ng/μl的pUC19DNA，供对照试验使用。

 

使用方法：

1、取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μl，可以根据实际情况分装使用。以下实验以50μl感受态细胞为例。

2、待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA，通常100μl感受态细胞能够被1ng超螺旋质粒DNA所饱和)，用移液器轻轻吹打混匀，冰浴30分钟。

3、42℃热击45秒，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3分钟。

4、向每个离心管中加入450μl无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素)，混匀后置于37℃摇床，150 rpm振荡培养45分钟使菌体复苏。

5、根据实验需求，取适量已转化的感受态细胞，加到含相应抗生素的SOC或LB固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于37℃直至液体被吸收，倒置培养，37℃培养12-16小时。

注意：

1)涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA总量较多，可取少量转化产物涂布平板；若转化的DNA总量较少，可取200-300μl转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少，可通过离心(4000rpm，2分钟)后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于平板中。

2)新制备的固体培养基不易涂干，可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。

3)涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的转化菌落数过少，可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。

 

储存条件：-80℃。

北京促销Rosetta(DE3)感受态细胞价格专业优质供应商：北京百奥莱博科技有限公司

关键词：WE0250,Rosetta(DE3)感受态细胞,Rosetta(DE3)Competent Cell

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编号	类别	名称
WE0273	蛋白质研究	微量BCA蛋白定量试剂盒
WE0269	蛋白质研究	GST琼脂糖凝胶
WE0329	免疫检测	抗c-Myc标签抗体琼脂糖介质
WE0136	核酸扩增(PCR)	SuperSYBR Mixture(不含ROX校正染料)
WE0115	核酸扩增(PCR)	尿嘧啶DNA糖基化酶(UDG酶)
WE0327	细胞凋亡与增殖	Alexa Fluor 488/PI细胞凋亡检测试剂盒
WE0232	基因结构和功能	Y染色体人基因组DNA定量试剂盒
WE0228	基因结构和功能	二代测序DNA快速建库试剂盒(Ion Torrent平台)
WE0288	蛋白质研究	SDS-PAGE上样缓冲液(还原，5×)
WE0236	工具酶	大片段Bst DNA聚合酶
WE0365	FITC标记抗体	FITC标记驴抗兔IgG(H+L)
WE0321	蛋白质研究	一抗稀释液(WB IHC)
WE0267	蛋白质研究	His标签蛋白纯化试剂盒(可溶性蛋白)
WE0299	蛋白质研究	NC膜(0.22μM)
WE0174	DNA纯化	新型植物基因组DNA提取试剂盒
WE0157	核酸扩增(PCR)	miRNA cDNA第一链合成试剂盒
WE0357	一抗	抗GAPDH多克隆抗体
WE0391	二抗	AP标记山羊抗兔IgG(H+L)
WE0195	RNA纯化	miRNA提取试剂盒
WE0298	蛋白质研究	一步法快速WB试剂盒(兔源一抗)
WE0387	HRP标记抗体	HRP标记兔抗山羊IgG(H+L)
WE0383	二抗	Cy3标记山羊抗小鼠IgG(H+L)
WE0368	FITC标记抗体	FITC标记驴抗大鼠IgG(H+L)

 

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