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- 详细信息
- 文献和实验
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- 库存:
215
- 英文名:
Taq plus DNA Polymerase
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销*(代"售")北京高效高保真DNA聚合酶现货,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:北京高效高保真DNA聚合酶现货
品牌:百奥莱博
编号:RFT103
产地:国产|进口
英文名:Taq plus DNA Polymerase
Taq plus DNA Polymerase是由pfu DNA Polymerase和Taq DNA聚合酶按照一定的比例混合而成,具有扩增效率高,错配率低的特点。与Taq DNA聚合酶相比,Taq plus DNA聚合酶具有扩增长度长,保真性好的优点;与pfu DNA聚合酶相比,具有扩增速度快,反应效率高的优点。此酶具有比Taq DNA聚合酶约3倍的PCR可信度。该酶的大多数PCR产物3’端带碱基A,可以通过TA克隆法进行克隆。适用于要求保真性和高效率的PCR反应,大多数情况下可以替代Taq DNA 聚合酶。
产品组成:
Taq plus DNA Polymerase(5U/μl)——————————100μl
10×Taq plus PCR buffer(含Mg2+)——————————1ml
活性定义:1单位(U) Taq plus DNA Polymerase活力定义为在74℃、30分钟内,以活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物,将10 nmol脱氧核苷酸掺入到酸不溶物质所需的酶量。
贮存液:50 mM Tris-HCl (pH 8.0); 0.1 mM EDTA; 1 mM DTT; 50 mM KCl ; Stabilizers; 50% glycerol
使用方法:
1、按照下表在0.2ml PCR管中制备反应体系:
| 成分 | 体积 | 终浓度 |
| Template | 0.1-1μg | as you wish |
| Primer 1(10μM) | 1μl | 200nM |
| Primer 2(10μM) | 1μl | 200nM |
| 10×Taq plus PCR buffer | 5μl | 1× |
| dNTP Mixture(10 mM) | 1μl | 200μM each |
| Taq plus(5 U/μl) | 0.5-1μl | 2.5-5U |
| ddH2O | up to 50μl | - |
2、混匀后,离心快甩将反应液收集到管底。
3、PCR仪如果没有热盖加热的话,补加25μl矿物油。
4、PCR仪上执行以下程序:
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 初始变性 | 94℃ | 1-5 min | 1 |
| 变性 | 94℃ | 30 sec | 25-40* |
| 退火 | Tm-5℃* | 30 sec | |
| 延伸 | 72℃ | 1 min/kb | |
| 最后延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
*注: PCR 反应条件视模板、引物等的结构条件不同而各异。在实际操作中需根据模板、目的片段的大小、碱基序列和引物的长短等具体情况,设定最佳的反应条件(温度、时间等)。
常见问题分析:
1、Taq plus DNA polymerase能扩增多长片段?
对简单模板(如λ噬菌体做模板),可以扩增 kb片段;对复杂模板(如基因组DNA),可以扩增 kb片段。
2、Taq plus DNA polymerase保真性怎样?
Taq plus含有3’-5’校对活性的聚合酶,有校对功能。保真性为普通Taq酶的3倍。
3、使用Taq plus DNA polymerase的扩增产物是否可以进行TA克隆?
由于使用Taq plus得到的PCR产物大多数带有A,可以进行TA克隆。
4、Taq plus DNA polymerase可以扩增高GC含量片段吗?
Taq plus可以扩增高GC含量片段,建议使用Taq plus配合2×GC buffer使用,而不建议使用10×Taq plus PCR buffer。
储存条件:-20℃,有效期一年。
北京高效高保真DNA聚合酶现货极具性价比,此外,我公司正火爆促销以下产品:
·GST标签抗体
编号:RFT171
英文名称:Mouse anti-GST Monoclonal antibody
规格:20μl
小鼠抗GST单抗克隆IgG,抗体推荐用于重组蛋白GST标签检测,不管GST 位于重组蛋白N 端或者C 端。本品采用蛋白A纯化自小鼠腹水,浓度为1mg/ml,
推荐应用比例(最优稀释比例依不同实验具体情况而定):
Western Blot————1:3000~1:50000
ELISA-———————1:5000~1:200000
储存条件:-20℃
·超敏BalbECL发光液
编号:RFT083
英文名称:High sensitive BalbECL luminescence liquid
规格:25ml|100ml|500ml
本品是一种超敏ECL发光液,可与二抗上耦连的辣根过氧化物酶(HRP)发生化学反应,发出荧光,从而可以通过用X光片压片或其它适当荧光成像设备检测样品。BalbECL具有极高灵敏度和高信噪比,可检测出10-100 fg的微量抗原;发光迅速,荧光可使X感光胶片感光达12小时以上,特别适用于痕量蛋白检测;另外高灵敏度可以大大节省宝贵的样品以及非常昂贵的一抗和二抗的用量,降低实验成本。
使用方法:
1、BalbECL工作液的配制:等体积混合适量BalbECL A液和B液,室温放置备用。工作液宜在临检测前配制。
2、Western二抗孵育后,并进行数次洗涤后,用平头镊子将膜取出,用滤纸略吸去过多的液体(切勿接触膜的蛋白面),但不要使膜过度干燥,然后将膜平铺于一洁净保鲜膜上,避免产生气泡。
注:某些市售保鲜膜包裹印迹膜时会淬灭荧光,请选择ECL专用保鲜膜获得更好的实验效果。
3、根据膜的大小,按每平方厘米膜加0.125 ml BalbECL工作液的比例,滴加BalbECL工作液到膜上,确保使工作液均匀覆盖在膜上,常温放置1-2分钟。
注:为达节约目的可将膜减小但勿降低发光液用量,确保发光液完全覆盖于膜上。
4、将保鲜膜折起来完全包裹杂交膜,去除气泡和皱褶,可剪去边缘部多余的保鲜膜。用滤纸吸去多余的发光工作液。用胶带将覆盖杂交膜的保鲜膜固定在暗盒内。
5、在黑暗中放入X感光胶片,分别曝光不同的时间如数秒到数分钟,显影定影观察冲洗结果。如掌握不好曝光时间,可以在膜上放置3-4张X感光胶片,统一曝光3-5分钟,显影后选择一张曝光最好的胶片。
注意事项:
1、BalbECL A液和B液在吸取过程中必须要更换枪头,A液和B液相互污染后会导致A液或B液逐渐失效,影响后续的使用效果。
2、各溶液使用后,请盖紧瓶盖,以防失效。
3、为获得最佳实验结果,请务必优化实验条件,包括检测样品的用量、一抗、二抗稀释度、杂交膜及封闭试剂的选择。
4、由于叠氮*是HRP抑制剂,在缓冲液中应避免使用叠氮*作为防腐剂;如果二抗中含有叠氮*,发光实验前要进行5次TBST或PBST漂洗,每次10分钟。
5、在与膜发生接触过程中,请佩戴手套且使用干净镊子等洁净器材,避免蛋白污染产生高背景。
储存条件:2~8℃,有效期一年。
北京高效高保真DNA聚合酶现货关键词:RFT103,高效高保真DNA聚合酶,Taq plus DNA Polymerase
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北京高效高保真DNA聚合酶现货关键词:RFT103,高效高保真DNA聚合酶,Taq plus DNA Polymerase
·超敏BalbECL发光液
编号:RFT083
英文名称:High sensitive BalbECL luminescence liquid
规格:25ml|100ml|500ml
本品是一种超敏ECL发光液,可与二抗上耦连的辣根过氧化物酶(HRP)发生化学反应,发出荧光,从而可以通过用X光片压片或其它适当荧光成像设备检测样品。BalbECL具有极高灵敏度和高信噪比,可检测出10-100 fg的微量抗原;发光迅速,荧光可使X感光胶片感光达12小时以上,特别适用于痕量蛋白检测;另外高灵敏度可以大大节省宝贵的样品以及非常昂贵的一抗和二抗的用量,降低实验成本。
使用方法:
1、BalbECL工作液的配制:等体积混合适量BalbECL A液和B液,室温放置备用。工作液宜在临检测前配制。
2、Western二抗孵育后,并进行数次洗涤后,用平头镊子将膜取出,用滤纸略吸去过多的液体(切勿接触膜的蛋白面),但不要使膜过度干燥,然后将膜平铺于一洁净保鲜膜上,避免产生气泡。
注:某些市售保鲜膜包裹印迹膜时会淬灭荧光,请选择ECL专用保鲜膜获得更好的实验效果。
3、根据膜的大小,按每平方厘米膜加0.125 ml BalbECL工作液的比例,滴加BalbECL工作液到膜上,确保使工作液均匀覆盖在膜上,常温放置1-2分钟。
注:为达节约目的可将膜减小但勿降低发光液用量,确保发光液完全覆盖于膜上。
4、将保鲜膜折起来完全包裹杂交膜,去除气泡和皱褶,可剪去边缘部多余的保鲜膜。用滤纸吸去多余的发光工作液。用胶带将覆盖杂交膜的保鲜膜固定在暗盒内。
5、在黑暗中放入X感光胶片,分别曝光不同的时间如数秒到数分钟,显影定影观察冲洗结果。如掌握不好曝光时间,可以在膜上放置3-4张X感光胶片,统一曝光3-5分钟,显影后选择一张曝光最好的胶片。
注意事项:
1、BalbECL A液和B液在吸取过程中必须要更换枪头,A液和B液相互污染后会导致A液或B液逐渐失效,影响后续的使用效果。
2、各溶液使用后,请盖紧瓶盖,以防失效。
3、为获得最佳实验结果,请务必优化实验条件,包括检测样品的用量、一抗、二抗稀释度、杂交膜及封闭试剂的选择。
4、由于叠氮*是HRP抑制剂,在缓冲液中应避免使用叠氮*作为防腐剂;如果二抗中含有叠氮*,发光实验前要进行5次TBST或PBST漂洗,每次10分钟。
5、在与膜发生接触过程中,请佩戴手套且使用干净镊子等洁净器材,避免蛋白污染产生高背景。
储存条件:2~8℃,有效期一年。
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