快速高保真DNA聚合酶(野生型)

快速高保真DNA聚合酶(野生型)

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  • ¥1265
  • gelatins/江蓝纯
  • JLC-G13293
  • 国内
  • 2025年07月11日
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      大量

    • 英文名

      快速高保真DNA聚合酶(野生型)

    • 保质期

      3年

    • 供应商

      江西江蓝纯生物试剂有限公司

    • 保存条件

      低温保存

    • 规格

      500 U,2.5 U/ul

    快速高保真DNA聚合酶(野生型)
    产品特点
    快速高保真 DNA 聚合酶(野生型)是从克隆有 Pfu DNA Polymerase 基因的大肠杆菌经诱导表达后分离纯化的,该酶融合了 sso7d 序列,该酶在保证高保真性前提下,大大增强扩增的速度。
    在 PCR 反应中,该酶延伸速度为 1 kb/10-15s,较适合小于2kb以下片段的扩增,具有 5’-3’DNA 聚合酶活性和 3’-5’外切核酸酶活性,产物3’端不带A,不能直接用 TA 载体克隆。一般用于 DNA 片段的 PCR 扩增、DNA 标记、引物延伸、序列测定等,产物不能直接用于 T/A 载体克隆。
    成分规格

    产品组成

    规格

    快速高保真 DNA 聚合酶(野生型)

    200μl / 500U/ 2.5U/μl

    10×快速高保真 Buffer

    2×1ml

    -20℃,有效期 1 年

    本产品仅供科研使用 ,不得用于其它用途

    使使用方法

    产品组成

    规格

    快速高保真 DNA 聚合酶(野生型)

    200μl / 500U/ 2.5U/μl

    10×快速高保真 Buffer

    2×1ml

    -20℃,有效期 1 年

    本产品仅供科研使用 ,不得用于其它用途

    注 意:以下举例为常规PCR反应体系和反应条件,实际操作中应根据模板、
    引物结构和目的片段大小不同进行相应的调整和优化)
    1. PCR 体系:
    推荐体系(50μl)

    试剂

    用量

    模板 DNA

    < 1μg

    10×快速高保真Buffer

    5μl

    dNTP Mixture(2.5 mM each)

    4μl

    Primer 1 (10 μM)

    2μl

    Primer 2 (10 μM)

    2μl

    快速高保真 DNA 聚合酶(野生型)

    0.5 ~ 1μl

    ddH2O

    Up to 50μl


    2. PCR 程序

    过程

    温度

    时间

    预变性

    94℃

    5min

    2535cycles

    变性

    94℃

    30sec

    退火

    55-65

    30sec

    延伸

    72

    1kb/15sec

    终延伸

    72

    5min

    注 意:
    a.  一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度 Tm 相当,无法得到理想的扩增效率时,适当降低退火温度;发生非特异性反应时,提高退火温度,由此优化反应条件。
    3. 结果检测:
    反应结束后取 5 μl 反应产物,加入适量上样缓冲液后进行琼脂糖凝胶电泳检测。

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