- ￥1265
- gelatins/江蓝纯
- JLC-G13293
- 国内
- 2025年07月11日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 英文名：
快速高保真DNA聚合酶(野生型)
- 保质期：
3年
- 供应商：
江西江蓝纯生物试剂有限公司
- 保存条件：
低温保存
- 规格：
500 U,2.5 U/ul
快速高保真DNA聚合酶(野生型)
产品特点
快速高保真 DNA 聚合酶（野生型）是从克隆有 Pfu DNA Polymerase 基因的大肠杆菌经诱导表达后分离纯化的，该酶融合了 sso7d 序列，该酶在保证高保真性前提下，大大增强扩增的速度。
在 PCR 反应中，该酶延伸速度为 1 kb/10-15s，较适合小于2kb以下片段的扩增，具有 5’-3’DNA 聚合酶活性和 3’-5’外切核酸酶活性，产物3’端不带A，不能直接用 TA 载体克隆。一般用于 DNA 片段的 PCR 扩增、DNA 标记、引物延伸、序列测定等，产物不能直接用于 T/A 载体克隆。
成分规格
|
产品组成 |
规格 |
|
快速高保真 DNA 聚合酶(野生型) |
200μl / 500Ｕ/ 2.5U/μl |
|
10×快速高保真 Buffer |
2×1ml |
|
-20℃，有效期 1 年 | |
|
本产品仅供科研使用 ，不得用于其它用途 | |
使使用方法
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产品组成 |
规格 |
|
快速高保真 DNA 聚合酶(野生型) |
200μl / 500Ｕ/ 2.5U/μl |
|
10×快速高保真 Buffer |
2×1ml |
|
-20℃，有效期 1 年 | |
|
本产品仅供科研使用 ，不得用于其它用途 | |
注 意：以下举例为常规PCR反应体系和反应条件，实际操作中应根据模板、
引物结构和目的片段大小不同进行相应的调整和优化）
1. PCR 体系：
推荐体系（50μl）
|
试剂 |
用量 |
|
模板 DNA |
< 1μg |
|
10×快速高保真Buffer |
5μl |
|
dNTP Mixture(2.5 mM each) |
4μl |
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Primer 1 (10 μM) |
2μl |
|
Primer 2 (10 μM) |
2μl |
|
快速高保真 DNA 聚合酶（野生型） |
0.5 ~ 1μl |
|
ddH2O |
Up to 50μl |
2. PCR 程序
|
过程 |
温度 |
时间 | |
|
预变性 |
94℃ |
5min | |
|
25－35cycles |
变性 |
94℃ |
30sec |
|
退火 |
55－65℃ |
30sec | |
|
延伸 |
72℃ |
1kb/15sec | |
|
终延伸 |
72℃ |
5min | |
注 意：
a. 一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度 Tm 相当，无法得到理想的扩增效率时，适当降低退火温度；发生非特异性反应时，提高退火温度，由此优化反应条件。
3. 结果检测：
反应结束后取 5 μl 反应产物，加入适量上样缓冲液后进行琼脂糖凝胶电泳检测。
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文献和实验edwardellen 求助！！！ 本人菜鸟，最近开始接触凋亡相关信号，在HepG-2中做实验，有一点很困惑，HepG-2中的p53是野生型的还是突变型的？还是两者都存在？查了一些资料，有些文章之间表达的意思模凌两可。困惑啊！ 哪位好心的达人能给我一个确定的答案呢？ 另外，是否有做p53相关的牛人能告诉我P53在哪些实验用肿瘤细胞系中是野生型的，在哪些是突变型的？ 谢谢！谢谢！谢谢！ doctormy
yu_ting 现在,急需知道MDA-231是P53野生型的还是突变型的?多谢 iscience 我用“MDA-231 p53”在google里面检索了一下，初步得知该细胞株系P53突变型（The human breast cancer cell line MDA-MB-231, which has high levels of a mutant p53...）。 请参考： http://www.ncbi
野生型 wild type （ 1）指在野生群体中观察到的最高频率的表型，或具有这种表型的系统、生物和基因。在找不到野生型的时候，从栽培型、饲养型中选择认为是基本型的作为野生型（又称为正常型）。例如在果蝇中，白眼和伊红眼是突变型，而红眼则认为是野生型。在很多情况下，野生型相对于突变型是显性的。（ 2）与上述的概念有关，这个术语另外也作为生态的概念来使用。在看作是同一个种的个体之间也存在有相当大的个体变异，要确切地表示种的特征是困难的，但是另一方面，某一个种的野生型（正常型），显示一定
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