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- 文献和实验
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- 库存:
大量
- 英文名:
ISP
- 保质期:
半年
- 供应商:
上海沪震实业有限公司
- 保存条件:
2-8℃
- 规格:
50管/24样
离子结合型果胶(ISP)含量测试盒
测定意义:果胶是构成细胞初生壁和中胶层的主要成分,主要由原果胶、果胶酸甲酯和果胶酸组成。果胶中含有半乳糖醛酸、乳糖、阿拉伯糖、葡萄糖醛酸等,是许多高等植物细胞壁中含量最丰富的多糖成分,其独特的物理、化学性质影响着植物源食品的口感和品质。果胶间以Ca2+桥及其他离子键、氢键、糖苷键、酯键和苯环偶联的方式交联,通过不同的抽提方法可以提取各种形式的果胶,如水溶性果胶(WSP)、离子结合型果胶(ISP)和共价结合果胶(CSP)。
测定原理:
利用带有螯合剂的酸溶液提取离子结合型果胶(ISP),采用咔唑比色法测定果胶含量。果胶水解成半乳糖醛酸,在硫酸溶液中与咔唑试剂进行缩合反应,生成物质在530 nm处有最大吸收峰。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、80%乙醇、丙酮、浓硫酸(不允许快递)、研钵和蒸馏水。
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文献和实验设计应遵循以下两点: 在C-端加入标签 使用长标签或者引入一段linker 由于膜蛋白 N 端信号肽的存在,标签只能加在 C 端。8—10 个组氨酸标签能够提高膜蛋白的结合强度,进而提高收率。 有时可以采取快速的方法进行第一步亲和层析。在细胞破碎阶段,直接加入去垢剂来溶解膜蛋白(不需要提前分离细胞膜),通过此法得到的上清可直接用 HisTrap FF crude 预装柱进行纯化,缩短实验时间。 分子筛 vS 离子交换 亲和层析之后,往往使用分子筛做最后的精纯,但如果杂质依然很多或者膜蛋白
酶切位点。 标签设计应遵循以下两点: 在 C-端加入标签 使用长标签或者引入一段 linker 由于膜蛋白 N 端信号肽的存在,标签只能加在 C 端。8-10 个组氨酸标签能够提高膜蛋白的结合强度,进而提高收率。 有时可以采取快速的方法进行第一步亲和层析。在细胞破碎阶段,直接加入去垢剂来溶解膜蛋白(不需要提前分离细胞膜),通过此法得到的上清可直接用 HisTrap FF crude 预装柱进行纯化,缩短实验时间。 分子筛 vs 离子
中的钙通常是形成不溶性的化合物,但在一定 pH 、维生素 D 、乳糖等的作用下可转变为易溶态。钙也是植物的营养元素之一,不仅有茎叶的植物,大概全部低等植物也都不可缺少。作为植物体的营养虽有很少量就够了,但从农耕经济上看却特别重要。作为电解质的离子钙能降低细胞膜的通透性,特别是对其他金属通透性的降低,可起到过剩营养素和有毒金属的一种解毒剂的作用。钙除在植物的细胞壁中和果胶结合存在外,还经常以草酸钙结晶和少量碳酸钙等非活性的形态贮存于植物体内,而不再进行转移。土壤中碳酸钙的含量对生态学来说是重要
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