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- 百奥莱博
- BTN90505-CFK
- 北京
- 2025年07月15日
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- 库存：
844
- 英文名：
E.coli BL21 (DE3) Chemical Competent Cell
- 保质期：
半年
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
-80℃
特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产供应北京现货大肠杆菌BL21(DE3)化学感受态细胞折扣价，我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称：大肠杆菌BL21(DE3)化学感受态细胞
品牌：百奥莱博
规格：0.1mL*10
英文名：E.coli BL21 (DE3) Chemical Competent Cell
产地：国产|进口
本产品是大肠杆菌BL21(DE3)菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞，可用于DNA的热击转化。使用pUC19质粒检测本产品，转化效率可达107。BL21(DE3)菌株适合表达非毒性蛋白。
该感受态细胞用于以T7 RNA聚合酶为表达系统的高效外源基因的蛋白表达宿主。T7噬菌体RNA聚合酶基因的表达受控于λ噬菌体DE3 区的lacUV5启动子，该区域整合于BL21的染色体上。
菌株基因型为：F-ompT hsdSB(rB-mB-)gal dcm(DE3)
储存条件：干冰运输、-80℃保存，有效期半年。
自备试剂：目的DNA、SOC或LB培养基等。
使用方法：
1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μL，可以根据实际情况分装使用。
以下实验以50μL感受态细胞为例。
2. 待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA，通常100μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA 所饱和)，用移液器轻轻吹打混匀，冰浴30分钟。
3. 42℃热击45秒，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3分钟。
4. 每个离心管中加入450μl 无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素)，混匀后置于37℃摇床，150rpm 振荡培养45分钟使菌体复苏。
5. 根据实验需求，取适量已转化的感受态细胞，加到含相应抗生素的SOC或LB 固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于37℃直至液体被吸收，倒置培养，37℃培养12-16小时。
注意事项：
1. 涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA 总量较多，可取少量转化产物涂布平板；若转化的DNA 总量较少，可取200-300μl转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少，可通过离心(4,000rpm，2分钟)后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于平板中。
2. 新制备的固体培养基不易涂干，可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养
3. 涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的转化菌落数过少，可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。
关键词：E.coli BL21 (DE3) Chemical Competent Cell,大肠杆菌BL21(DE3)化学感受态细胞,BTN90505
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| 编号 | 名称 |
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| BTN131290 | PLPD固定液 |
| BTN100810 | 超快蛋白银染试剂盒 |
| BTN130868 | 人二硫键异构酶 |
| BTN131225 | Carnoy固定液 |
| BTN131230 | DNase I干粉 |
| BTN110809 | 6mL亲和层析柱 |
| BTN130876 | PreScissiom蛋白酶 |
| BTN100809 | 20×SSPE(pH7.4) |
| BTN100930 | 硝酸纤维素膜 |
| BTN140379 | 大肠杆菌Rosetta感受态细胞 |
| BTN51210 | 超快核酸电泳液(干粉) |
| BTN60910 | 非冻型血液DNA保存液 |
| BTN130653 | GpC甲基转移酶(M.CviPI) |
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| BTN130912 | dATP溶液(2.5mM) |
| BTN90208 | 大肠杆菌SURE化学感受态细胞 |
| BTN130952 | M13噬菌体单链基因组DNA提取试剂盒 |
| BTN131009 | NP40裂解液 |
| BTN90605B | TdT加尾法DNA生物素标记试剂盒 |
| BTN130845 | 柱式分枝杆菌RNA提取试剂盒 |
| BTN131224 | Helly固定液 |
| BTN90308 | 亲和硅烷 |
| BTN120409 | BAL 31核酸酶 |
| BTN131092 | 生物素 |
| BTN130544 | AEBSF溶液(10mg/mL) |
| BTN130624 | 9°N DNA连接酶 |
| BTN170401 | 特异性显色基质鲎试剂盒 |
| BTN130856 | T4 RNA连接酶2(截短型) |
| BTN130818 | HRP标记的链霉亲和素 |
| BTN80906 | 一站式miRNA柱式大提试剂盒 |
| BTN131086 | HRP标记亲和素 |
| BTN130666 | 尿嘧啶切刻酶 |
| BTN70102B | 蛋白marker(14.4～97.4kD) |
| BTN131036 | 5´末端同位素标记试剂盒 |
| BTN131209 | MMLV逆转录酶(无RNase H活性) |
| BTN100213 | DNA嵌套缺失试剂盒 |
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文献和实验【专题讨论】原核表达秘笈之宿主菌株的选择！（接原原核表达研究者关心的10个问题贴）
的生产任务”——因为很难亲眼观察微观世界中表达是如何进行的，当出现问题时，我们需要经验判断问题所在。宿主细胞对原核表达可能会产生哪些影响呢？ 知其然还要知其所以然。比如，菌株内源的蛋白酶过多，可能会造成外源表达产物的不稳定，所以一些蛋白酶缺陷型菌株往往成为理想的起始表达菌株。堪称经典的BL21系列就是lon和ompT蛋白酶缺陷型，也是我们非常熟悉的表达菌株。大名鼎鼎的BL21(DE3)融源菌则是添加T7聚合酶基因，为T7表达系统而设计。 真核细胞偏爱的密码子和原核系统有不同，因此，在用原核系统
（三）菌株 工程菌BL21(DE3)pET-32a和工程菌BL21(DE3)p32aGFPuv。 【操作方法】 1.分别挑取工程菌BL21(DE3)pET-32a和BL21(DE3)p32aGFPuv的单菌落接种到5mLLB液体培养基（含氨苄，终浓度为100μg/mL，以下同）。 2.于37℃、250r/min培养
-1,pBADHis, pBADHislacZ，pLLP ompA, pINIIIompA, pMBP-P ,pMBP-C 共表达质粒：pCDFduet-1 以及pCDNA3.1，pEGFP-N2等 大肠杆菌Rosetta（DE3），Rasettagame（DE3），Top10F', BL21(DE3)plySS 等 酵母表达质粒： pPICZαA, pGAPZαA, 酵母细胞 KM71, X33 yingzi
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