大肠杆菌Rosetta-gami(DE3)感受态细胞 克隆与

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

大肠杆菌Rosetta-gami(DE3)感受态细胞 是高品质的克隆与表达产品，由北京百奥莱博供应，用于生化研究，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多大肠杆菌Rosetta-gami(DE3)感受态细胞等克隆与表达产品请联系我司咨询订购。

名称：大肠杆菌Rosetta-gami(DE3)感受态细胞 克隆与表达
品牌：百奥莱博
编号：BTN130559
英文名：E.coli Rosetta-gami(DE3) Rosetta Competent Cell
规格：0.1mL*10
 Rosetta-gami(DE3)是常规表达宿主菌，用于含二硫键真核蛋白表达，细胞质二硫化物还原途径有两个突变，可以增加E.coli细胞质中二硫键的形成。提供稀有密码子 tRNAs。抗性为四环素(12.5μg/ml)、卡那霉素(15μg/ml)、*霉素(34μg/ml)。

基因型：Δ(ara –leu)7697 Δlac X74 Δpho A Pvu II pho R ara D139 ahp C gal E gal K rps L F"[lac +lac Iq pro ](DE3)gor 522::Tn10(TcR)gor B::kan pRARE(CmR)。

储存条件：干冰运输、-80℃保存，有效期半年。

更多有关大肠杆菌Rosetta-gami(DE3)感受态细胞 克隆与表达的价格及使用说明等，请联系我们的业务经理王欣女士咨询，我公司还销*(代"售")以下产品：
DP326 深加工食品DNA提取试剂盒
PY02-306  5%乳糖培养基  250克  
ARB10507 人白细胞介素18(IL-18)elisa测定使用说明书 Human interleukin 18,IL-18 ELISA KIT
DN1701 选择性凋亡DNA Ladder抽提试剂盒
F030809 BIOTIN标记山羊抗小鼠IgG3抗体 Goat Anti-Mouse IgG3*BIOTIN
ARB12764 小鼠L*丙*酸解*酶(PAL)尿液中含量检测 Mouse l-phenylalanine ammonla-lyase,pal ELISA KIT
ARB11097 人金黄色葡萄球菌肠毒素(SE)免费代测 
ARB10623 人α颗粒膜蛋白(GMP-140)Elisa定量检测 Human alpha-granular membrane protein,gmp-140 ELISA KIT
F040201 人类丙型肝炎病毒重组抗原 HCV
ARB13892 猪传染性胃肠炎病毒抗体(TGEV)酶联免疫定量检测 Porcine transmissible gastroenteritis virus antibody,tgev ELISA KIT
PY02-003  SS琼脂  250克  
ARB10352 人乌头酸酶2(ACO-2)elisa检测说明书 Human aconitase 2,aco-2 ELISA KIT
PY08-015  庆大霉素琼脂平板 9CM  10皿/盒，用于霍乱弧菌的选择性分离培养
ARB10151 人Runt相关基因2(RUNX2)含量分析 Human runt-related transcription factor 2,(runx 2)ELISA KIT
**尼考 Papain 73231-34-2
DN1601 凋亡DNA Ladder快速提取试剂盒
F030833 BIOTIN标记山羊抗人IgG(H+L)抗体 Polyclonal Goat Anti-Human IgG*BIOTIN
ARB12996 小鼠抗平滑肌抗体(ASMA)Elisa分析 Mouse anti-smooth muscle antibody,asma ELISA KIT
F010109 小鼠抗盐*(代"酸")克伦特罗抗体 Monoclonal Mouse Anti-Clenbuterol
F030829 BIOTIN标记兔抗人Ig抗体 Rabbit Anti-Human Ig*BIOTIN
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·常态细胞转化液(免感受态细胞制备)
编号：BTN51101
英文名称：Tranzol
规格：20次
本品能使各种常态的E.coli细胞直接用于快速转化实验，使广大用户不再因为简单的转化实验而再为感受态细胞的制备，保存和运输等繁琐的事情而操心，大大地缩短了基因克隆实验的时间，提高使用者的工作效率。

产品特点：
1. 不需专门制备感受态细胞,直接使用常态的细胞进行质粒转化,随用随配,十分方便。
2. 常态细胞包括新鲜培养的菌液,新鲜的或4℃放置数月的培养基菌落,甘油菌种保存液等。
3.适用菌种和质粒广泛,用过的E.coli菌种包括K12 系的DH5a和Tg1，B 系的BL21(DE3)。用过的质粒有pGEM，pET和Clion系列等。
4.转化效率适中，使用10ng质粒转化一般能得到上万个转化子)效率在10E5 到10E6 CFU/ug质粒之间),使用3-5μL连接液转化一般能得几千个转化子,足够筛选重组子使用(但不适合构建文库)。
5. 单管快速操作，整个操作可以在一个1.5mL塑料离心管中进行，最短可以在三十分钟内完成，不需要过夜细菌培养,热休克处理甚至恒温摇床,极其适用于自动化的大规模克隆筛选工作。
6. 稳定性好，本可以在-20℃条件下长期保存而不用担心转化效率的降低,而感受态细胞在同样条件下会迅速失去活性。

成分	规格
常态转化液	1ml
阳性对照(pGEM3或pUC19)10μL,1ng/μL	5T
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：
1. 标记无菌的1.5mL塑料离心管并加入1mL液体培养基(如SOC或LB)，每次转化试验最好加上阳性对照(用提供的pGEM3或其他质粒)和阴性对照(不加DNA)各一个。
2. 如果使用E.coli菌落,则直接用接种环,无菌牙签或无菌吸头从培养皿上挑取1-5个菌落(直径在3-5 mm之间)到每个离心管中，用移液枪轻柔吹打散开。如果使用甘油菌种保存液,则直接取50-100μl菌种液到1mL培养液中。如果使用单个菌落培养得到的新鲜培养液，则取1mL培养了3-4小时的菌液直接从第4步开始。
3. 37℃保温1小时(如果保温时间延长到3-4小时，可以提高转化效率一倍，但过长则转化效率又开始降低)。
4.室温10000rpm离心1分钟后小心移弃上清(液体培养基)，离心速度低于10000rpm则细菌沉淀易丢失。沉淀的细菌约芝麻或麦片大小为宜。细胞过多或过少都不好。
5. 短暂离心，用移液枪小心将残留的培养液(约50μl)吸出，否则残留培养基将会严重影响转化效率，故此步不能省略。
6. 加入50μl 冰浴的Clion转化液并小心将细胞吹打均匀。
7. 加DNA样品。在样品管中加入1-5μl连接反应液并轻柔吹打均匀；在阳性对照管中加入5 ng阳性质粒(没被酶切的载体，也可以使用常用的pGEM，pUC，pBR322等质粒)；在阴性对照管中加入连接反应的阴性对照，如果没有则不加入任何溶液或加入1-5μl无菌水。
8. 将上述离心管置于-20℃直到液体凝固为止(一般需要20分钟到1小时)，然后冰浴放置5-10分钟。
9.在每个离心管中加入1mL无抗菌素的SOC或LB培养液，混匀后置37℃水浴保温1小时以便让抗性基因表达,否则将没有转化子生长。
10. 将溶液充分吹打混匀后分别取30-200μl分别涂于含相关的抗菌素的培养盘上，剩余溶液最好留4℃待用。
11. 37℃ 16-24小时培养，阴性对照盘上不应有任何落菌，否则可以判断操作中有污染或培养基中抗菌素浓度不够。使用质粒转化的阳性对照100μl涂盘一般能有上千个菌落。连接样品转化所得菌落数将取决于连接反应效率等多种因素，100μl的涂盘一般有几十到几百个转化子。

使用效果：

左图是用10 ngClionG载体转化10个E.coli Tg1菌落后得到的转化子。右图是用3μL连接液(ClionB载体+1 Kb DNA片段,10μL反应体系)转化10个E.coli DE3菌落后37℃过夜保温得到的转化子。涂盘量均为200μL。


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ARB11974 大鼠C反应蛋白(CRP)含量分析 Rat c-reactive protein,crp ELISA KIT
ARB13419 鸡α干扰素(IFN-α)检测服务 Chicken interferon α,ifn-α ELISA KIT
NF-258 冻干抗人Alb血清
CYB161060 狗IgG(冻干粉)
F040303 人IgM抗原 Human IgM
ARB10254 人乙*(代"醛")脱*酶(ALDH)elisa测定使用说明书 Human aldehyde dehydrogenase,aldh ELISA KIT
BL1343 PH值标准液(PH6.86)
芥子酸 GSH-Px 530-59-6
F030407 胶体金标记山羊抗小鼠IgG2b抗体 Goat Anti-Mouse IgG2b*GOLD
CYB165024 生物素化羊抗小鼠IgG
PY01-181  灿烂绿  BS  5克  
72-18-4 L-Valine  L-缬*酸
ARB10677 人血管紧张素转化酶(ACE)Elisa分析 Human angiotensin converting enzyme,ace ELISA KIT
ARB10275 人干细胞因子受体(SCFR)含量分析 Human stem cell factor receptor,scfr ELISA KIT
F030620 FITC标记兔抗马IgG抗体 Rabbit Anti-Horse IgG*FITC
ARB14084 犬糖皮质激素(GC)免费代测 
BTN131212 PCR Mix染料 PCR Mix Dye
ARB13791 豚鼠过氧化脂质/乳过氧化物酶(LPO)酶免分析 Guinea pig lipid peroxlde,lpo ELISA KIT
壬二酸 Activated alumina 123-99-9
BTN130995 Cy3-dCTP溶液 Cy3-dCTP Solution
BTN100211 TAE电泳液,50× TAE Buffer, 50×
BTN101104 3"-RACE试剂盒 3"-RACE Kit

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