JM109(DE3)化学感受态细胞

JM109(DE3)化学感受态细胞

编号	名称	规格	单位
YB	JM109(DE3)	10×100ul	包
YB15896	JM109(DE3)	20×100ul	包

 

JM109(DE3)化学感受态细胞基本信息：

 

JM109(DE3)基因型:

endA1 glnV44 thi-1 relA1 gyrA96 recA1 mcrB+ Δ(lac-proAB) e14- [F' traD36 proAB+ lacIq lacZΔM15] hsdR17(rK-mK+) + λ(DE3)

 

JM109(DE3)菌株介绍：

JM109(DE3)菌株源自于JM109,它含有T7RNA聚合酶基因的染色体拷贝。如果克隆至载体上的基因包含了核糖体结合位点，JM109(DE3)就可以对位于T7启动子下游的基因序列进行高水平的表达。但是要注意的是JM109(DE3)不能用于蓝白斑实验，JM109(DE3)采用经常使用的LB培养基，在37℃有氧的条件下培养，然后使用20%甘油，在-80℃的条件下进行菌种保藏。JM109(DE3)转化质粒采用的是42℃热激处理的方法。

 

JM109(DE3)使用说明
1、本产品采用干冰运输，收到后请直接冻存于-80℃冰箱。
2、取冻存于-80℃的100μl感受态细胞于冰上融化；
3、加入1μl纯质粒，轻轻吹打混匀，冰浴30min；
4、将菌液放入42℃水浴中热激45sec，立即放入冰浴中2min；
5、加入900μl SOC/LB培养基，于37℃恒温摇床上150rpm×45min温育；
6、将菌液5000rpm×5min离心，弃尽上清；
7、取100μl新鲜LB培养基将菌体打散，均匀涂布于对应抗性平板表面；
8、平板可先正向37℃放置1h,待液体吸收完毕，再倒置37℃培养过夜。

 

JM109(DE3)注意事项

1、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
2、本产品仅可用于实验室研究，不能用于动物，人体以及作为食品添加剂等用途。
3、混入质粒或连接产物时应轻柔操作，感受态细胞最好在冰中缓慢融化，插入冰中8分钟内加入目标DNA，不可在冰中放置时间过长，长时间存放会降低转化效率。
4、涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA总量较多，可取少量转化产物涂布平板；若转化的DNA总量较少，可取200-300μl转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少，可通过离心后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于平板中。
5、新制备的固体培养基不易涂干，可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
6、涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的转化菌落数过少，可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。