总RNA提取试剂(同Trizol)厂家

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

总RNA提取试剂(同Trizol)厂家由专业试剂供应商北京百奥莱博提供，用于生化研究，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多总RNA提取试剂(同Trizol)等RNA纯化产品请联*(代"系")我司咨询订购。

名称：总RNA提取试剂(同Trizol)厂家
品牌：百奥莱博
规格：100ml
编号：SY0269
英文名：Total RNA Extraction Reagent
本产品是一种用于各种动植物、细菌组织/细胞总RNA抽提的试剂，具有极强的裂解能力，可在短时间内裂解细胞和组织样本，保持样品中RNA的完整性，有效抑制RNA的降解。样品在该试剂中能够充分被裂解，在加入*仿离心后，溶液会形成上清层、中间层和有机层 (鲜红色下层)，RNA分布在上层水相中，收集上清层后，经异丙醇沉淀便可回收得到Total RNA。提取的总RNA纯度高，基本不含蛋白质及基因组DNA， 可直接用于Northern、点杂交、mRNA纯化、体外翻译、RT-PCR、poly(A)+选择、RNA酶保护分析以及构建cDNA文库等多种分子生物学实验。

此外，在除去水样层后，样品中的DNA和蛋白也能相继以沉淀的方式还原。乙醇沉淀能析出中间层的DNA，在有机层中加入异丙醇能沉淀出蛋白。

本品操作简单快速，所有操作可以在一小时内完成。且对少量的组织(50-100mg)和细胞(5×106)以及大量的组织(≥1g)和细胞(>107)均有较好的裂解效果。

注意事项

1）需自备*仿、异丙醇（新开封或提取RNA专用）、75%乙醇 (DEPC水配制)、DEPC和DEPC水。
2）戴一次性干净手套；在单独的洁净的区域操作；在操作过程中避免讲话，以防实验者汗液、唾液中的RNase的污染。
3）请尽量使用RNase free的实验器具，包括枪头和离心管。耐高温器物可150℃烘烤4小时以去除RNA酶，其它器物去除RNA酶可考虑用0.1% 的DEPC水浸泡过夜，然后灭菌，烘干。溶液需用DEPC水配制。RNA实验用的器具和试剂应专门使用，不要用于其它实验。DEPC水建议分装后保存。
4）本产品中含有*酚，具有毒性和腐蚀性。如果吸入体内、接触皮肤、吞食等会中毒、导致灼伤以及其他身体伤害。使用本产品时应穿戴防护物品，如防护服装、手套、眼罩、面罩等。如果不小心接触到眼睛时，应立即用大量的水冲洗以及前往医院治疗；
5）样品用Total RNA Extraction Reagent 匀浆后，如果不即刻加入*仿进行下游实验，可先于-70℃下冻存，可保存一个月以上。另保存在75%乙醇中的RNA沉淀，可于4℃保存1周，-20℃保存1年。
6）RNA半衰期比较短，易降解，建议抽提后尽快进行后续实验。

储存条件：4℃，避光，有效期一年。

参考用量

表1 每1 ml Total RNA Extraction Reagent 能够充分裂解的最大样本量如下：

贴壁细胞	10 cm2培养面积
悬浮动植物细胞或酵母细胞	5×106-1×107个
细菌	107个
全血	50 μl
动物组织	30-100 mg
植物组织 (多糖和多酚含量不高的)	50-100 mg

*过多的样本量可能会导致裂解不充分，并使产物纯度降低。


操作流程

1 样品的处理
1.1 样品的匀浆
A. 贴壁细胞
尽量弃去培养液，直接往直径3.5cm的培养板中加入1ml Total RNA Extraction Reagent 覆盖并反复吹打裂解细胞。
【注】：
1）依据培养板的面积而不是细胞的数量来决定所需的Total RNA Extraction Reagent 量（每10cm2 加1ml）。
2）当加入Total RNA Extraction Reagent量不足时可导致抽提的RNA有DNA污染。
3）贴壁培养细胞往往不能完全从培养瓶（皿）脱落，这并不意味着裂解不完全，此时细胞膜实际已经完全裂开，并已释放RNA，继续后续实验即可。

B. 悬浮细胞
离心收集细胞，每5×106～1×107个细胞加入1 ml Total RNA Extraction Reagent，用移液器反复吹打直至无明显颗粒样存在。
【注】：在加入Total RNA Extraction Reagent前避免洗涤细胞，否则会增加mRNA降解的可能性。裂解某些酵母和细菌可能需要使用匀浆器。

C. 动/植物组织
取新鲜动植物组织或-70℃冻存动物组织在液氮中充分研磨，按照表1加入适当量Total RNA Extraction Reagent 混匀。或取新鲜动植物组织尽量剪碎，加入适当Total RNA Extraction Reagent量，匀浆仪进行匀浆处理。
【注】：样品体积一般不要超过Total RNA Extraction Reagent体积的10%。
1.2 将匀浆样品剧烈震荡后在室温条件下放置5分钟以使核蛋白体完全解离。
1.3（可选）在4℃条件下，12000rpm 离心10min，取上清。
【注】：如样品中含有较多蛋白质、脂肪、多糖或肌肉，植物的块茎结节等可离心去除。离心后的沉淀中包含有细胞外膜、多糖以及高分子量DNA，上清中含有RNA。处理脂肪组织样品时，上层是大量油脂应尽量去除，取澄清的匀浆液进行后续实验。

2 总RNA提取
2.1 向上述裂解液中加入1/5体积的*仿。盖紧离心管盖，剧烈震荡15秒，室温静置2-3min。
2.2 12,000 rpm 4℃ 离心10-15分钟。
【注】:
1）离心后混合物可分3层：上层无色水样层，中间层，下层红色有机*酚*仿层。RNA无一例外的存在于水样层中。
2）该部分容量大约为所加Total RNA Extraction Reagent 总量的50-60%。如用1 ml Total RNA Extraction Reagent提取，上层水相约为500-600 μl。建议吸取400-500 μl，不要吸的太完全，以防吸到中间层导致基因组污染。
3）有机相和中间层是蛋白和DNA，如有需要，请予以保留，并进行相关纯化实验。
2.3 小心吸取上层水相至一个新的离心管中，加入等体积的异丙醇。颠倒混匀后室温放置10min。（RNA沉淀在离心前通常不可见，离心后在管侧和管底形成胶状沉淀。）
2.4 12,000rpm 室温或4℃ 离心10分钟。
2.5 小心弃去上清，加入1 ml用DEPC水配制的75%乙醇。充分洗涤管盖和管壁，并轻弹管底，让沉淀悬浮起来。每使用1ml Total RNA Extraction Reagent 用1ml 75%乙醇对沉淀进行洗涤。
2.6 12,000 rpm 室温或4℃ 离心3分钟，弃去上清，注意不要丢失RNA沉淀。
【注】：剩余的少量液体可短暂离心，然后用枪头吸出，注意不要吸弃沉淀。
2.7 室温放置2-3min，晾干。加入30-100ul RNase free water（DEPC水），待完全溶解后，取少量检测，其余在-70℃保存。

3 产物检测

A. 完整性检测
1）取1 μl RNA加入适当 10×DNA loading buffer，混匀。
2）进行1% 琼脂糖凝胶电泳。若能看见清晰的三条带，证明RNA完整性较好。
【注】：如果是普通的琼脂糖凝胶电泳，28S的位置大约在2kb，18S大约在1kb的位置，不同浓度的凝胶位置变化较大。

B. 纯度检测
检测260 nm，280 nm OD值，并计算OD 260/OD 280。纯的RNA的比值应在1.8-2.2之间。

应用举例
分别利用本品Trieasy和Trozol从胶质细胞中提取Total RNA，利用1%琼脂糖凝胶电泳检测，所提取RNA具有较好完整性， OD值均＞1.9。



总RNA提取试剂(同Trizol)厂家极具性价比，此外，我公司正火爆促销以下产品：

·C/EBPβ-GFP报告基因质粒
编号：SY0209
英文名称：C/EBPβ GFP Reporter Plasmid
规格：1μg
C/EBPβ-GFP报告基因是用于检测C/EBPβ转录活性水平为目的的报告基因。C/EBPβ(CCAAT/enhancer-binding protein beta)是转录因子C/EBPs家族的重要成员，它主要通过对靶细胞基因转录的调节，参与细胞增殖与分化、肿瘤发生与凋亡、细胞周期调控等。

C/EBPβ-GFP报告基因主要用于检测细胞中C/EBP信号通路、药物研究以及基因过表达和RNAi的表型分析等。

pGMC/EBPβ-GFP是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体，在其多克隆位点插入了多个C/EBPβ结合位点，可以高效地检测C/EBPβ的激活水平。由于载体采用了GFP作为报告基因，更便于后续的检测。同时，对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变，增加了质粒的转录因子结合特异性。另外，由于质粒体积减小，使得C/EBPβ-GFP报告基因更易于转染。

质粒图谱



pGM C/EBPβ-GFP质粒测序引物
5’-TAGCAAAATAGGCTGTCCC-3’

使用说明
pGMC/EBPβ-GFP可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。

注意事项
1）本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
2）为了您的健康，实验操作时请穿实验服和带一次性手套。

储存条件：-20℃。

·HNF4-GFP报告基因质粒
编号：SY0174
英文名称：HNF4 GFP Reporter Plasmid
规格：1μg
HNF4-GFP报告基因是用于检测HNF4转录活性水平为目的的报告基因。HNF4(Hepatocyte Nuclear Factor 4)是转录因子核受体超家族中的一员，参与肝细胞分化调控和维持肝细胞的生物学功能。HNF4α主要在消化系统、肝脏和肾脏表达，以及在白色脂肪组织和胰腺中也有少量的表达。HNF4α具有阻断肝纤维化、肝硬化、肝癌的疾病进程,改善肝脏功能的作用。另外,HNF4α在肝干细胞移植方面也发挥重要作用,提高肝细胞移植的成功率。

HNF4-GFP报告基因主要用于检测细胞Hepatocyte Nuclear Factor 4相关信号通路中HNF4的转录活性、药物研究以及基因过表达和RNAi的表型分析等。

pGMHNF4-GFP是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体，在其多克隆位点插入了多个HNF4结合位点，可以高效地检测HNF4的激活水平。由于载体采用了GFP作为报告基因，更便于后续的检测。同时，对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变，增加了质粒的转录因子结合特异性。另外，由于质粒体积减小，使得HNF4-GFP报告基因更易于转染。

质粒图谱



pGM HNF4 -GFP质粒测序引物
5’-TAGCAAAATAGGCTGTCCC-3’

使用说明
pGMHNF4-GFP可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。

注意事项
1）本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
2）为了您的健康，实验操作时请穿实验服和带一次性手套。

储存条件：-20℃。


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·透明质酸酶
编号：SY0387
英文名称：Hyaluronidase
规格：100mg
本品来源于牛睾丸，活力值为400–1,000 units/mg，最佳pH值为4.5–6.0。透明质酸酶，英文名称Hyaluronidase，一类能够降低体内透明质酸活性的酶的总称，结构上由4个相同亚基构成，每个亚基分子量接近14kDa，该酶是一种糖蛋白，包含5%的甘露糖和2.2%的葡萄糖胺。功能上该酶可随机裂解透明质酸、软骨素和硫*(代"酸")软骨素中的 β-N-乙酰己糖胺-[1→4] 糖苷键。常与胶原酶联合使用于降解细胞外基质，从而从组织中分离活细胞。

溶液配制：溶于0.02 M PBS（pH7.0），含77 mM NaCl和0.01% BSA，浓度为1mg/ml。现配现用。

中文别名：玻璃糖醛酸酶；玻璃酸酶
英文别名：Hyaluronoglucosaminidase; Hyaluronate 4-glycanohydrolase
CAS：37326-33-3
来源：牛睾丸
分子量：～55kDa
类型（Type）：I-S
外观：淡黄色至米黄色至褐色粉末
活力单位：基于USP透明质酸酶参照标准，即每分钟在37℃，pH5.7的2ml反应液中引起OD6000.330个变化定义为一个活力单位。
抑制剂（Inhibitor）：Fe2+，Fe3+，Zn2+，Cu2+，肝素，金精三羧酸，硫*(代"酸")，硝酸，乙酰化透明质酸，硫*(代"酸")纤维素酯，胆汁等
储存条件：-20℃保存，有效期两年
结构式


·动植物组织RNA稳定液
编号：SY0267
英文名称：Tissue Stabilizer
规格：100ml
RNA酶广泛存在环境中，很容易降解新鲜采取的动植物组织、血液、体液等样本中的RNA，从而使得研究人员在收集完新鲜样本需要做液氮速冻，或者立即进行RNA的纯化，给研究人员的户外工作带来很多不便。

动植物组织稳定液（Tissue Stabilizer）是专门开发用于稳定并保护采集样本内RNA的完整性，一种无毒溶液，可迅速渗入组织，灭活内源RNase。具有以下特点：

1）操作极其简便：只需要将新鲜组织切成合适大小（≤0.5 cm）的组织块，浸入5~10倍体积的本品中即可。2）稳定周期长：经本品浸渍的组织/细胞可在37℃保存1天，室温保存1周，4℃保存4周，-20℃/-80℃长期保存。3）下游兼容性广：几乎兼容于所有的RNA分离方法，如Total RNA Extraction Reagent总RNA抽提试剂，以及商业化的几乎所有RNA抽提试剂盒，包括离心柱抽提法，磁珠纯化法等。4）应用性广：可用于多种动植物组织如脑、心脏、肝脏、胰脏、肾脏、脾脏、睾丸、肌肉、植物的茎叶等的保存，还可用于酵母、组织培养细胞等。

注意事项

1）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
2）经本品稳定液处理的样本还可做DNA的提取，甚至蛋白质的提取，但由于本品会变性蛋白质，因此不适合做天然蛋白的提取。
3）本本品稳定液室温保存过程中可能会产生一些沉淀，只需要在使用前放到37℃温育片刻，并摇晃使其重溶即可。
4）本本品稳定液仅适用于新鲜组织，不可用于冰冻组织。若需要保护冰冻组织内RNA的稳定性，可使用我司的本品-ICE冰冻动植物组织RNA稳定-过渡溶液，即可在将冰冻组织恢复为匀浆用的组织状态，并进行RNA抽提的过程中，维持RNA的稳定性。

操作流程

1. 样品处理：
A. 动物组织：本品稳定液不会破坏动物组织结构的完整性，因此，已经浸入本品的组织平衡一段时间后，可从溶液中取出，切成更小的组织块（≤0.5 cm大小），再重新放回本品稳定液中。另外，某些动物组织如骨头具有比较弱的液体渗透性，不适合用本品进行RNA保护。
使用：将组织切成合适的大小块（≤0.5 cm大小）后，加入5倍体积的本品稳定液。
B. 植物组织：植物组织天生具有的屏障如叶子表面的蜡层可阻碍本品稳定液的渗透，往往需要破坏这些屏障层从而允许溶液的浸透。对于许多柔软的植物组织如嫩叶，嫩茎等，本品可直接渗透且达到理想的RNA保护效果。
使用：将组织切成合适的大小块（≤0.5 cm大小）后，加入5倍体积的本品稳定液。
C. 组培细胞、白细胞：按照标准实验操作方法收集细胞（用PBS清洗1-2次）。之后往细胞内加入5～10倍体积的本品稳定液。
D. 酵母：收集大约108个细胞 (12,000 g，2 min)，弃上清。加入0.5～1 ml的本品稳定液。长期保存时应将酵母细胞置于本品稳定液中，4℃放置1小时。然后离心收集细胞 (12,000 g，5 min)，弃上清，再置于-80℃保存。

2. 样品保存：
A. -80℃保存：对于归档的样本建议-80℃保存，且效果最佳，样本可长期保存，-80℃条件下本品溶液也会结冻。
首先需要让样本4℃浸透过夜，然后再转移到-80℃。如果中间需要做样本的融化，建议取出4℃浸透过夜的组织或者离心收集细胞，然后再冻存在-80℃。之后，样本可直接放在室温融化，之后重新冻上，不会造成RNA量的严重损失或者RNA完整性的明显破坏。
B. -20℃保存：也适用于归档样本的保存。样本不会在-20℃冻住，但可能会形成结晶。不会对后续RNA分离造成影响，样本可长期保存。
首先需要让样本4℃浸透过夜，然后再转移到-20℃。之后，样本可直接放在室温融化。重新冻上后不会造成RNA量的损失或者RNA完整性的破坏。
C. 4℃保存：大部分样品放到本品溶液中，稳定保存1个月，不会有明显的RNA降解发生。
D. 室温（25℃）保存：建议低温环境保存。若条件不允许，请将本品稳定液于冰上冷却几个小时，然后将样品浸入此溶液中，室温稳定保存1周，不会有明显的RNA降解发生。
E. 37℃保存：纯化的RNA样本于37℃孵育24h，结构依然完整。

3. RNA提取：
注意：RNase失活的过程是可逆的，在样本使用前不要清洗掉本品稳定液。
A． 组织样本：直接用灭菌镊子从本品稳定液中取出组织块，然后用干净的吸水纸吸掉表面的液体。之后立即置于裂解液中匀浆。
B． 细胞样本：由于本品稳定液密度较大，此时需要使用大于普通介质的离心力。一般来说，保存在本品稳定液中的细胞能承受更高的转速，并维持细胞的完整性。大部分细胞能够承受离心速度 (5,000 g，5 min)，收集细胞沉淀。注意：由于不同细胞承受离心力会有差异，建议先用少量的细胞进行离心速度承受性的测试。
C．之后进行后续的RNA抽提，兼容各种常见的RNA抽提试剂，以及商业化的RNA抽提试剂盒。


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Rho123细胞膜电位检测试剂盒   50T |100T
BL0865 羊抗人白蛋白免疫血清
50-02-2 Dexamethasone  地塞米松
磷脂酰乙醇胺 Eosin Y sodiu*(代"m") salt water soluble 39382-08-6或90989-93-8
BTN60601 DNA UV防护剂 DNA UV Erasol
4578-31-8 5-单磷酸腺苷 AMPNa2
明胶包被液   100ml
ARB13462 鸡血管活性肠肽(VIP)Elisa分析 Chicken vasoactive intestinal Peptide,vip ELISA KIT
ARB10523 人白细胞活化黏附因子(ALCAM)含量测试 Human activated leukocyte cell adhesion molecule,alcam ELISA KIT
磷钼酸水溶液(1%)   100ml
BTN3120 微量RNA助沉剂 RNADOWN
ARB12242 大鼠血管内皮细胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)elisa检测 Rat vascuolar cell adhesion molecule 1,vcam-1 ELISA KIT
癸基-β-D-硫代吡喃葡萄糖苷 TRICINE 98854-16-1
002001 无菌脱纤维马血 100ml|500ml
N-甲基-D-葡糖胺 MBTH Hydrochloride 6284-40-8
BL1225 Hanks,含**,含酚红(HBSS)
PY02-120-1  MC培养基  250克  

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