北京总RNA提取试剂(同Trizol)厂家

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博专业生产销*(代"售")北京总RNA提取试剂(同Trizol)厂家，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：北京总RNA提取试剂(同Trizol)厂家
编号：SY0269
英文名：Total RNA Extraction Reagent
产地：国产|进口
规格：100ml
本产品是一种用于各种动植物、细菌组织/细胞总RNA抽提的试剂，具有极强的裂解能力，可在短时间内裂解细胞和组织样本，保持样品中RNA的完整性，有效抑制RNA的降解。样品在该试剂中能够充分被裂解，在加入*仿离心后，溶液会形成上清层、中间层和有机层 (鲜红色下层)，RNA分布在上层水相中，收集上清层后，经异丙醇沉淀便可回收得到Total RNA。提取的总RNA纯度高，基本不含蛋白质及基因组DNA， 可直接用于Northern、点杂交、mRNA纯化、体外翻译、RT-PCR、poly(A)+选择、RNA酶保护分析以及构建cDNA文库等多种分子生物学实验。

此外，在除去水样层后，样品中的DNA和蛋白也能相继以沉淀的方式还原。乙醇沉淀能析出中间层的DNA，在有机层中加入异丙醇能沉淀出蛋白。

本品操作简单快速，所有操作可以在一小时内完成。且对少量的组织(50-100mg)和细胞(5×106)以及大量的组织(≥1g)和细胞(>107)均有较好的裂解效果。

注意事项

1）需自备*仿、异丙醇（新开封或提取RNA专用）、75%乙醇 (DEPC水配制)、DEPC和DEPC水。
2）戴一次性干净手套；在单独的洁净的区域操作；在操作过程中避免讲话，以防实验者汗液、唾液中的RNase的污染。
3）请尽量使用RNase free的实验器具，包括枪头和离心管。耐高温器物可150℃烘烤4小时以去除RNA酶，其它器物去除RNA酶可考虑用0.1% 的DEPC水浸泡过夜，然后灭菌，烘干。溶液需用DEPC水配制。RNA实验用的器具和试剂应专门使用，不要用于其它实验。DEPC水建议分装后保存。
4）本产品中含有*酚，具有毒性和腐蚀性。如果吸入体内、接触皮肤、吞食等会中毒、导致灼伤以及其他身体伤害。使用本产品时应穿戴防护物品，如防护服装、手套、眼罩、面罩等。如果不小心接触到眼睛时，应立即用大量的水冲洗以及前往医院治疗；
5）样品用Total RNA Extraction Reagent 匀浆后，如果不即刻加入*仿进行下游实验，可先于-70℃下冻存，可保存一个月以上。另保存在75%乙醇中的RNA沉淀，可于4℃保存1周，-20℃保存1年。
6）RNA半衰期比较短，易降解，建议抽提后尽快进行后续实验。

储存条件：4℃，避光，有效期一年。

参考用量

表1 每1 ml Total RNA Extraction Reagent 能够充分裂解的最大样本量如下：

贴壁细胞	10 cm2培养面积
悬浮动植物细胞或酵母细胞	5×106-1×107个
细菌	107个
全血	50 μl
动物组织	30-100 mg
植物组织 (多糖和多酚含量不高的)	50-100 mg

*过多的样本量可能会导致裂解不充分，并使产物纯度降低。


操作流程

1 样品的处理
1.1 样品的匀浆
A. 贴壁细胞
尽量弃去培养液，直接往直径3.5cm的培养板中加入1ml Total RNA Extraction Reagent 覆盖并反复吹打裂解细胞。
【注】：
1）依据培养板的面积而不是细胞的数量来决定所需的Total RNA Extraction Reagent 量（每10cm2 加1ml）。
2）当加入Total RNA Extraction Reagent量不足时可导致抽提的RNA有DNA污染。
3）贴壁培养细胞往往不能完全从培养瓶（皿）脱落，这并不意味着裂解不完全，此时细胞膜实际已经完全裂开，并已释放RNA，继续后续实验即可。

B. 悬浮细胞
离心收集细胞，每5×106～1×107个细胞加入1 ml Total RNA Extraction Reagent，用移液器反复吹打直至无明显颗粒样存在。
【注】：在加入Total RNA Extraction Reagent前避免洗涤细胞，否则会增加mRNA降解的可能性。裂解某些酵母和细菌可能需要使用匀浆器。

C. 动/植物组织
取新鲜动植物组织或-70℃冻存动物组织在液氮中充分研磨，按照表1加入适当量Total RNA Extraction Reagent 混匀。或取新鲜动植物组织尽量剪碎，加入适当Total RNA Extraction Reagent量，匀浆仪进行匀浆处理。
【注】：样品体积一般不要超过Total RNA Extraction Reagent体积的10%。
1.2 将匀浆样品剧烈震荡后在室温条件下放置5分钟以使核蛋白体完全解离。
1.3（可选）在4℃条件下，12000rpm 离心10min，取上清。
【注】：如样品中含有较多蛋白质、脂肪、多糖或肌肉，植物的块茎结节等可离心去除。离心后的沉淀中包含有细胞外膜、多糖以及高分子量DNA，上清中含有RNA。处理脂肪组织样品时，上层是大量油脂应尽量去除，取澄清的匀浆液进行后续实验。

2 总RNA提取
2.1 向上述裂解液中加入1/5体积的*仿。盖紧离心管盖，剧烈震荡15秒，室温静置2-3min。
2.2 12,000 rpm 4℃ 离心10-15分钟。
【注】:
1）离心后混合物可分3层：上层无色水样层，中间层，下层红色有机*酚*仿层。RNA无一例外的存在于水样层中。
2）该部分容量大约为所加Total RNA Extraction Reagent 总量的50-60%。如用1 ml Total RNA Extraction Reagent提取，上层水相约为500-600 μl。建议吸取400-500 μl，不要吸的太完全，以防吸到中间层导致基因组污染。
3）有机相和中间层是蛋白和DNA，如有需要，请予以保留，并进行相关纯化实验。
2.3 小心吸取上层水相至一个新的离心管中，加入等体积的异丙醇。颠倒混匀后室温放置10min。（RNA沉淀在离心前通常不可见，离心后在管侧和管底形成胶状沉淀。）
2.4 12,000rpm 室温或4℃ 离心10分钟。
2.5 小心弃去上清，加入1 ml用DEPC水配制的75%乙醇。充分洗涤管盖和管壁，并轻弹管底，让沉淀悬浮起来。每使用1ml Total RNA Extraction Reagent 用1ml 75%乙醇对沉淀进行洗涤。
2.6 12,000 rpm 室温或4℃ 离心3分钟，弃去上清，注意不要丢失RNA沉淀。
【注】：剩余的少量液体可短暂离心，然后用枪头吸出，注意不要吸弃沉淀。
2.7 室温放置2-3min，晾干。加入30-100ul RNase free water（DEPC水），待完全溶解后，取少量检测，其余在-70℃保存。

3 产物检测

A. 完整性检测
1）取1 μl RNA加入适当 10×DNA loading buffer，混匀。
2）进行1% 琼脂糖凝胶电泳。若能看见清晰的三条带，证明RNA完整性较好。
【注】：如果是普通的琼脂糖凝胶电泳，28S的位置大约在2kb，18S大约在1kb的位置，不同浓度的凝胶位置变化较大。

B. 纯度检测
检测260 nm，280 nm OD值，并计算OD 260/OD 280。纯的RNA的比值应在1.8-2.2之间。

应用举例
分别利用本品Trieasy和Trozol从胶质细胞中提取Total RNA，利用1%琼脂糖凝胶电泳检测，所提取RNA具有较好完整性， OD值均＞1.9。



更多有关北京总RNA提取试剂(同Trizol)厂家的价格及使用说明等，请联系我们的业务经理王欣女士咨询，我公司还销*(代"售")以下产品：

·HSF-GFP报告基因质粒
编号：SY0173
英文名称：HSF GFP Reporter Plasmid
规格：1μg
HSF-GFP报告基因是用于检测HSF转录活性水平为目的的报告基因。HSF(heat shock transcription factors)主要在于控制热应激反应的动态平衡。

HSF-GFP报告基因主要检测Heat Shock Response信号通路、药物研究以及基因过表达和RNAi的表型分析等。

pGMHSF-GFP是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体，在其多克隆位点插入了多个HSF结合位点，可以高效地检测HSF的激活水平。由于载体采用了GFP作为报告基因，更便于后续的检测。同时，对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变，增加了质粒的转录因子结合特异性。另外，由于质粒体积减小，使得HSF-GFP报告基因更易于转染。

质粒图谱



pGM HSF -GFP质粒测序引物
5’-TAGCAAAATAGGCTGTCCC-3’

使用说明
pGMHSF-GFP可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。

注意事项
1）本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
2）为了您的健康，实验操作时请穿实验服和带一次性手套。

储存条件：-20℃。

·脱氧核糖核酸酶I，来源于牛胰腺
编号：SY0270
英文名称：Deoxyribonuclease I (DNase I) from bovine pancreas
规格：15KU
脱氧核糖核酸酶I（DNase I），即Deoxyribonuclease I，一种发现于多种细胞和组织的核酸酶，属核酸内切酶，靶向切割邻近嘧啶的磷酸二酯键，产生5’端为磷酸基团、3’端为羟基的多聚核苷酸，平均消化产物最小为多聚四核苷酸。DNase可催化多种形式DNA，如单链DNA、双链DNA，甚至染色质（其切割速率受组蛋白影响）。最佳的工作范围是pH7-8，DNase的活性依赖于Ca2+，并可被二价金属离子如Co 2+，Mn2+，Zn2+等激活。5mM Ca2+可保护酶使其不被水解。在Mg2+存在下，该酶可随机识别和切断DNA任一条链上的任意位点；而在Mn2+存在的条件下，可同时识别DNA的两条链并在几乎相同的位点进行切割。DNase I最早从牛胰腺中分离而来，至今哺乳动物胰腺也是该酶的最主要的来源之一。

本品来自牛胰腺，由四种色谱区分的组分A，B，C，D构成，摩尔比为4:1:1，而D组分非常少。分子生物学实验中常用于清除蛋白或RNA样品中的DNA，或者用于向DNA中引入缺口使标记碱基插入DNA。本品以含*化*的冻干粉形式供应，酶活力≥2000Kunit Units/mg蛋白。

中文别名：脱氧核糖核酸I；5′-寡核苷酸-水解酶；
英文别名：DNase I; Deoxyribonucleate; 5’-Oligonucleotidohydrolase;
CAS：9003-98-9
分子量：~31kDa
孔尼茨单位：≥2000Kunit Units/mg protein
类型：Type IV
最佳PH：7～8
外观：白色至浅褐色冻干粉
纯度：Protein: ≥80% by Biuret
溶解性：0.15M NaCl：5mg/ml，无色透明溶液
激活剂：多种二价金属离子如Mg2+、Mn2+, Ca2+, Co2+, and Zn2+
抑制剂：β-巯基乙醇；螯合剂；SDS；肌动蛋白
活力单位定义：25℃，pH5.0条件下DNase催化底物DNA，使每毫升每分钟ΔA260增加0.001的变化定义为一个酶活力单位（Kunitz unit）。

储存条件：-20℃，有效期3年。


北京总RNA提取试剂(同Trizol)厂家关键词：总RNA提取试剂(同Trizol),SY0269,Total RNA Extraction Reagent

ARB12604 大鼠晚期糖基化终末产物(AGEs)ELISA检测服务 Rat advanced glycation end products,ages ELISA KIT
CYB168012 兔血清 200ml/瓶
BTN131054 免称量蛋白级DTT Weighting-free DTT
1-*基环丙*(代"烷")羧酸 Cloxacillin sodiu*(代"m") salt hydrate 22059-21-8
ARB10424 人布氏杆菌病(brucellosIs)含量测试 Human brucellosis (brucellosis) ELISA KIT
BFD020 莱克多巴胺快速检测试剂盒
羟高铁血红素 Boc-L-glutamine 15489-90-4
硫*(代"酸")铈铵 Phosphate Buffer solution 7637-03-8
β-甘油磷酸二*五水物 Ammonium oxalate monohydrate 13408-09-8
D-赖*酸盐*(代"酸")盐 Palmitic acid 7274-88-6
ARB10919 人抗髓鞘少突胶质细胞糖蛋白抗体(MOG-Ab)免费代测 
BFD014 鸭禽流感病毒抗体检测试剂盒
PY08-036  乳糖发酵管(带导管) 10ml  10支/盒，用于大肠菌群的确证试验
ARB10569 人再生基因蛋白IV(REG-4)含量测试 Human regeneRating gene Ⅳ,reg-4 ELISA KIT
高温油脂Ⅲ Agarose 12704-91-5
ARB13262 小鼠催乳素(PRL)ELISA代测服务 Mouse prolactin,prl ELISA KIT
北京总RNA提取试剂(同Trizol)厂家关键词：总RNA提取试剂(同Trizol),SY0269,Total RNA Extraction Reagent

9039-53-6 尿激酶 Urolinase
PY01-072  糖化酶(1:100000)  250克  
ARB11551 人凋亡蛋白酶激活因子1(ApAf-1)Elisa定量检测 Human apoptosis protease activating factor-1,apaf-1 ELISA KIT
4,4-双(二甲*基)硫代二*甲酮 Acid brilliant red 1226-46-6
F030702 BIOTIN标记小鼠抗乙肝e抗原抗体 Monoclonal Mouse Anti-HBeAg*BIOTIN
ARB11957 大鼠Ⅲ型胶原(Col Ⅲ)免费代测 Rat collagen type Ⅲ,col Ⅲ ELISA KIT
E0302 抗凝绵羊血(无菌 袋装)
PY02-128B  普通琼脂斜面培养基(化)  250克  
8002-43-5 蛋黄卵磷脂/卵磷脂(蛋黄)
DEAE葡聚糖凝胶A-25 AdoMet 12609-80-2
ARB12510 大鼠载体蛋白B(Apo-B)elisa测定使用说明书 
ARB13195 小鼠脂肪型脂肪酸结合蛋白4(FABP4)免费代测 
87-79-6 L-山梨糖
邻甲*甲*(代"酸") 5-Hydroxytryptamine hydrochloride 118-90-1

北京百莱博科技有限公司是RNA纯化产品的专业生产供应销*(代"售")商，恭候您的咨询选购北京总RNA提取试剂(同Trizol)厂家。