BTN3071型血液RNA提取试剂盒库存

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BTN3071型血液RNA提取试剂盒库存是高品质的RNA纯化产品，由北京百奥莱博供应，用于科研目的生化试验项目，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多血液RNA提取试剂盒等RNA纯化产品请联*(代"系")我司咨询订购。

名称：BTN3071型血液RNA提取试剂盒库存
品牌：百奥莱博
英文名：Blood RNA Extraction Kit
产地：国产|进口
规格：50次
本试剂盒是专门从全血样品中快速提取总RNA的试剂盒，主要用于提取全血细胞的总RNA(提取血浆病毒RNA 需使用病毒RNA提取试剂盒，提取纯化后的白细胞RNA可使用动物RNA提取试剂盒)。

试剂盒特点：
1. RNA 无明显降解和DNA污染，OD260/280 均在1.9以上。血液RNA的产量与动物种类和动物的状态(如有疾病与否)有很大关系，人全血产量为2-6μg/mL，兔全血产量为5-10μg/mL。
2. 操作简单，直接使用新鲜的或冷冻的抗凝全血样品，不需裂解红细胞等任何预处理步骤，整个提取过程只需要十多分钟，可以全在室温下进行。
3.处理量大，每管的样品处理量可以达到1.5mL，高于进口的同类产品。
4.与常用的抗凝剂(包括肝素，EDTA，柠檬酸*，草酸*)兼容，得到的RNA可以直接用于RT-PCR和Northern杂交等研究。

试剂盒组成：

 

成分	50T
溶液A	50ml
溶液B	15ml
溶液C	25ml
溶液D	25ml
说明书	1份

储存条件：常温运输，4℃保存，溶液B和溶液C有腐蚀性。4℃保存的溶液A可能会产生白色沉淀，用前需65℃水浴加热直到沉淀溶解。有效期一年。

使用方法：
1. 将0.2-1.5mL 新鲜或解冻后的抗凝全血加入到1.5mL塑料离心管中，15000g室温离心3分钟，弃上清(血浆)。如果此时血液细胞沉淀体积大于0.2mL，则需要减少血液的使用量，具体减少量需根据具体情况决定，因为各个个体(尤其是患者)血液中白细胞数目差别很大。如果提取0.1mL以下的微量血液样品最好加入百奥莱博的微量助沉剂RNApp。
2. 将1mL溶液A加入到血液细胞沉淀中，用移液枪吹打沉淀使细胞裂解。
3. 将0.3mL的溶液B和0.2mL *仿加入离心管，剧烈震荡30秒。
4. 13000-15000g室温离心5分钟，将上清液(为无色或浅红色，约0.5-0.9mL)转移到另一干净离心管中。为防止污染，最好留100μl左右的上清液。下层有机相一般呈深红色，中间层为白色，含有DNA，蛋白质和其他细胞破碎物，避免触及或吸取。
5. 加入0.5mL的溶液C和0.2mL的*仿到上清液中，用手上下剧烈摇晃30秒。
6. 13000-15000g室温离心3分钟，将上清液(无色，约1mL)转移到另一干净离心管中，避免触及或吸取有机相及其上面的白色膜状物(蛋白质)。可以按每次吸取100-200μl的方式分批转移。
7.在上清液中加入1/2 体积的溶液D，用手上下剧烈摇晃30秒，溶液将呈白色浑浊状。
8. 13000-15000g室温离心5-30分钟，小心移弃上清液，避免触及管底大量的白色RNA沉淀。
9.在离心管中加入1mL 75%乙醇，振荡器上振荡混均30秒。室温离心13000-15000g 1分钟，RNA 此时在管底形成细小沉淀。小心吸弃上清液，注意不要吸弃RNA沉淀。
10. 重复第9 步的75%乙醇清洗步骤一次。
11. 短暂快速离心数秒使管壁上残留液体沉到管底(约50μl)，用移液枪小心吸弃，注意不要吸弃沉淀。此步十分重要，因为残留的乙醇会影响后续反应。
12.室温短暂放置2分钟，立即加入适量(一般为10-30μl)溶解液使RNA沉淀溶解。建议使用具有灭活残留RNase 功能的新型RNA 溶解液液相RNase Scavenger 而不要使用经典的DEPC 水。千万不要用真空离心法使RNA沉淀过于干燥，否则RNA将变得十分难溶。RNA样品可以直接使用，也可以存放于-80℃长期保存。

疑难解答：
1．有的样品在第4 步离心后有很厚的中间层，上清很少。原因是蛋白质变性不充分，可以适当减少血液的用量。白细胞多的血液容易产生这种情况。
2．有的样品在加入溶液D离心后，沉淀上浮在液面，这是由于液体的比重大于沉淀，可以加入少量的超纯水使溶液的比重降低，直到沉淀能下去为止。也可能把下层的有机相取上来了，如果这样需要重做。
3．千万不要用真空离心法使RNA沉淀过于干燥，否则将变得十分难溶。
4．无论使用甲醛变性胶还是非变性胶电泳时，一定要使用RNA变性/上样液(如百奥莱博的RNAload)以让RNA 充分变性，否则加样孔中会有RNA复合物(人们会误以为是DNA污染)。使用没有变性能力的DNA上样液不能使RNA 复合物分离。
5．测OD时一定要使用pH8.0的缓冲液(如TE)，不要使用微酸性的DEPC水，否则OD 值会比真实的值低15-20%。

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·GpC甲基转移酶(M.CviPI)
编号：BTN130653
英文名称：GpC Methyltranferase(M.CviPI)
规格：200U
该GpC甲基转移酶(M.CviPI)能将双链二核苷酸识别序列中所有胞嘧啶残基(C5)甲基化。

产品特点：
1．阻止限制性内切酶的切割；
2．改变DNA的物理特性；
3．对DNA统一进行[3H]标记。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

活性定义：1酶活单位定义为在 20μl反应体系中，37℃条件下，1小时能保护1μg λDNA不被HaeIII限制性核酸内切酶切割所需要的酶量。

热失活：65℃ 20分钟。

备注：
胞嘧啶残基被甲基化后，可影响DNA的物理特性，如：降低Z-DNA形成的自由能，增加DNA的螺旋程度，改变DNA十字形突出的动力学特性。由于在化学测序过程中联*的反应性降低，5-甲基胞嘧啶的位置易于确定下来。


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·组织培养专用蛋白酶抑制剂
编号：BTN130531
英文名称：Protease Inhibitor for Tissue Culture
规格：1mL
本产品就是混合各种蛋白酶抑制剂而得的200×浓缩液，溶剂为DMSO。组织培养时，各种分泌蛋白会不同程度的被各种外源和内源性蛋白酶降解。为防止分泌蛋白的降解，需要在培养基中添加各种蛋白酶抑制剂。

产品特点：
1. 即开即用，不需要单独购买每个成分再配制。
2. 抑制谱广，由多种蛋白酶抑制剂组成，能特异性抑制丝*酸蛋白酶、半胱*酸蛋白酶、天门冬*酸蛋白酶及*基肽酶等各种蛋白酶活性。
3. 它可以与各种组织培养基兼容，在培养基中加入1/200体积即可。

储存条件：低温运输、-20℃保存、有效期两年。

·水蛭素溶液(2万ATU/mL)
编号：BTN130542
英文名称：Hirudin Solution
规格：0.1mL
本产品为水蛭素水溶液，浓度为20000ATU/mL，工作浓度为150-200ATU/mL。水蛭素是从水蛭及其唾液腺中提取的含65个*基酸残基的小分子蛋白，水蛭素对凝血酶有极强的抑制作用，是迄今为止所发现最强的凝血酶天然特异抑制剂。基因重组水蛭素是一种单链环肽化合物，相对分子量约为7000 道尔顿，是目前发现的最强的凝血酶特效抑制剂，其作用不依赖于抗凝血酶Ⅲ。

产品特点：
1.其优点是抗原性弱，少有过敏反应。
2. 不与血小板结合，极少导致血小板减少。
3. 稳定性好，毒性低。

储存条件：低温运输，-20℃保存。

活力单位定义：一个抑制单位ATU(anti-thrombin unit)指，37℃下，灭活一个NIH 单位凝血酶的量

使用方法：根据具体实验要求不同，加入所需要量的本产品。一般建议工作浓度为150-200ATU/mL。用户可以按照要求稀释本产品。后续按照常规操作即可。

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