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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温运输
- 保质期:
一年
- 英文名:
Non-enzymatic Polysaccharide Scavenger
- 库存:
956
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产供应非酶多糖清除剂(RNA样品专用)哪里卖,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:非酶多糖清除剂(RNA样品专用)哪里卖
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
规格:10mL
编号:BTN60204
英文名:Non-enzymatic Polysaccharide Scavenger
用Trizol等方法提取的总RNA样品中经常会含有多糖(Polysaccharide,PS)污染,这些污染会影响下游的RT-PCR和Northern杂交等实验。目前没有十分有效的方法去除这一污染。我公司开发的非酶法PS清除剂能够比较好的解决这一问题。
产品特点:
1.高效,能有效地去除总RNA中的PS污染,使RNA溶液不再粘稠。
2. 不含RNase污染,RNA分子完整性不会受到任何影响。
3.快速,全部操作在样品管中完成,只需要二十多分钟。
4. 稳定,本产品为非酶产品,可以常温运输和4℃长期保存。
储存条件:低温运输,4℃保存,有效期一年。
使用方法:
1. 将十分粘稠的总RNA样品用RNase-free水稀释到100-500μl左右,加入等体积的65℃预热10分钟后的PS Scavenger,振荡器上充分振荡1分钟。
2. 加入等体积的*仿,振荡器上充分振荡1分钟。
3. 12000~15000g离心2分钟,转移上清到一新的离心管中,交界处将有白膜样的多糖沉淀。
4. 加入0.1倍体积的3 M NaOAc(pH5.2)和两倍体积的无水乙醇,混匀后12000~15000g离心10-20分钟。小心弃上清。
5. 加入1mL 75%乙醇,振荡器上短暂振荡后12000~15000g离心2分钟,小心弃上清。
6. 短暂离心,用移液枪小心吸去残留液体后,加入适量RNase-free水或具有灭活残留RNase的液相RNase Scavenger。立即使用或-80℃保存。
我公司的非酶多糖清除剂(RNA样品专用)哪里卖,性价比高,货期短,送货上门,欢迎您来电咨询购买,另外,我公司还生产供应销*(代"售")下列产品:
·PCR法DNA探针地高*(代"辛")标记试剂盒
编号:BTN90604C
英文名称:PCR DNA Labeling Kit(Digoxin)
规格:5次
PCR标记的原理是用带标记的dNTP进行PCR,最后得到的PCR产物将带有标记,可以直接用于杂交试验。其原理示意图如下:

产品特点:
1.一站式,本试剂盒提供经过优化的试剂,不需要用户自己摸索。
2. 足够10次50μl体系的常规PCR(用于制备标记反应的模板和设置对照反应)和5次50μl体系的标记反应。
3.一次标记可以得到μg级的双链DNA探针或约700ng的单链DNA探针,足够多次杂交实验用。
4. 既可用于制备双链探针,也可以用于单链探针。
5. 90604A需自备含标记核苷酸的dNTP,90604B和90604C分别含生物素和地高*(代"辛")标记的底物。自备的标记包括fluorescein-dUTP、hydroxycoumarin-dUTP、resorufin-dUTP和aminoallyl-dUTP等。
6. 本产品得到的探针参入率一般为4-5%(每100个核苷酸中有4-5个将带有非同位素标记),有效降低了空间阻碍,检测效果最佳。
7.可以用于Southern和Northern Blot、原位杂交、菌落和斑点印迹杂交等分析。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 2×标记专用PCR Mix | 500μl |
| dNTP,2mM each | 50μl |
| 含Biotin-11-dUTP的dNTP | 25μL(仅B有) |
| 含DIG-11-dUTP的dNTP | 25μL(仅C有) |
| 超纯水 | 1ml |
| 说明书 | 1份 |
注:标记专用PCR Mix不含dNTP。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
一:准备工作
1. 按常规的方法设计PCR引物,使探针长度在400-800bp之间。过短则标记参入少,探针杂交信号强度减弱;过长则非特异杂交增加,背景变强。
2. 根据PCR引物优化PCR条件。
3. 由于标记的dNTP比较珍贵,所以本试剂盒不推荐以基因组DNA或其他复杂DNA为模板直接进行PCR标记,而是建议采取下述的两步法标记来提高成功率,即先制备非标记PCR产物,再以之为模板制备标记的PCR产物。
二:非标记PCR产物的制备
4. 设置50μL PCR的反应体系:
| 成份 | 用量 |
| 2×标记专用PCR Mix | 25μl |
| dNTP,2mM each | 5μl |
| 自备的探针引物一(10pmol/μL) | 1μL(10μM) |
| 自备的探针引物二(10pmol/μL) | 1μL(10μM) |
| 自备的模板DNA | 1μg基因组DNA或1ng质粒DNA |
| 超纯水 | 补到50μL |
5. 按已经优化的PCR参数进行PCR。
6.电泳检测和胶回收所需的PCR产物,并定量。用10 pmol引物一般能得到1μg左右的PCR产物(具体取决于PCR产物的长度)。注意:最好采取胶回收而不是PCR回收以避免残留引物干扰后续的标记PCR。
三:标记PCR反应(最好做一个不加标记的对照用于定量)
说明:在设置下面反应时,如果加一种引物,就得到单链标记的PCR产物;如果加两种引物,则得到双链标记的PCR产物。由于双链PCR探针在杂交前虽然要变性成单链后使用,但杂交时变性的双链彼此还会复性,这种复性会与探针-靶DNA杂交反应相竞争,降低杂交效率,因此强烈推荐使用单链标记的DNA探针。
| 成份 | 样品 | 对照 |
| 2×标记专用PCR Mix | 25μl | 25μl |
| 含Biotin-11-dUTP的dNTP或 含DIG-11-dUTP的dNTP或 自备的含其他标记dUTP的dNTP |
5μl | 不加 |
| dNTP,2mM | 不加 | 5μl |
| 双链标记:探针引物一和引物二 单链标记:探针引物一或引物二 |
每种50 pmol 一种50 pmol |
每种50 pmol 一种50 pmol |
| 上步胶纯化所得PCR产物 (单链标记可用100ng) |
10 ng | 10 ng |
| 超纯水 | 补到50μL | 补到50μL |
注意:本试剂盒提供的dNTP混合物中,标记底物与非标记底物的比例已经进过优化,如果自备标记dUTP,其与dTTP的最佳比例需要优化,标记不同,比例不同。对DIG-11-dUTP,最佳比例1:3;对BrdUTP,最佳比例为1:1。
7. 按第5步的PCR参数进行标记PCR,但需要进行下列修改:一是循环数增加到35-55个循环。由于模板为纯化后的PCR产物,探针对扩增长度完整性要求不高(长度不均的探针由于能形成网络结构,效果反而更好),所以可以增加循环数;二是延伸时间增加15秒,因为标记dUTP参入到DNA的速度比常规的dTTP慢;三是降低复性温度5-7℃,因为标记核苷酸参入到DNA后,新模板的Tm值将降低。
8. 标记探针的定量:取标记反应和对照反应的产物1-5μl,在琼脂糖凝胶上跟浓度已知的DNA marker一起电泳,并判断探针的浓度。由于标记反应的PCR产物中额外带有非同位素的配体(生物素,地高*(代"辛")等)、因此其泳动速度将慢于非标记PCR产物(但同位素标记不能用此法)。
注意:如果扩增的是单链DNA探针,其结合EB的能力远低于双链DNA(EB是嵌合到双链碱基对之间的,而单链DNA没有碱基对,只有一些局部区域折叠形成的有限双链区,因此能结合的EB很少),因此EB染色的强弱不能准确反应DNA的浓度,可以采用银染定量(跟marker比较)。一般100ng模板按上述条件经过单链PCR扩增可得到700ng左右探针。
9. 剩余的PCR标记产物可以不经过纯化,直接加入(对单链PCR探针)杂或加热变性并急冷后加入(对双链PCR探针)到杂交液中使用。如果暂时不用请放-20℃长期保存。如果需要纯化,请使用乙酸铵/乙醇沉淀法。
非酶多糖清除剂(RNA样品专用)哪里卖关键词:Non-enzymatic Polysaccharide Scavenger,非酶多糖清除剂,BTN60204,RNA样品专用,非酶多糖清除剂(RNA样品专用)
·增强型DAB显色试剂盒
编号:BTN81223
英文名称:Enhanced DAB Chromogenic Kit
规格:100mL
增强型DAB显色试剂盒中含有检测辣根过氧化物酶(HRP)的所有试剂,适合于检测各种印迹膜上标记的HRP。其反应原理是HRP可以催化底物DAB在目的蛋白所在的位置转变为深褐色的化合物,可根据颜色的有无和深浅来检测HRP的存在与否或存在量,进而推测HPR标记物识别的靶分子的位置及含量。该反应的示意图如下:
产品特点:
1.即开即用,不需要用户准备任何材料。
2.DAB以干粉提供,方便运输。
3.可用于各种印迹膜(包括Southern、Northern、Western印迹膜)和免疫组化中的组织切片。免疫组织显色后还可用Nuclear fast red复染。
4.跟PVDF膜、尼龙膜兼容。
5.显色过程中需要避光,在显色后可拍照或扫描。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| DAB干粉 | 100mg |
| 10mL棕色塑料瓶 | 1个 |
| DAB溶解液 | 100ml |
| 增强剂 | 1ml |
| H2O2 | 1ml |
| 说明书 | 1份 |
注意:本产品可以配制100mL增强型DAB显色液,但其具体使用次数根据跟印迹膜的大小密切相关。
储存条件:常温运输,4℃保存,有效期1年
自备试剂:超纯水、HRP标记物(抗体或探针)处理过的印迹膜。
使用方法:
1.从DAB溶解液中取5mL到一个10mL的棕色塑料瓶中(本试剂盒提供),将100mg DAB干粉全部加入,充分振荡混匀,所得溶液即是20×DAB浓缩液。此溶液如果一次不能用完,可以分装成小管在-20℃避光放置6个月。
2.按每cm2印迹膜需要0.1mL DAB显色液的比例计算所需显色液的量,并按下表配制DAB显色液(此处以配制10mL为例,用户如需要配制其他体积,可按比例增减各成分用量):
| 成分 | 用量 |
| DAB溶解液 | 9.4ml |
| 20×DAB浓缩液 | 0.5ml |
| 增强剂 | 0.1ml |
| H2O2 | 10μl |
注意:此溶液必须立即使用。
3.如果是印迹膜,则迅速将印迹膜转移到上步得到的DAB显色液中,室温避光静置。待印迹膜上出现满意的条带时(一般需要2-3分钟,最长不超过10分钟,具体跟靶分子浓度密切相关),迅速将印迹膜转移到盛有超纯水的托盘中摇晃,终止显色反应。数分钟后需要换水,共三次。用吸水纸吸干印迹膜上的水分,照相处理后避光干燥保存印迹膜。
4.如果是组织切片,则直接将DAB染色液滴加在切片上,室温避光放置10分钟,然后浸在超纯水中数次,空气中干燥后显微镜下检测或照相。
非酶多糖清除剂(RNA样品专用)哪里卖关键词:Non-enzymatic Polysaccharide Scavenger,非酶多糖清除剂,BTN60204,RNA样品专用,非酶多糖清除剂(RNA样品专用)
DP323 动物源性植物饲料基因组DNA提取试剂盒
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文献和实验合成的引物是否因存储条件不当而降解。 (3) 模板:降解或过量,可通过电泳检查模板完整性及浓度,必要时重新制备模板。模板的使用量请参考说明书。如果目的条带较长,模板是 cDNA,要确认逆转录所用 RNA 的纯度及完整度,逆转录时不加随机引物重新逆转录。 (4) 反应程序:反应程序不够优化。退火温度不合适,可对退火温度设置梯度,摸索最佳的退火温度;尝试Touch Down 程序。 (5) 酶:酶量加入过多。 Q5: 高保真 PCR 出现突变 A5: (1)测序样品数量:一般来说,一个样品的测序
植物样本 植物组织中常富含酚类、多糖或者其他次级代谢产物,细胞破碎后这些物质就会与 RNA 发生作用,导致 RNA 活性丧失或降解。纯化的产物中含有代谢物,影响 RNA 的质量且在下游实验中抑制酶的反应。另外,粘度增加导致移液误差。 解决方案 1. 使用在不诱导高水平代谢物的条件下生长的植物(采样前让植物在黑暗中生长 1 - 2 天),尽可能使用新鲜、幼嫩、健康的组织。 2. 如果粘度较大,可适当将枪头的前端剪去 2-3 mm,提高移液效率。 动物组织如心脏、肌肉以及皮肤组织 组织
因存储条件不当而降解(建议用新合成的引物进行尝试);引物设计是否合理,可利用 BLAST 检查引物特异性或重新设计引物(如果之前用过该引物,可排除引物设计问题)。2. 模板长期放置、反复冻融会导致模板断裂、开环或降解,应使用新鲜制备的 DNA 双链作为模板;模板 GC 含量过高会导致 DNA 的双链无法打开,此时加入 PCR Enhancer,可以有效降低解链温度;模板为粗品,有可能是 DNA 未释放出来(若样本为植物叶片,要确保植物为非多糖多酚植物,取新鲜幼嫩的叶片,并将叶片面积剪小,如黄枪头尖部
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