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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
425
- 英文名:
Reverse transcriptase Kit
- 保质期:
1年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销*(代"售")反转录试剂盒 核酸扩增(PCR),我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:反转录试剂盒 核酸扩增(PCR)
规格:50次|100次
编号:ALH266
产地:国产|进口
英文名:Reverse transcriptase Kit
本试剂盒是可以除去基因组DNA进行 Real Time RT-PCR 反应的专用反转录试剂。本试剂盒为一管式反转录预混Mix,5 × TRUE RT MasterMix中含有反转录第一链合所需的所有试剂(RTase、RNase Inhibitor、Random primers、Oligo dT Primer、dNTP Mixture、Buffer)。 通常Real Time RT-PCR等实验需要先用DNase I消化去除RNA中残留的基因组DNA(gDNA) ,但是传统DNase I 处理复杂并容易造成 RNA 的降解和损失。本试剂盒中使用了具有DNA分解活性的特殊 gDNA Eraser 2-5分钟消除gDNA残留,不需要DNase 消化和后续繁琐步骤。反转录步骤采用通过基因重组技术克隆表达的点突变型RNase H活性缺失的M-MuLV反转录酶。本酶M-MuLV(RNase Hˉ)的RNase H活性缺失,与M-MuLV 相比,具有更强的延伸能力和稳定性,可用于较长的cDNA合成,具有更高的检测效率和敏感度。
试剂盒组分(100次):
gDNA Eraser-——————————————100μl
10×gDNA Eraser Buffer—————————100μl
5×TRUE RT MasterMix——————————400μl
RNase free H2O—————————————2ml
注意事项:
1. 避免RNase污染。
2. 为保证反转录成功建议使用高质量的RNA样品。
3. gDNA Eraser 、5 × TRUE RT MasterMix非常粘稠,溶液容易吸附在管壁和吸头外导致损失,用前请点甩离心后使用,并且避免吸头外壁沾附损失。gDNA Eraser可以每次按照0.8μl使用,5 × TRUE RT MasterMix可以每次按照3.8μl使用,也不影响使用效果。
储存条件:-20℃,有效期1年。
本品别名:反转录试剂盒|通用反转录PCR试剂盒|去除基因组DNA反转录PCR试剂盒|通用RT-PCR试剂盒
想要了解更多关于反转录试剂盒 核酸扩增(PCR)的价格、品牌、厂家、说明书、促销信息,请和我们联*(代"系")。此外我公司还销*(代"售")下面的产品:
·唾液DNA收集和保存管
编号:ALH177
英文名称:Saliva DNA collection and storage tube
规格:2ml×10套
本试剂盒可提供无疼痛、非侵入性的方法,患者不用忍受抽血的疼痛和感染的风险就能获得高质量、高数量的样品,受测者排斥性低,婴儿和老人都能方便取得DNA样本。收集过程十分简单,受测者将唾液吐至保存液内混匀就完成收集过程。混匀后常温下可运输保存长达一年不会变质。能够节省运送、保存冷藏设备和电力费用。收集的唾液通过几个简单步骤便可提取DNA。抽取的DNA产量高达110μg/2 mL唾液。
传统的人类基因组DNA样品的采集往往需要抽血采集并提取全血基因组DNA获得。该方法有几个明显的缺点:需要一定的采血设备并需要具有医务知识的人员来完成;抽血的疼痛造成排斥拒绝采样;侵入性采集增加了感染的可能性;采集后血液样品必须低温运输保存。
产品特点:
1.非侵入性采检方式免除了抽血的疼痛和降低了污染风险,并增加了取检的便利性,可由受检者自行取样。
2.仅需2ml的唾液样本,即可取得约110μg的DNA(不同个体产量差异很大)。
3.采样后的检体可稳定地储存于室温环境一年以上。
反转录试剂盒 核酸扩增(PCR)关键词:去除基因组DNA反转录PCR试剂盒,通用反转录PCR试剂盒,反转录试剂盒,通用RT-PCR试剂盒
PY01-101 乳酸* 100克
BL1357 RIPA组织/细胞裂解液
ARB14232 大鼠基质细胞衍生因子-1(SDF-1)尿液中含量检测
BL1373 10%SDS
四氧化三铁 AMC 1317-61-9
J0101 抗猪瘟病毒(CSFV)血清 10000ml/25000ml
ARB10003 人1,3-二磷酸甘油酸(1,3-DPG)ELISA代测服务 Human 1,3-disphosphoglyceRate,1,3-dpg ELISA KIT
ARB11569 人基质金属蛋白酶2/明胶酶A(MMP-2/GelAtInAse A)酶标法分析 Human matrix metalloproteinase 2/gelatinase a,mmp-2 ELISA KIT
十二烷基三甲基*化铵 4-Nitrophenyl palmitate 1119-94-4
胃蛋白酶(猪胃粘膜) Silver acetate 9001-75-6
邻*二酚紫指示剂 100ml
偶氮脒类引发剂V59 Amprolium hydrochloride 13472-08-*(代"7")
BTN100938 单细胞全基因组扩增试剂盒 Single Cell WGA Kit
甘*酸乙酯盐*(代"酸")盐 Magnesium dodecyl sulfate 623-33-6
PY04-021 新生霉素 4.5mg/支×10支 每支添加于225 ml改良胰蛋白胨大豆肉汤(mTSB),用于食品和动物饲料中大肠杆菌0157的增菌培养
反转录试剂盒 核酸扩增(PCR)关键词:去除基因组DNA反转录PCR试剂盒,通用反转录PCR试剂盒,反转录试剂盒,通用RT-PCR试剂盒
·通用型蛋白凝胶制备试剂盒
编号:ALH369
英文名称:Universal protein gel preparation kit
规格:20次|60次
本试剂盒利用聚丙*(代"烯")酰胺凝胶电泳原理,采用优化的预混合配方和通用分离/浓缩胶配制缓冲液,分离胶/浓缩胶可以同时一次配制完成。因此极大程度上简化了凝胶制备的操作流程,降低了实验人员接触剧毒试剂的机率。只需要一个凝胶制备系统,一小时内可以快速、方便、安全、稳定的配制出各种浓度的高质量的SDS-聚丙*(代"烯")酰胺凝胶,适用于各个实验室的蛋白电泳和制胶设备,比预制胶更加灵活、经济。
试剂盒组份(60次):
4×PAGE buffer———————————75ml
Acr-Bis solution——————————120ml
APS-————————————————1ml×3
TEMED-———————————————300μl
注意事项:
1. 蛋白凝胶制作中的某些成分有毒性,如丙*(代"烯")酰胺和甲叉双丙*(代"烯")酰胺,因此制胶过程中必须带手套。
2. APS(过硫*(代"酸")铵)溶液容易失活,短时间内使用可放4℃冰箱,长期保存,应分装后放-20℃。
储存条件:4℃。
·细胞组织总RNA提取试剂
编号:ALH001
英文名称:Total RNA extraction reagent From Tissue or Cell
规格:50ml|100ml
本试剂是直接从细胞或组织中提取总RNA的试剂。它在破碎和溶解细胞时能保持RNA的完整性。加入*仿后离心,样品分成水样层和有机层。RNA存在于水样层中。收集上面的的水样层后,RNA可以通过异丙醇沉淀来还原。在除去水样层后,样品中的DNA和蛋白也能相继以沉淀的方式还原。乙醇沉淀能析出中间层的DNA,在有机层中加入异丙醇能沉淀出蛋白。共纯化DNA对于样品间标准化RNA的产量十分有用。
无论是人、动物、植物还是细菌组织,该方法对少量的组织(50-100mg)和细胞(5×106)以及大量的组织(≥1g)和细胞(>107)均有较好的分离效果。本试剂操作上的简单性允许同时处理多个的样品。所有的操作可以在一小时内完成。本试剂抽提的总RNA能够避免DNA和蛋白的污染。故而能够作RNA印迹分析、斑点杂交、poly(A)+选择、体外翻译、RNA酶保护分析和分子克隆。如果是用于PCR,当两条引物位于单一外显子内时,建议用扩增级的DNase I来处理抽提的总RNA。
本试剂能促进不同种属不同分子量大小的多种RNA的析出。例如,从大鼠肝脏抽提的RNA琼脂糖凝胶电泳并用*化乙啶染色,可见许多介于7 kb和15 kb之间不连续的高分子量条带(mRNA和hnRNA成分),两条优势核糖体~5 kb (28S)和~2 kb(18S),低分子量RNA介于0.1和0.3 kb之间 (tRNA, 5S)。当抽提的RNA用TE稀释时其A260/A280比值≥1.8。
储存条件:室温,有效期12个月。
注意事项:
1. 当本试剂用量少于2ml时建议使用清洁的一次性的聚丙材质试管。
2. 当本试剂用量较大时,可以使用玻璃试管(Corex)或聚丙材质试管,事先检验以确保该试管可以耐受加入本试剂和*仿后12,000×g的离心力。不可使用有裂缝或者破损的试管。
3. 离心前小心平衡试管。
4. 离心前玻璃管口必须盖上铝箔并用石蜡膜封口,聚丙*(代"烯")管必须盖紧。
5. 从少量的组织(1~10mg)或细胞(102~104)中分离RNA 样品:往组织或细胞中加入800μl 本试剂。待样品裂解后,加入*仿并进行步骤2 中的抽提操作。在用异丙醇沉淀RNA 之前,加入5~10μg 无RNA 酶的glycogen 作为水样层的载体。为降低其黏度在加入*仿前用26 号注射器抽吸两次以切断基因组DNA。Glycogen 会留在水样层中并和RNA 共析出。在浓缩到4mg/ml 之前它不会抑制逆转录反应第一链的合成也不会抑制PCR。
6. 在匀化后和加入*仿之前,样品可以在–60~–70℃ 保存至少一个月。RNA 沉淀(步骤4,RNA 漂洗)溶于75%的乙醇在2~8℃ 至少可以保存一周,在–5~–20℃ 下至少可保存一年。
7. 台式离心机最大能达到2,600×g 的离心力,如果将离心时间延长到30~60 分钟可以满足步骤2 和步骤3 中的操作。
北京百莱博科技有限公司专业生产核酸扩增(PCR)产品,欢迎来电咨询选购反转录试剂盒 核酸扩增(PCR)。
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文献和实验法 RT—PCR 反应更加快速、灵敏,操作简便,污染率低,RNA 二级结构减少,并且因为聚合酶有校正活性,从而降低了 PCR 反应的错配率。而在两步法中,反应的精确度高,人为的误差相对较小,并且由于在第一步中将 RNA 反转录为 cDNA,从而更易于保存。 另外,两步法的整个过程比一步法更节省费用。传统检测方法的样品用量一般在 ug 级,而在 RT—PCR 检测系统中样品用量陡降至 pg 级。这就在很大程度上降低了实验操作的难度,特别是 mRNA 样品制备的过程得以简化。 3. 应用 对基因
为了研究 RNA 的功能,通常需要通过反转录过程将 RNA 转化为更稳定的互补 DNA(cDNA)。之后 cDNA 可通过分子克隆、PCR 和测序等技术做进一步的研究。因此,反转录过程是许多 RNA 实验研究流程的关键步骤。 为了获得更为准确的研究结果,本期总结了反转录过程中需要考虑的一些因素,以期能够抛砖引玉,给你的实验研究带来些许帮助。 本期内容 RNA 模板制备 基因组 DNA 的去除 反转录酶选择 引物选择 主要反应组分 反应温度和反应时间 第一链和第二链 cDNA 合成 注
原位PCR的反转录不同于原位PCR的过程包括两个:即蛋白酶消化后用无RNA酶的DNA酶消化过夜和原位PCR的反转录过程。此处主要介绍这两个过程,其余方法同原位PCR。 1.DNA酶消化 【试剂与配制】 无RNA酶的DNA酶 10×缓冲液:35μl 3mol/L NaAc,5μl 1mol/L MgSO4,60μl DEPC水 【操作方法】 ① 在蛋白酶处理过的玻片上加入1μl 10×缓冲液,1μl无RNA酶的DNA酶(10U/μl),8μl
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