双酶一管式RT-PCR试剂盒(MMLV-Taq)北京价格

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名称：双酶一管式RT-PCR试剂盒(MMLV-Taq)北京价格
编号：BTN91202
英文名：Two-Enzyme One-Tube RT-PCR Kit
产地：国产|进口
品牌：百奥莱博
本产品是经过精心优化的、基于MMLV 逆转录酶和Taq DNA聚合酶的双酶一管式RT-PCR试剂盒，它含有除模版RNA和其专一性引物以外的所有RT-PCR试剂，包括MMLV 逆转录酶、Taq DNA聚合酶、RT-PCR缓冲液等，可以在同一反应管内完成RNA→cDNA→PCR反应(RT-PCR反应)。

产品特点：
1.一管式完成RT-PCR反应，避免样品交叉污染。
2. 即开即用，用户不需要单独准备RT-PCR所需的各种试剂。
3. 主要成分只有两个RT-PCR buffer和MMLV-Taq Mix，将加样步骤减少到最低，极大降低了加样误差，增加了可重复性。
4. 使用范围广，适用于从病毒RNA 到人RNA的各种RNA 模板。
5.高灵敏度，每个RT-PCR 体系最低可以检测200拷贝的RNA分子，可扩增的模版RNA的最长达2000nt。
6. 所得RT-PCR产物可以直接用于AT克隆。

试剂盒组成：

 

成分	规格
双酶一管式RT-PCR Buffer(2×)	750μl
MMLV-Taq Mix	100μl
RNase-free水	1ml
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：
注意：所有离心管用前最好全部短暂离心几秒使管壁上溶液沉淀到管底。下面以一个30μL 体系的RT-PCR 为例，如果体积不同，各成分用量需要适当调节。
1.在一干净的无RNase的PCR管中，先加入下列成分：

成分	阴性对照	样品
RNA模板(自备，分下面三种情况)	无	见下
总RNA	无	100-500ng
或poly(A)mRNA	无	10-500ng
或体外转录得到的专一RNA	无	0.01 pg-500ng
RNA特异性引物一(自备)	终浓度300nM	终浓度300nM
RNA特异性引物二(自备)	终浓度300nM	终浓度300nM
探针(仅对Realtime RT-PCR)	终浓度200nM	终浓度200nM
RNase-free水	补到13μL	补到13μL
双酶一管式RT-PCR Buffer(2×)	15μl	15μl
MMLV-Taq Mix	2μl	2μl

注：通常初次使用本试剂时，可用引物浓度300nM，探针浓度200nM进行实验，根据实验结果具体情况，在200～800nM 范围内调整引物浓度，在50～400nM 范围内调整探针浓度以达到最佳检测效果。引物、探针、待检样品的具体加量用户可以根据实际情况调整，同时增减DEPC 水用量，保证总反应体积不变即可。
2. 轻柔混合均匀后放入PCR 仪中进行RT-PCR。
3. 设定RT-PCR反应条件时，一般将RT的条件设定成42℃，30 钟，后接94℃变性5分钟，然后进入PCR循环(PCR参数将根据自备引物的Tm 值由用户自行决定注)、最后72℃，5分钟。对Realtime PCR，在复性步骤设置荧光检测，检测通道：FAM/HEX/VIC/ROX/CY5
4. RT-PCR结束后取5-10μL电泳检查。

注意事项：
1. 使用已校准的移液器，选用一次性PCR反应管、离心管、tip 头等进行样本处理及配液等操作，所有用具应不含DNA酶和RNA酶。
2.引物、探针设计过程中应尽可能避免发夹结构、二聚体等现象的发生，探针的位置尽可能靠近上游引物，PCR 目标片段最好小于200bp，尽可能在150bp以内。
3. 实验样品尽可能新鲜，提取过程应严防RNA酶污染及操作不当导致的RNA 降解。
4. 使用本产品时建议对RT-PCR扩增条件、引物浓度和样品用量进行调整，选择最适当的引物浓度、样品浓度和PCR扩增条件。
5. 本产品使用前应在室温充分融解，并用漩涡震荡器充分混匀。
6. 统一配液后分装以减少加样误差，每次实验应设置阴性对照。
7. 禁止标记PCR反应管，避免外源性荧光信号干扰。
8. PCR反应管中不能有气泡，否则会产生非特异的荧光信号。若有气泡，可先用手指将气泡弹破，然后再低速离心消除。
9. 实时荧光PCR 仪器连续进行实验时，最好间隔一小时以上再使用。
10. 实时荧光PCR 仪需经常校正和清洁载样板板孔。
11. 若使用Roch LightCyclerTM荧光PCR 仪，应将毛细管放在专门套管中，以便分装反应体系和加入待检样品。前述操作完毕应低速离心数秒再将毛细管垂直缓慢放入样品架，以免折断；若发生折断，应小心取出，用专用小毛刷擦拭干净后方可进行扩增。
12. 实验室应严格分区，避免PCR产物污染。

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·戊二醛磷酸缓冲固定液
编号：BTN131278
英文名称：Glutaraldehyde Fixative Solution
规格：250mL
本产品为2.5%戊二醛磷酸缓冲固定液，戊二醛为五碳醛，氧气、高温、中性和碱性pH均可使戊二醛失去醛基，产生聚合。戊二醛作为固定液的优点是对组织细胞的细微结构保存较好，不足之处是渗透慢。本产品固定时间通常为15分钟～4小时，不宜过长。

储存条件：常温运输、4℃保存，保存期半年。

·长片段Taq DNA聚合酶
编号：BTN130910
英文名称：Long-Taq DNA Polymerase
规格：500U
本产品由在普通Taq DNA聚合酶进行基因工程优化的快速DNA聚合酶基础商制成的混合酶，配以专为长片段PCR优化的反应缓冲液，特别适合对长片段的扩增。LF-Taq扩增性能优异，能在短时间内完成高效的PCR扩增.用普通Taq DNA聚合酶的进行PCR反应延伸时间一般为1kb/min,快速DNA聚合酶为1kb/10-15 sec，进行8kb产物的PCR反应可在1小时内完成。LF-Taq对简单模板的扩增可达40kb，对复杂模板的扩增也可达20kb.本制品使用国际领先生产工艺生产,经过两次过柱纯化，纯化>98%，完全去除外源蛋白和核酸污染。

产品特点：
1．为长片段扩增特别优化，使用常规PCR Buffer即可扩增8-10kb，使用超长Buffer扩增长度可达20-40kb。
2．反应速度快，聚合速度高达10-15sec/kb，可为科研人员节约多达70%的实验时间。
3．扩增效率高，同等条件下产量远高于普通Taq酶，在扩增片段时优势尤其明显。
4．比活性高，分子量小于普通Taq酶。在相同酶量下有更高的酶活性。
5．低背景，显著减少非特异性条带和引物二聚体。
6．高稳定性，耐热性能，Long-Taq酶的T1/2=2.5-3小时(100℃)，12小时(95℃)，普通Taq酶的T1/2=1.6小时(95℃)，特别适合对高GC含量的模板的扩增。

产品组成：

组分	规格
Taq DNA聚合酶(5U/μL)	0.1mL
10×PCR Buffer	1mL
使用手册	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，保存期为一年。

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