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HG TaqMan miRNA
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60
2 年
上海西格
-20°C
25T /100TX20μl
描述: TaqMan miRNA 反转录试剂盒采用加 A 法进行反转录,加 A 法的反转录效率远高于茎环法,因 此,采用该方法可极大的提高检测灵敏度(原理见图 1)。 该试剂盒操作简单,仅需要两步即可轻松完成 miRNA 的 cDNA 合成,合成的 cDNA 可用于所有 miRNA 的后续定 量检测。反转录完毕后采用特异性的上游引物和接头引物 进行 PCR 扩增,FAM 标记 TaqMan 探针作为荧光报告基 团进行定量检测(原理见图 1)。 TaqMan miRNA 反转录试剂盒专用于 miRNAs 分子的反转录试验,转录获得的 cDNA 产物用于 TaqMan 定量 PCR 方法检测 miRNAs 分子
储存:请置于-20°C,可保存 2 年;避免反复冻融操作方法1 按以下组分在 0.2 ml EP 管中配制应液miRNA (5~100 ng/μl) 4 μl5×TaqMan miRNA RT Solution A 1 μl注意:不建议使用 Total RNA,Total RNA 试验结果通常差于 miRNA。2 在 PCR 仪上按以下条件进行加 A 反应: 37°C 30min 85°C 5min3 反应完毕后,在上述 5μl 反应体系中加入如下试剂,并混合均匀。10×TaqMan miRNA RT Primer 2 μl10×TaqMan miRNA RT Solution B 2 μlH2O 11 μl4 在 PCR 仪上按以下条件进行反转录反应: 30°C 5min55°C 60min 95°C 5min获得的 cDNA 产物可用于多个目标 miRNA 的检测。反转录完毕后获得的 miRNA cDNA,可加入 20~80μl ddH20 稀释2~5 倍,通常取 2μl 即可用于 HG TaqMan miRNA 定量 PCR试剂盒检测。
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