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756
- 英文名:
Bleomycin Solution
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
低温运输
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
博莱霉素溶液报价由专业试剂供应商北京百奥莱博提供,用于科研目的生化试验项目,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多博莱霉素溶液等克隆与表达产品请联*(代"系")我司咨询订购。
名称:博莱霉素溶液报价
英文名:Bleomycin Solution
产地:国产|进口
规格:1mL
品牌:百奥莱博
本产品浓度为100mg/mL博莱霉素的水溶液。博莱霉素(争光霉素;Bleocin ;Zeocin),分子式:C55H83N19O21S2Cu,分子量:1137.41,外观为绿色液体。博来霉素为弱碱性物质。易溶于水、甲醇,微溶于乙醇,是一种属于争光霉素家族的糖蛋白抗生素,在体内能作用于大多数细菌(包括E. coli)、真菌(如:酵母菌)、植物细、动物细胞。
储存条件:低温运输,-20℃避光保存,有效期一年。
我公司的博莱霉素溶液报价,性价比高,货期短,送货上门,欢迎您来电咨询购买,另外,我公司还生产供应销*(代"售")下列产品:
37326-33-3 Hyaluronidase 透明质酸酶
69-78-3 DTNB 5,5二巯基-2,2-二硝基*(代"*")甲醛
L-甲状腺素* DAB 25416-65-3
ARB11541 人高密度脂蛋白(HDL)酶标法分析 Human high density lipoprotein,hdl ELISA KIT
ARB13173 小鼠破骨细胞分化因子(ODF)检测服务 Mouse osteoclast differentiation factor,odf ELISA KIT
PY02-094 肠道菌增菌肉汤 250克
F030222 HRP标记兔抗人IgG FC抗体 Rabbit Anti-Human IgG(FC)*HRP
F030303 胶体金标记小鼠抗乙肝表面抗原抗体 Monoclonal Mouse Anti-HBsAg*GOLD
PY02-064 抗生素检定培养基Ⅱ号(PH6.5-6.6) 250克
PY06-010 沙门氏菌显色培养基 1000ml,用于沙门氏菌的快速分离与鉴别
PC1801 TUREscript 1st Strand cDNA (第一链反转录试剂盒)
ARB11920 人髓样分化因子初次应答基因88(MYD88)elisa检测说明书 Human myeloid differentiation primary response gene 88,myd88 ELISA KIT
ARB11930 大鼠17羟皮质类固醇(17-OHCS)酶联免疫定量检测 Rat 17-hydroxycorticosteroids,17-ohcs ELISA KIT
9005-84-9 可溶性淀粉 Starch potato soluble
网织红细胞染色液 50ml|100ml
H0801 绵羊血浆(去红细胞、无菌过滤) 100ml/200ml/500ml/500ml*20瓶
博莱霉素溶液报价关键词:BTN120704,博莱霉素溶液,Bleomycin Solution
·动物RNA提取试剂盒(柱式Trizol)
编号:BTN71201
英文名称:Animal RNA column extraction kit(Trizol)
规格:50次
本试剂盒是动物总RNA快速提取试剂动物RNA提取试剂盒(BTN3070)的柱式升级产品,可用于从各种动物组织(包括白细胞)快速提取总RNA。
试剂盒特点:
1. 操作更加简单快速,整个过程只需要不到十分钟(对一个样品而言)。
2. RNA 纯度更高,OD260/OD280一般在2.0左右。
3.一般不含用RT-PCR可以检测到的基因组DNA污染。
4.适用于培养细胞、大部分动物组织和部分植物组织。
5. 得到的RNA可直接用于RT-PCR、Northern杂交、cDNA 合成等实验。
6. 性价比高于进口的柱式RNA提取产品。
试剂盒组成:
| 成分 | 50T |
| 溶液A | 50ml |
| 溶液B | 25ml |
| 离心吸附柱 | 50套 |
| 通用洗柱液 | 50ml |
| RNA 洗脱液 | 10ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输,4℃保存,有效期一年。
使用方法:
下面的操作步骤是针对在1.5mL塑料离心管中进行的微量提取的,如果处理样品量大,请按比例增加各成份的用量并使用大的离心管和离心机。
1. 根据组织细胞类型的不同分为下面及种情况使用:
a)对贴壁细胞:吸尽培养液,在每10 平方厘米细胞中加入1mL溶液A,用枪轻柔吹打数次,确保细胞全部裂解。
b)对悬浮细胞:离心收集细胞,吸尽液体,在每1-5×106 悬浮细胞中加入1mL溶液A,用枪轻柔吹打数次,确保细胞全部裂解。如果是fibroblasts或carcinoma cell,1mL溶液A的细胞使用量不要超过1×106个细胞。
c)对新鲜组织:先将剪切成小块新鲜组织或液氮保存的组织放入10mL或15mL塑料离心管中,每50-100mg 组织加1mL溶液A,用匀浆器匀浆30秒左右。对肝、脾、胰、肾等细胞分裂十分旺盛的组织(细胞中含大量正在复制的DNA),建议组织的使用量不要超过50mg/ mL溶液A,否则十分容易产生DNA污染。
d)对RNAhold 保存组织:先用纸吸去RNAhold液体后再剪切成小块,其余操作同新鲜组织的处理。
2. 将裂解物转移至一个干净的1.5mL塑料离心管中,然后加入0.2倍体积的自备*仿(1mL溶液A需0.2mL *仿),振荡器上充分振荡混均30秒。
3. 12000rpm室温离心3~5分钟。
4. 将上清液(约0.6-0.8mL的无色透明水相,有时水相比重大时,水相在下层,有机相即蓝相在上层,吸取时应吸取透明水相)转移到一个干净的1.5mL塑料离心管中。注意:离心后下层有机相和中间层含有DNA和蛋白质,避免触及,否则将产生蛋白质和DNA污染。为保险起见,可以留下100μl上清液不取。同时吸取上清时最好缓慢进行,否则容易吸出交界面的不可见的丝状DNA。
5. 加入等体积的溶液B,充分颠倒混匀。
6. 将一半的溶液转移到离心吸附柱中,12000rpm室温离心半分钟,弃穿透液。
7. 将剩下的一半溶液转移到同一离心吸附柱中,12000rpm室温离心半分钟,弃穿透液。
8. 加0.7mL 通用洗柱液到离心吸附柱中,室温离心半分钟,弃收集管中的穿透液。一次洗涤一般足够去除杂质。
9. 加0.3mL 通用洗柱液,室温离心半分钟,弃穿透液。此步可以省略。
10.室温12000 rmp离心半分钟。此步十分重要,否则残留的通用洗柱液会影响RNA的使用。
11. 将离心吸附柱转移到一自备的RNase-free 收集管中,加入50-100μL RNA 洗脱液。
12.室温12000 rmp离心半分钟,离心管中溶液即为RNA样品,可以立即使用或存放于-80℃待用。
13. RNA的电泳检测:本试剂盒提取的RNA 最好用甲醛变性胶电泳,如果在非变性的普通琼脂糖胶(in TAE或TBE buffer)上电泳,一定要使用RNA 专用上样液RNAload(操作详见RNAload 使用手册),千万不要使用常用的DNA上样液,因为DNA上样液没有经过去RNase处理,也不能将RNA变性,得到的带型将十分杂乱。
14. RNA 完整性的电泳检测:如果需要做Northern杂交,强烈建议用户使用甲醛变性胶进行RNA电泳,因为非变性胶不能分离所有的RNA分子(BioTechniques,28:414,2000)。
15. RNA产量产率测定:将5-10μl RNA 溶于TE缓冲液中(pH7.5-8.2 之间)检测其在OD260的光吸收。通过光吸收可以得出RNA浓度(1 OD260的RNA=40μg/mL),进而计算出RNA的产量(浓度×体积)和产率(RNA产量/组织用量)。
16. RNA 纯度测定:无污染的总RNA的OD260/OD280一般在1.8-2.1 之间(具体数值与其碱基组成和溶液成分等多种因素有关),高于此范围则分别表示样品可能有蛋白质污染,但一般不影响RT-PCR等反应。
疑难解答:
Q:上样孔里的红色荧光物一定是DNA污染吗?
A:不是。用TAE或TBE电泳液和非变性胶电泳RNA时容易产生此现象,我们初步研究发现大部分红色荧光物是变性不充分的单链RNA通过碱基互补或通过硼*(代"酸")络合(如果使用TBE作电泳液的话)形成的复合物,加RNase处理后,这些红色荧光物(RNA)一般会消失。为避免此现象,建议最好使用甲醛变性胶电泳和RNA 专用上样液(如RNAload)。
Q:如何确认和去处除污染的基因组DNA?
A:如果怀疑有DNA污染,可以用RNase处理RNA样品,然后再电泳。如果上样孔里的红色荧光物不消失,则表示是基因组DNA污染。进一步确认可以使用PCR扩增法。去除污染的DNA可以使用百奥莱博的非酶的DNA去除剂DNA Scavenger或RNase-free DNase,由于RNase-free DNase一般都有残留的RNase污染,所以必须严格按照厂家提供的使用说明书进行操作。
博莱霉素溶液报价关键词:BTN120704,博莱霉素溶液,Bleomycin Solution
·丝状真菌线粒体DNA提取试剂盒
编号:BTN130831
英文名称:Filamentous fungal mitochondria DNA extraction kit
规格:15次
线粒体是重要的、负责能量产生的极其重要的细胞器。对丝状真菌线粒体进行生化,遗传和分子生物学研究都需要先进行线粒体纯化。本产品就是基于密度梯度离心的,专门用于从丝状真菌叶片中纯化完整线粒体、再从中纯化线粒体DNA的试剂盒。
试剂盒特点:
1. 即用型试剂盒,用户不需要单独配制各种溶液。
2. 所得线粒体可用于后续的SDS-PAGE、Western、ELSIA、蛋白组分析、线粒体DNA和线粒体RNA纯化。
3. 本产品足够15次线粒体纯化和15次线粒体DNA提取,每次可处理10-20g菌丝体,能得到1-5mg左右线粒体。
4. 已经成功用于Aspergillus candidus、Aspergillus nidμLans、Magnaporthe oryzae、Neurospora crassa、Penicillium chrysogenum、Rhizopus stononifer等丝状真菌。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 250mL×2 |
| 成分B | 150g |
| 溶液C | 120ml |
| 带柄尼龙滤膜 | 1个 |
| 通用线粒体DNA溶液A | 10ml |
| 通用线粒体DNA溶液B | 5ml |
| 通用线粒体DNA溶液C | 15ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输和保存,保存期限一年。
使用方法:
注意:纯化DNA提取用的线粒体的要求比纯化功能研究用的线粒体的要求要低,但整个操作还是最好在冰上或者在冷室进行,所用器皿和溶液最好在4℃预冷,离心最好要在4℃进行,离心力以g而不是rpm计算。
一:菌丝的摇瓶培养
1. 使用合适的丝状真菌培养基,接种孢子至终浓度为2×10E6/mL。一般100mL液体培养基可以得到0.8-1.2g菌丝体,而本方法一次可以处理10-20g菌丝体,故最好一次培养1-2升。
2.在合适的温度(如25℃、30℃或37℃,根据真菌不同而不同)250rpm/min摇晃培养16-20小时。
3. 用多层纱布或多层过滤纸过滤收集菌丝,用冰浴的自备去离子水洗涤菌丝三次去除残留的培养基。
4. 用吸水纸吸干菌丝的水分,称重后立即使用。如果在-80℃或液氮长期放置,线粒体回收效率将减低。
二:线粒体粗提液的制备
5. 制备溶液A工作液:每次提取需150mL溶液A工作液,制备方法是将20mL溶液A和130mL自备去离子水混合,冰上预冷即可。
6.在200mL烧杯中,加入100mL预冷的溶液A工作液,再加入新制备的菌丝体,然后全部转移到Waring匀浆机(家用果汁匀浆机)中,低速匀浆10秒,避免起泡沫。用玻璃棒把菌丝按入匀浆机底部后,再低速匀浆10秒。注意:还可以选择Dounce玻璃匀浆器,Polytron匀浆机和研磨(加玻璃珠)等方法,但它们单次处理量一般都较小,需多份处理再汇集。
7. 用带柄尼龙滤膜过滤匀浆液,用预冷的200mL量筒收集穿透液。
8. 将剩下的菌丝体转移到Waring匀浆机中,再加入40mL预冷的溶液A工作液,低速匀浆10秒,用上步的带柄尼龙滤膜过滤,用预冷的200mL量筒收集穿透液。注意:带柄尼龙滤膜后可反复使用。
9. 将穿透液分到4个预冷的50mL的塑料离心管中(每个约35mL)。
10.在水平转子离心机上4℃ 4000g离心10分钟,小心转移上清(含线粒体的部分)到4个新的离心管中。沉淀含细胞核和未裂解的细胞,可以弃之不用。如果要用于纯化细胞核DNA,则可以放-80℃长期保留。
11. 将含上清液的4个离心管在4℃ 10000g离心20分钟。
12. 每个离心管中加2.5mL预冷的溶液A工作液重悬线粒体沉淀并汇集(共约10mL),此为线粒体粗提液。
13. 如果直接用线粒体粗提液提取线粒体DNA,容易有细胞核DNA污染。
具体步骤是:在水平转子离心机上4℃ 10000g离心7分钟,小心弃上清,沉淀为线粒体,直接用于第三步的线粒体DNA提取。
14. 如果需要高纯度、无污染的线粒体DNA,则需要用密度梯度离心法将完整的线粒体和其他细胞碎片进一步分离。具体见下步线粒体精提液的制备。
三:线粒体精提液的制备(密度梯度离心法)
15. 制备重液和轻液:将4.1克成分B干粉加到6.3mL溶液C中,充分摇晃混匀得10mL重液。将4.1克成分B干粉加到6.3mL去离子水中,充分摇晃混匀得10mL轻液。
16.在50mL塑料离心管中先加入10mL重液,再在其上轻轻加上10mL轻液,最后加上第11步所得的约10mL线粒体粗提液。
17. 加平衡离心管后在水平转子冷冻超速离心机上4℃ 43000g离心2小时,重液和轻液间的带为完整线粒体。
18. 用广口吸管小心将线粒体转移到新的离心管中,加入等倍体积的预冷的溶液C,轻柔混匀。取少量在相差显微镜下检查线粒体完整性。
19.在水平转子离心机上4℃ 19000 g离心20分钟,小心将上清吸出后,线粒体沉淀可以直接用于DNA提取。
四:线粒体DNA提取
20. 将600μL通用线粒体DNA提取试剂盒溶液A加入到上步得到的线粒体沉淀中并吹打混匀,然后转移到1.5mL离心管中。
21. 65℃放置5分钟。
22. 加入300μL通用线粒体DNA提取试剂盒溶液B,震荡混匀10-30秒。
注意:溶液B非常粘稠,可以将其预热到65℃并剪掉一截枪头后再取。
23. 加入200μL自备的*仿,震荡混匀10-30秒。
24. 12000g室温离心3分钟。此时上清液将变得透明,中间层有白膜。
25.小心转移上清液(约0.8mL)到一个新的1.5mL离心管中,避免触及中间层的白膜,可留少量上清不取。
26. 加入1倍体积的通用线粒体DNA提取试剂盒溶液C,颠倒30次混匀。
27. 12000g室温离心5分钟,小心弃上清液。
28.在离心管中加入1mL自备的75%乙醇,震荡30秒。
29. 12000g室温离心1分钟,小心弃上清液。
30. 12000g室温离心半分钟,残留液体将汇集在管底。
31. 用洗液枪吸弃管底残留液(约50μL)。
32. 加50-100μL自备的TE缓冲液,溶解DNA沉淀即得线粒体DNA溶液。直接取5-10μL电泳检测,其余放直接使用或放-80℃冰箱备用。
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