北京一步法定向原核表达试剂盒厂家

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北京一步法定向原核表达试剂盒厂家由专业试剂供应商北京百奥莱博提供，用于科研目的生化试验项目，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多一步法定向原核表达试剂盒等克隆与表达产品请联系我司咨询订购。

名称：北京一步法定向原核表达试剂盒厂家
编号：ALH359
规格：20次
英文名：One step directional expression Kit
品牌：百奥莱博
本试剂盒载体采用了世界最先进的定向拓扑异构酶克隆技术可以在5分钟内将待表达目的基因（高保真酶扩增的平末端片段）一步法定向克隆到高效pET增强型载体，利用T7lac启动子进行严谨调控，高效表达。

试剂盒组分：
载体————————————20μl
10×Enhancer————————20μl

试剂盒特点：
1. 简单快速，加入待表达基因片段室温仅需5分钟便可完成原核表达载体构建。
2. 定向克隆技术，超过90%插入为正确方向插入，减少克隆筛选耗费的时间。
3. T7lac启动子严谨调控本底表达，实现表达过程的可控和高效表达。
4. 氨苄抗性标记筛选，N端和C端6 ´ Histag标签方便表达后纯化。
5. 带肠激酶(EK)酶切位点，可以方便将标签切除得到不带标签的蛋白。

储存条件：-20℃，有效期半年。

本品别名：一步法定向表达试剂盒|一步法定向原核表达试剂盒

北京一步法定向原核表达试剂盒厂家极具性价比，此外，我公司正火爆促销以下产品：

·细胞核蛋白/浆蛋白分提试剂盒
编号：ALH387
英文名称：Nuclear and Cytoplasmic Protein Extraction Kit
规格：50次
本试剂盒提供了一种简单、方便的从培养细胞或新鲜组织中抽提核蛋白与浆蛋白的方法。约90分钟就可以完成培养细胞的核蛋白与浆蛋白的分离。抽提得到的蛋白为非变性，有活性，可以用于Western、EMSA、footprinting、报告基因检测以及酶活力测定等后续操作。本试剂盒是通过细胞浆蛋白抽提试剂A和B，在低渗透压条件下，使细胞充分膨胀后破坏细胞膜，释放出浆蛋白，然后通过离心得到细胞核沉淀。最后通过高盐的细胞核蛋白抽提试剂抽提得到核蛋白。本试剂盒可以抽提50个，数量为2×10^6个Hela细胞（约40mg）的样品。可根据需要按比例放大，缩小提取规模。

试剂盒组份：
浆蛋白提取试剂A———————————10ml
浆蛋白提取试剂B———————————0.55ml
核蛋白提取试剂———————————2.5ml

注意事项：
1.需自备PMSF， PMSF一定要在抽提试剂加入到样品前2-3分钟内加入，以免PMSF在水溶液中很快失效。
2.抽提蛋白的所有步骤都需在冰上或4℃进行。
3..对于组织样品，本试剂盒仅适合于新鲜组织，对冻存过的组织抽提效果差。可以抽提的组织样品数通常不足50个。
4.使用本试剂盒抽提得到的细胞核蛋白与细胞浆蛋白都可以直接用我司的BCA蛋白定量试剂盒测定蛋白浓度。但不适合用Bradford法测定蛋白浓度。

储存条件：4℃，有效期12个月。

·酵母DNA提取试剂盒
编号：ALH154
英文名称：Yeast DNA Extraction Kit
规格：50次|100次
本试剂盒用于快速的从酵母中提取基因组DNA。在针对酵母细胞特点配制的酵母裂解液作用下， 酵母细胞被裂解释放出基因组DNA，然后蛋白沉淀液选择性沉淀去除蛋白，最后纯净的基因组DNA通过异丙醇沉淀并重溶解于DNA溶解液。

试剂盒组份(100次)：
酵母裂解液——————30ml
蛋白沉淀液——————10ml
DNA溶解液 ——————5ml

产品特点：
1.不需要使用有毒的苯酚、氯*(代"仿")等试剂。
2.快速，简捷，整个过程可在1个小时内完成。
3.结果稳定，产量高（比离心柱型的产量高一倍以上），OD260/OD280典型的比值达1.7～1.9，长度可达50Kb-150kb，可直接用于PCR，Southern-blot和各种酶切反应以及文库构建。

操作步骤：（实验前请先阅读注意事项）
1. 吸取1.5ml 酵母培养物到一个1.5ml 离心管； 12,000rpm 离心2 分钟，尽可能弃上清，必要时候可以用枪吸去。
2. 高速涡旋振荡，打散重悬酵母细胞团。
3. 加入300μl 酵母裂解液，涡旋振荡混匀，或者用1 毫升的枪头反复吹打混匀。酵母细胞的重悬分散对下一步裂解非常重要，必须充分分散重悬。
4. 将裂解物放置在70℃水浴15-30 分钟。如果产量低，可以适当提高水浴温度和延长水浴时间，中间可以涡旋振荡混匀几次帮助裂解。
5. 冰上至少5 分钟使回复到室温。
6. 在回复到室温的裂解物内加入100μl 蛋白沉淀液后，在涡旋振荡器上高速连续振荡混匀20 秒。混匀后可能见到一些小的蛋白团块。冰浴5 分钟。
7. 13,000rpm 离心5-10 分钟。这时应该可以见到管底蛋白沉淀，也可能见到一些蛋白沉淀漂浮在液体表面。
8. 小心缓慢吸取上清到一个新的1.5ml 离心管中，不要吸到沉淀。吸取上清时，注意不要吸到管底的和漂浮在液体表面的蛋白沉淀。如果不小心将蛋白沉淀转入新的离心管中，可再次离心2 分钟后取上清。
9. 加入等体积的室温异丙醇（约400μl），颠倒30 次混匀或者直到出现絮状DNA 沉淀（或者白色浑浊沉淀）。
10. 12,000rpm 离心1 分钟，在管底可以见到白色的DNA 沉淀块，倒弃上清。
11. 加入1ml 70％乙醇，颠倒几次漂洗DNA 沉淀，12,000rpm 离心1 分钟， 倒去上清（注意不要把DNA 沉淀倒掉了），倒置后在吸水纸上轻敲几下以控干残留乙醇，还可以用枪头小心吸掉管底沉淀周围和管壁的残留乙醇，空气晾干沉淀几分钟。注意不要干燥过头，否则DNA极其难溶；也不能残留太多乙醇，否则乙醇可能抑制下游如酶切反应。
12. 加入40μl DNA 溶解液重新水化溶解DNA 沉淀，轻弹管壁混匀，可以放置在65℃温育30-60 分钟（不要超过一小时），也可以在室温或者4℃放置过夜来重新水化DNA。期间不时的轻弹管壁帮助重新水化DNA。
13. 加入10-15μl RNase A（10mg/ml），或者1-2μl RNase A（100mg/ml）颠倒混匀，37℃温育30－60 分钟去除残留RNA。该步骤主要作用为去除残留的RNA，如果残留RNA多，可以适当延长时间。如果残留RNA不影响实验，可略去该步骤。如果残留的RNA酶可能影响实验，也可以用等体积酚/氯*(代"仿")抽提去除，然后用标准的乙醇沉淀回收DNA。
14. DNA 可以存放在2-8℃，如果要长时间存放，可以放置在－20℃。

储存条件：室温，有效期12个月。


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·大量组织细胞DNA提取试剂盒
编号：ALH128
英文名称：Massive cells/tissue genomic DNA rapid extraction kit
规格：20次|50次
本试剂盒用于快速的从大量动植物细胞/组织中提取基因组DNA。样品研磨或者匀浆后加入细胞核裂解液，首先在强去污剂或者和蛋白酶K协同作用下裂解细胞释放出基因组DNA，接着加入RNase A去除RNA，然后蛋白沉淀液选择性沉淀去除蛋白，最后纯净的基因组DNA通过异丙醇沉淀并重溶解于DNA溶解液。

试剂盒组份（20次）：
RNase A(10mg/ml)——————360μl
细胞核裂解液————————180ml
蛋白沉淀液—————————60ml
DNA溶解液—————————10ml

产品特点：
1.不需要使用有毒的苯酚、氯*(代"仿")等试剂。
2.快速，简捷，组织样品操作整个过程可在1个小时内完成。
3.结果稳定，产量高（比离心柱型的产量高一倍以上），OD260/OD280典型的比值达1.7～1.9，长度可达50kb-150kb，可直接用于PCR，Southern-blot和各种酶切反应以及文库构建。

注意事项：
1. 所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到3,000xg，可容纳50ml 离心管的台式离心机。
2. 用户需自备异丙醇、70％乙醇、PBS(用于细胞)、液氮研钵/或匀浆器(用于组织)、水浴箱。
3. 开始实验前将需要的水浴先预热好备用。
4. 本试剂盒为溶液型，可以很容易的按照比例扩大或者缩小每次处理的组织细胞量，请联系我们索取其它处理量的操作手册。

储存条件：室温，有效期12个月。

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