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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
99
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12个月
- 供应商:
北京诺博莱德科技有限公司
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已收到实际货物为准
产品简介:
BCIP/NBT 碱 性磷酸 酯酶 显色试 剂盒 (BCIP/NBT Alkaline Phosphatase Color Development Kit)是一种用于免疫组化显色、Western 等膜显色和诱导多功能干细胞 iPS鉴定等的试剂盒。 BCIP/NBT 是碱性磷酸酯酶的常用底物,在碱性磷酸酯酶的催化下, BCIP会被水解产生强反应性的产物,该产物会和 NBT 发生反应,形成不溶性的深蓝色至蓝紫色的 NBT-formazan。
NobleRyder BCIP/NBT Alkaline Phosphatase Color Development Kit 可用于细胞或组织的碱性磷酸酯酶显色包括诱导多功能干细胞 iPS 的鉴定,也可用于 Western 等结合有碱性磷酸酯酶的膜的显色检测\细胞或组织内源性的碱性磷酸酯酶显色。
产品组成:
| 编号 名称 |
P9878 50ml |
Storage |
| 试剂(A): Alkaline Phosphatase Color Buffer | 50ml | 4℃ |
| 试剂(B): BCIP solution(300×) | 175μl | 4℃ 避光 |
| 试剂(C): NBT solution(150×) | 350μl | 4℃ 避光 |
| 使用说明书 | 1 份 | |
1、洗涤液
2、(可选)中性红染色液
BCIP/NBT碱性磷酸酶显色试剂盒
操作步骤(仅供参考):
1、对于组织切片或细胞样品或膜,在与碱性磷酸酯酶标记的抗体或其它形式的探针孵育后,用适当洗涤液洗涤 3~5 次,每次 3~5min。
2、对于检测内源性碱性磷酸酯酶的组织或细胞样品,在适当固定后,也用适当洗涤液洗涤3~5 次,每次 3~5min。
3、按照如下比例依次加入各溶液,混匀后即配制成 BCIP/NBT 染色工作液:
| 名称 | 规格 | 规格 |
| Alkaline Phosphatase Color Buffer | 3ml | 10ml |
| BCIP solution(300×) | 10μl | 33μl |
| NBT solution(150×) | 20μl | 66μl |
| BCIP/NBT 染色工作液 | 3.03ml | 11ml |
5、加入适量 BCIP/NBT 染色工作液,确保能充分覆盖样品。
5、室温避光孵育 5~30min 或更长时间(可长达 24 小时),直至显色至预期深浅。
6、去除 BCIP/NBT 染色工作液,用蒸馏水洗涤 1~2 次即可终止显色反应。
7、对于组织切片或细胞样品,显色反应终止后,如有必要可以用中性红染色液(neutral red staining solution)染色,以便于观察。对于膜,显色反应终止后,可以室温晾干避光保存。
注意事项:
1、BCIP 对人体有刺激性,NBT 对人体有害,请注意适当防护。
2、操作过程中,尽量避免强光照射。
3、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
BCIP/NBT碱性磷酸酶显色试剂盒
有效期:12个月有效。
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| 产品编号 | 产品名称 |
| C0930 | 胰蛋白酶- EDTA 溶液(0.25%:0.02%) |
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文献和实验货号 品名 规格 价格 备注 C1601 BCIP/NBT显色试剂盒 - 深蓝色 50ml 240 Sigma原料,单一组分 C1603 单组分pNPP 显色液 - 黄色
,Santa Cruz等公司的原装抗体或进口分装抗体.具体请参见免疫学部分产品----第一抗体. C.标记二抗: 根据一抗的来源选择二抗. 购买信息: 请参见免疫学部分试剂---各种标记抗体 D.底物系统: 采用常规底物或化学发光底物. (1)显色法: 常用底物为BCIP/NBT或DAB .此法简单,但灵敏度不高,并难以从膜上去除. (2)化学发光法: 目前比较常用的方法.灵敏度较高,检测时可采用X光胶片或CCD成像系统. 不同显色方法产品比较
剂(1% Ignite Hoechst-Roussel Agri-Vet Company, NJ) ( 5 ) 蛋白提取缓冲液:50 mmol/L 磷酸钠缓冲液(pH 7.0 ) ,10 mmol/L EDTA(乙二胺四乙酸), 0.1% (V/V) Triton X-100,0.1% (m/V ) Sarkosyl,10 mmol/L 疏基乙醇,10 mmol/L PMSF (phenylmethylsulfonyl fluoride)。 ( 6 ) 碱性磷酸酶
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