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- NobleRyder
- P0821
- 北京
- 2025年12月17日
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99
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12 个月
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北京诺博莱德科技有限公司
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已收到实际货物为准
| PAGE非变性蛋白上样缓冲液(5×) |
PAGE非变性蛋白上样缓冲液(5×)是一种经过改良的以溴酚蓝为染料的不含变性剂的5倍浓缩的蛋白上样缓冲液。NobleRyder PAGE非变性蛋白上样缓冲液(5×)常用于PAGE的非变性蛋白样品的上样。
产品组成：
| 编号 名称 |
P0821 | Storage |
| PAGE 非变性蛋白上样缓冲液(5×) | 5ml | -20℃ |
| 使用说明书 | 1份 | |
PAGE非变性蛋白上样缓冲液(5×) 操作步骤(仅供参考)：
1、在室温或不超过37℃的水浴中溶解PAGE非变性蛋白上样缓冲液(5×)。水浴溶解后立即室温存放，尽量避免长时间置于水浴中。
2、按照每4μl蛋白样品加入1μl蛋白上样缓冲液(5×)的比例，混合蛋白样品和PAGE非变性蛋白上样缓冲液(5×)。
3、直接上样到SDS-PAGE 胶加样孔内即可。
4、通常电泳至蓝色染料到达PAGE 胶的底部附近即可停止。
注意事项：
1、PAGE 非变性蛋白上样缓冲液(5×)必须完全溶解后再使用。
2、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
PAGE非变性蛋白上样缓冲液(5×) 有效期：12 个月有效。亦可4℃短期保存。
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文献和实验关于论坛中所有Native PAGE/非变性电泳及蛋白回收的经典总结
菌体加4×上样缓冲液煮沸, 12.5% SDS PAGE 分析。 大量表达时, 于1 L 4×YT培养基中摇至A600=0.5～2.0时, 加IPTG(终浓度0.5 mmol/L)诱导1～4 h。 超声破菌, 12 000 g离心除去细菌碎片后, 裂菌上清液用GST亲和树脂纯化(参照BD Biosciences Clontech 使用手册p1-15), 纯化融合蛋白质GST-S600经凝血酶切, 酶切条件为： 1×PBS, 室温反应16 h。 酶切后样品经制备型PAGE电泳分离, 用KCl染色
min，95℃加热5min 使酶失活,并立即置冰浴冷却； 3. 将逆转录产物稀释3倍，混匀，加入50μmol/L的4种dNTP，上游和下游两种引物各5pmol/L，1×106 cpm 32 P末端标记引物，1U Taq DNA聚合酶，反应总体积为50μl，加50μl石蜡油，共进行25个循环，95℃×30s，95℃～55℃斜坡，2min，55℃30s，55℃～72℃斜坡，30s，72℃×10min。 4. 取PCR产物5～10μl于10% PAGE胶中进行电泳分析,缓冲液
. ( 3 ) l× 凝胶电泳 加样缓冲液： 50 mmol / L Tris -CI ( pH 6 . 8 ) 50 mmol / L DTT 2 % SDS (电泳级) 0.1 % 溴酚蓝 10 % 甘油 2、大肠杆菌包涵体的分离与蛋白纯化 材料： 1 )酶溶法 (1)裂解缓冲液： 50 mmol / L Tris-CI ( pH 8 . 0 ) 1 mmol / L EDTA 100 mmol
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