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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 英文名:
BCIP/NBT Alkaline Phosphatase Color Development Kit
- 保质期:
一年
- 供应商:
上海联迈生物工程有限公司
- 保存条件:
4℃保存
- 规格:
100ml
| 产品编号 | 产品名称 | 产品包装 | 产品价格 |
| LM3206 | BCIP/NBT碱性磷酸酯酶显色试剂盒 | 共100ml | 223.00元 |
色、Western等膜显色和诱导多功能干细胞iPS鉴定等的试剂盒。
碱性磷酸酯酶(Alkaline Phosphatase, AP/ALP/AKP/ALKP/ALPase/Alk Phos)常被称作碱性磷酸酶(EC 3.1.3.1),是一类水解酶,通过水解磷酸单酯将底物分子上的磷酸基团除去,并生成磷酸根离子和自由的羟基,其去磷酸化作用的底物包括核苷酸、蛋白质和生物碱等,并在碱性条件下最为有效。该酶是一组同功酶的统称。常见的小牛肠碱性磷酸酶(Calf Intestinal Alkaline
Phosphatase, CIAP/CIP)被广泛用于二抗等的标记最终用于蛋白和核酸等的检测,也常用于DNA或RNA 5’和3’末端的去磷酸
化(去单磷酸化),特别是质粒的5’末端去磷酸化以避免质粒自连等。
BCIP/NBT是碱性磷酸酯酶的常用底物。在碱性磷酸酯酶的催化下,BCIP会被水解产生强反应性的产物,该产物会和NBT发生反应,形成不溶性的深蓝色至蓝紫色的NBT-formazan。
本试剂盒可以用于细胞或组织的碱性磷酸酯酶显色包括诱导多功能干细胞iPS的鉴定,也可以用于Western等结合有碱性磷酸酯酶的膜的显色检测。同时也可以用于细胞或组织内源性的碱性磷酸酯酶显色。
有Nature论文注明使用了本试剂盒,参考使用本产品的文献2。
包装清单:
| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| LM3206-1 | 碱性磷酸酯酶显色缓冲液 | 100ml |
| LM3206-2 | BCIP溶液(300X) | 350μl |
| LM3206-3 | NBT溶液(150X) | 700μl |
| - | 说明书 | 1份 |
4℃保存,一年有效。BCIP溶液和NBT溶液需避光保存。
注意事项:
BCIP对人体有刺激性,NBT对人体有害,请注意适当防护。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验检测方法 对于探针和靶序列杂交之后的检测,我们通常使用碱性磷酸酶(AP)耦联的抗体,采用显色法或化学发光法检测。在碱性磷酸酶的底物中,我们使用CDP-Star或CSPD用于化学发光法检测,NBT/BCIP用于显色法检测。同时,对于膜杂交中的化学发光信号的检测,建议使用Lumi-Film以获得最理想的信号。 检测底物 即用型CDP
一般 沉淀颜色 紫色 蓝紫色 蓝紫色 棕红色 用途 AP显色 AP或者葡糖氧化酶 WB、原位杂交和免疫组化 AP和免疫组化 四种常用AP显色方法的比较 上表列举了常用的AP显色方法比较,包括BCIP(5-溴-4-氯-3-吲哚-磷酸盐)、NBT(四唑硝基蓝)和INT(硝基四紫唑),以及它们之间的组合使用。其中,BCIP/NBT是碱性磷酸酶的最佳底物组合之一,具有灵敏度最高、显色锐利、成像性能好等特点,是最常
漂洗10~30min。 (12)2×SSC(含20μg/mlRNaseA, 适于RNA探针)冲洗30min,37℃。 (13)1×SSC,0.1×SSC,37℃各漂洗10~30min。 (14)0.05mol/l PBS 冲洗4×5min。 (15)3%BSA(0.4%Triton X-100 PBS配)37℃保温30min。 (16)Avidin �AKP(碱性磷酸酶)(1:500~1:100,0.4%Triton X-100 PBS配)室温1~3h
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