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- 2026年01月09日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 提供商：
上海代轩生物科技有限公司
- 服务名称：
流式细胞凋亡检测
- 规格：
样本
细胞凋亡是细胞的一种基本生物学现象，在多细胞生物去除不需要的或异常的细胞中起着必要的作用。它在生物体的进化、内环境的稳定以及多个系统的发育中起着重要的作用。细胞凋亡不仅是一种特殊的细胞死亡类型，而且具有重要的生物学意义及复杂的分子生物学机制。细胞凋亡是指为维持内环境稳定，由基因控制的细胞自主的有序的死亡。细胞凋亡与细胞坏死不同，细胞凋亡不是一件被动的过程，而是主动过程，它涉及一系列基因的激活、表达以及调控等的作用，它并不是病理条件下，自体损伤的一种现象，而是为更好地适应生存环境而主动争取的一种死亡过程。细胞凋亡检测技术包括有Annexin V/PI双染检测细胞早期凋亡和TUNEL法检测细胞晚期凋亡， 可用于检测不同类型、不同处理方式、不同时期细胞凋亡状况及分析凋亡细胞比例。
服务流程：
Annexin V/PI双染检测调亡（适用于细胞早期凋亡检测）
1.细胞培养及接种
2.诱导细胞凋亡
3.细胞收集、计数
4.Annexin V/PI标记
5.流式细胞仪检测
6.结果分析
TUNEL法检测细胞凋亡（适用于细胞晚期凋亡检测）
1.标本预处理
2.内源性过氧化物酶灭活
3.TdT酶反应
4.生物素标记
5.染色
6.封片观察
客户提供：细胞株（可由本公司代购），细胞处理方式及相关试剂。
实验结果：实验原始数据、分析结果；实验流程及完整报告一份。
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文献和实验量为35~36kD的Ca2 +依赖性磷脂结合蛋白，与磷脂酰丝氨酸有高度亲和力，故可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜结合。因此Annexin V被作为检测细胞早期凋亡的灵敏指标之一。将Annexin V进行荧光素（FITC）标记，以标记了的Annexin V作为荧光探针，利用荧光显微镜或流式细胞仪可检测细胞凋亡的发生。 2、Q：用流式作细胞凋亡为什么跟tunel差别那么大啊？？tunel测出来的细胞凋亡率大概有30%而作流式测出来的凋亡率只有2%（阴性
脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜结合。因此Annexin V被作为检测细胞早期凋亡的灵敏指标之一。将Annexin V进行荧光素（FITC）标记，以标记了的Annexin V作为荧光探针，利用荧光显微镜或流式细胞仪可检测细胞凋亡的发生。 2. Q：用流式作细胞凋亡为什么跟tunel差别那么大啊？ A：tunel测出来的细胞凋亡率大概有30%而作流式测出来的凋亡率只有2%（阴性对照0.5%）差别好大啊，用的是beckman公司的Annexin V /PI双染试剂盒，实验步骤如下：
细胞； （5）将细胞重悬于含100 ug/ml RNase A和50 ug/ml PI的PBS中，室温孵育30 min； （6）将经PI染色和RNase A消化后的细胞悬液用300目的尼龙膜过滤后即可利用流式细胞仪进行细胞周期分布和凋亡细胞定量的分析。3. Q：流式检测细胞周期时加RNA酶所需的温度？ A： 其实有关RNA酶在凋亡检测制样过程中使用的必要性问题尚有人持不同意见，该观点的人认为RNA酶在环境中无所不在，常规制样过程中所接触的试剂和环境中的RNA酶已足以降解样品中的RNA
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